本发明涉及从密花大戟中分离的大环二萜类化合物及其制备方法和用途，以密花大戟（E.glomerulans）的全草为原料，用有机溶剂提取，通过溶剂萃取法、正相硅胶柱层析法、反相硅胶柱层析法、Sephadex LH‑20凝胶柱层析法中的三种至四种方法进行分离，得到式（Ⅰ）、式（Ⅱ）和式（Ⅲ）三个新的假白榄烷型大环二萜类化合物，并对这式（Ⅰ）、式（Ⅱ）和式（Ⅲ）三个化合物进行了抗肿瘤多药耐药逆转活性测定，结果表明：所述式（Ⅰ）、式（Ⅱ）和式（Ⅲ）三个新的假白榄烷型大环二萜类化合物具有不同程度的抗肿瘤多药耐药逆转活性，与抗肿瘤药物联合使用可不同程度地逆转肿瘤耐药细胞对抗肿瘤药物的耐药性，可用于制备抗肿瘤多药耐药逆转药物。