迟缓爱德华氏菌（Edwardsiella tarda）是一种重要的鱼类病原菌，能引发多种养殖鱼类的严重病害，给水产养殖业造成巨额的经济损失。细菌外膜蛋白是细菌细胞的重要组成部分。本研究以迟缓爱德华氏菌的外膜蛋白为切入点，分析并研究了两个迟缓爱德华氏菌的外膜蛋白功能（命名为：Omp1_Et和Omp2_Et）。研究发现Omp1_Et和Omp2_Et位于迟缓爱德华氏菌的外膜表面，推测是与毒力相关的外膜蛋白。重组表达的Omp1_Et和Omp2_Et蛋白（rOmp1_Et和rOmp2_Et）能够与牙鲆外周血淋巴细胞结合。为了进一步研究这两个外膜蛋白的功能，我们利用缺失敲除的方式，构建了两株迟缓爱德华氏菌的基因敲除株，即基因Omp1敲除株TX01Δomp1和Omp2基因敲除株TX01Δomp2。敲除株TX01Δomp1和TX01Δomp2的毒力与野生株相比，在致死率，细胞侵染和黏附，运动性及其生物膜形成能力方面显著降低。与野生株相比，敲除株TX01Δomp1侵染组织的能力明显下降；TX01Δomp1和TX01Δomp2在过氧化氢中的存活率显著降低； TX01Δomp1在酸性条件下的存活率显著降低。利用rOmp1_Et和rOmp2_Et构建的亚单位疫苗免疫牙鲆，发现rOmp1_Et和rOmp2_Et亚单位疫苗能够增强牙鲆产生的免疫反应，帮助牙鲆抵御迟缓爱德华氏菌的感染。综上所述，研究表明Omp1_Et和Omp2_Et是位于迟缓爱德华氏菌外膜表面的毒力相关因子，并且Omp1_Et作为亚单位疫苗，能诱导牙鲆免疫系统产生良好的免疫反应。本研究首次证实了Omp1_Et和Omp2_Et是位于迟缓爱德华氏菌外膜表面的毒力相关因子，构建的Omp1_Et和Omp2_Et亚单位疫苗对于牙鲆感染迟缓爱德华氏菌有良好的免疫保护效应。