适配体修饰银纳米簇的制备及在生物分子检测中的应用
文献类型:学位论文
作者 | 兰晋泽 |
答辩日期 | 2019-05-17 |
授予单位 | 中国科学院大学 |
授予地点 | 中国科学院新疆理化技术研究所 |
导师 | 王富 |
关键词 | 荧光银纳米簇 适配体 生物分子检测 细胞成像 |
学位名称 | 硕士 |
学位专业 | 材料物理与化学 |
英文摘要 | 对于生物小分子传统的分析手段包括电化学分析法、质谱法、免疫分析法、蛋白印迹法、酶联免疫分析测定(ELISA)、纳米等离子传感等。以上方法在实际应用中都有着一定得不足,例如繁杂的预处理过程,特殊的仪器设备,复杂的分析过程等。因此发展新的检测方法具有非常重要得意义。荧光分析法以高效便捷,成本低等优势,吸引了广泛的关注。合成荧光性能优异、选择性极高的荧光探针是荧光检测法的关键。在本论文中,采用银纳米簇(AgNCs)作为荧光探针,修饰了核酸适配体(aptamer),对生物激素毒素双酚A(BPA)进行检测;对MCF-7乳腺癌细胞进行了特异性识别细胞成像;对细胞内氧化应激损伤水平的评估并对银纳米簇的光动力治疗效果进行了研究。具体内容分为以下三个部分:(1)制备了BPA适配体稳定的银纳米簇实现BPA的检测。该银纳米簇使用BPA的适配体作为稳定剂,采用简单快速的一步还原法,优化AgNCs的反应条件及体系。所制备的BPA aptamer稳定的银纳米簇(BPA@AgNCs),在580 nm激发光照射下可发出红色荧光(Em = 651 nm),并且通过荧光增强效应实现了对溶液中BPA分子的检测,同时具有较高的选择性,通过荧光强度变化可区分BPA类似物。(2)制备了特异性适配体(MA)稳定的银纳米簇实现细胞的特异性识别成像。该银纳米簇以Anterior Gradient-2 antigen(AGR)为目标分子,并对其对应的特异性适配体序列进行了修饰,在序列尾端添加与银离子产生强荧光的序列(12C)。使用一步还原法,成功地合成了由MA适配体序列偶联的银纳米簇(MA@AgNCs)。MA@AgNCs具有良好的荧光性能,量子产率高达87.43%,远超大多数同类研究水平。此外,对反应过程中反应条件的调节研究表明,预混合时间和预混合过程对MA@AgNCs的荧光性质有重要影响。MA@AgNCs表现出良好的稳定性,荧光性可保持数周;在细胞培养过程中,表现出良好的热稳定性。此外,在细胞成像过程中,MA@AgNCs在细胞质中以AGR为目标分子集聚,可以在MCF-7细胞与HeLa细胞中实现特异性识别。表明MA@AgNCs在蛋白跟踪、细胞成像和癌症诊断等领域具有巨大的潜力。(3)制备了氧化应激损伤产物8-OHdG适配体偶联的银纳米簇(8-OHdG@AgNCs)用于细胞内ROS水平的评估。该银纳米簇采用氧化应激损伤产物8-羟脱氧鸟苷(8-OHdG)对应的适配体作为稳定剂配体,使用一步还原反应法,成功地合成了氧化应激损伤产物8-OHdG适配体偶联的银纳米簇(8-OHdG@AgNCs)。8-OHdG@AgNCs具有良好的荧光性能,水相分散性,生物相容性,细胞环境荧光稳定性。在细胞成像过程中,8-OHdG@AgNCs可以在细胞内根据其氧化应激损伤水平,在细胞内的聚集。其效果与ROS水平成正相关。 |
页码 | 70 |
源URL | [http://ir.xjipc.cas.cn/handle/365002/5967] ![]() |
专题 | 新疆理化技术研究所_环境科学与技术研究室 |
推荐引用方式 GB/T 7714 | 兰晋泽. 适配体修饰银纳米簇的制备及在生物分子检测中的应用[D]. 中国科学院新疆理化技术研究所. 中国科学院大学. 2019. |
入库方式: OAI收割
来源:新疆理化技术研究所
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