咔唑降解菌的分离及其相关基因的扩增
文献类型：学位论文
| 作者 | 黄杰勋 |
| 学位类别 | 硕士 |
| 答辩日期 | 2006-06-02 |
| 授予单位 | 中国科学院过程工程研究所 |
| 授予地点 | 过程工程研究所 |
| 导师 | 刘会洲 |
| 关键词 | 脱氮 咔唑 生物降解 克雷伯氏菌 基因 |
| 学位专业 | 化学工艺 |
| 中文摘要 | 石油中的含氮化合物不仅影响石油产品的质量，而且会导致严重的环境污染，使得脱氮技术多年来一直是石化行业的一个活跃的研究方向，并且随着环境法规的日益严格，脱氮技术更将成为研究的热点。本文以原油中的主要含氮化合物咔唑作为模型化合物展开微生物的脱氮研究。 从染料污染的土壤中分离出一株新的咔唑降解菌LSSE-H2，能以咔唑作为唯一的碳源、氮源和能源。该菌在30 ℃，以咔唑为唯一的碳源、氮源的选择性培养基(CNFM)中，经过56 h就能把6 mmol/L的咔唑完全降解。通过Biolog微生物鉴定系统检测该菌对不同单一碳源利用能力所得到的特征代谢指纹，表明属于克雷伯氏菌属。该菌16S rDNA序列的BLAST结果显示其与克雷伯氏菌属（Klebsiella）的16S rDNA的同源性最高。因此，最后将该菌确定为克雷伯氏菌属。 按照已公布的car基因簇序列设计同源引物，PCR扩增出LSSE-H2的包含5个咔唑降解基因的car基因簇片断，测序结果表明咔唑降解基因高度保守，与Sphingomonas sp. KA1和Sphingomonas sp. GTIN11相应的咔唑基因的同源性都达到100%，只在基因簇的非编码区上发现少数碱基不同。 高效液相色谱分析表明LSSE-H2降解咔唑的途径中主要中间产物为邻氨基苯甲酸(AN)和邻苯二酚(CAT). 该菌利用咔唑的最佳温度范围在28-32 ℃之间。在30 ℃，以咔唑为唯一的碳源、氮源的选择性培养基(CNFM)中，经过56 h就几乎能把12 mmol/L咔唑完全降解，在16 mmol/L的咔唑浓度中也同样表现出高度的咔唑降解活性。对比分析LSSE-H2在不同营养成分的培养基中对咔唑的降解情况表明该菌能优先代谢更易利用的小分子碳源、氮源，只有在以咔唑作为唯一碳源或氮源时才能对咔唑进行快速的降解。 |
| 语种 | 中文 |
| 公开日期 | 2013-09-13 |
| 页码 | 87 |
| 源URL | [http://ir.ipe.ac.cn/handle/122111/1066]  |
| 专题 | 过程工程研究所_研究所（批量导入） |
| 推荐引用方式 GB/T 7714 | 黄杰勋. 咔唑降解菌的分离及其相关基因的扩增[D]. 过程工程研究所. 中国科学院过程工程研究所. 2006. |
入库方式： OAI收割
来源：过程工程研究所
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