虹鳟肿瘤坏死因子(TNFα)基因体外表达与纯化的研究
文献类型:期刊论文
作者 | 蔡中华1; 宋林生1; Zou Jun2; C J Secombes2; 董双林3 |
刊名 | 水生生物学报
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出版日期 | 2003 |
卷号 | 27.0期号:006页码:596-601 |
关键词 | 肿瘤坏死因子 重组 纯化 基因体外表达 感受态细菌 |
ISSN号 | 1000-3207 |
其他题名 | In vitro expression and purification of rainbow trout (oncorhynchus mykiss)TNFα |
英文摘要 | 将虹鳟两种肿瘤坏死因子TNFα和TNFα2基因的成熟肽编码区域,用带有BamHI和HindⅢ酶切位点的基因特异性引物进行:PCR扩增。扩增片段用限制性内切酶消化并连接到pQE30表达载体上,连接产物转化到大肠杆菌JM109感受态细菌中。转化子经PCR筛选,质粒测序,完成了虹鳟两种TNFα基因重组子的构建。重组子经体外培养和诱导后,获得了高效表达的TNFα重组蛋白。高效表达的重组TNFα不受诱导剂IPTG的影响,并且由于重组子高效表达而形成了包涵体;重组蛋白产量约占菌体蛋白总量的25%—30%。应用Ni-NTA和固定金属亲和层析(IM-PC)技术,在变性条件下获得了高度纯化的重组蛋白,纯化重组蛋白的产量约为0.5—1mg/L。 |
语种 | 中文 |
CSCD记录号 | CSCD:1172109 |
源URL | [http://ir.qdio.ac.cn/handle/337002/175522] ![]() |
专题 | 海洋研究所_实验海洋生物学重点实验室 |
作者单位 | 1.中国科学院海洋研究所 2.阿伯丁大学 3.中国海洋大学 |
推荐引用方式 GB/T 7714 | 蔡中华,宋林生,Zou Jun,等. 虹鳟肿瘤坏死因子(TNFα)基因体外表达与纯化的研究[J]. 水生生物学报,2003,27.0(006):596-601. |
APA | 蔡中华,宋林生,Zou Jun,C J Secombes,&董双林.(2003).虹鳟肿瘤坏死因子(TNFα)基因体外表达与纯化的研究.水生生物学报,27.0(006),596-601. |
MLA | 蔡中华,et al."虹鳟肿瘤坏死因子(TNFα)基因体外表达与纯化的研究".水生生物学报 27.0.006(2003):596-601. |
入库方式: OAI收割
来源:海洋研究所
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