枯草芽孢杆菌联产纳豆激酶和γ-聚谷氨酸的研究
文献类型：学位论文
| 作者 | 秦国宏 |
| 学位类别 | 硕士 |
| 答辩日期 | 2007-06-11 |
| 授予单位 | 中国科学院过程工程研究所 |
| 授予地点 | 过程工程研究所 |
| 导师 | 邢建民 |
| 关键词 | 纳豆激酶 γ-聚谷氨酸 非依赖型 芽孢杆菌 |
| 其他题名 | Co-Production of γ-PGA and Nattokinase by Bacillus subtilis Natto NLSSe |
| 学位专业 | 生物化工 |
| 中文摘要 | γ-聚谷氨酸和纳豆激酶是芽孢杆菌合成的两种重要的生物物质。γ-聚谷氨酸是一种水溶性的，可食用的，对人体和环境无毒害的可生物降解的高分子，可以广泛应用于食品、化妆品、医药及水处理等领域。纳豆激酶是一种新型的用于治疗和预防心脑血管栓塞的有效溶栓剂。本文从合成纳豆激酶的枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis Natto NLSSe出发，探索了纳豆激酶和γ-聚谷氨酸的联产工艺条件。 实验结果表明，该菌株能在不添加谷氨酸的培养基中发酵合成γ-聚谷氨酸，是谷氨酸非依赖型菌株，根据文献中报道的γ-聚谷氨酸合成相关基因设计引物，在不同退火温度条件下对相关基因进行PCR扩增，均没有得到预期的目标条带，推测可能是谷氨酸非依赖型菌与谷氨酸依赖型菌的γ-聚谷氨酸生产相关的基因同源性较低，两者生产γ-聚谷氨酸的机理并不相同。 该菌株合成的γ-聚谷氨酸的分子量在200-300万Dalton之间。对γ-聚谷氨酸合成最有利的碳、氮源分别是柠檬酸和NH4C1，在37 ℃培养96 h后其产量达到最大。在培养的初始阶段，随着微生物的快速生长及γ-聚谷氨酸的合成，柠檬酸的浓度迅速下降，从最初的20 g/L下降到2 g/L，而NH4C1的利用速率较慢；培养后期，微生物生长和γ-聚谷氨酸合成的速率减慢，柠檬酸浓度下降速率也随之减缓。 在发酵培养72 h后发酵液中纳豆激酶酶活达到最大。对纳豆激酶合成最有利的碳源、氮源分别是蔗糖和大豆蛋白胨。对关键培养基组分进行正交实验，结果表明，柠檬酸对γ-聚谷氨酸产量影响较大，而对纳豆激酶酶活基本没有太大影响；大豆蛋白胨对纳豆激酶酶活有显著性影响，但是对γ-聚谷氨酸的影响很小。利用本实验菌株进行了γ-聚谷氨酸和纳豆激酶的联产研究，对纳豆激酶和γ-聚谷氨酸联产最有利的培养基组成为大豆蛋白胨10 g/L，NH4C1 9 g/L，柠檬酸15 g/L，在37 ℃培养72 h，纳豆激酶酶活达到121 units/mL，γ-聚谷氨酸产量达到1.1 g/L。 |
| 语种 | 中文 |
| 公开日期 | 2013-09-13 |
| 页码 | 65 |
| 源URL | [http://ir.ipe.ac.cn/handle/122111/1148]  |
| 专题 | 过程工程研究所_研究所（批量导入） |
| 推荐引用方式 GB/T 7714 | 秦国宏. 枯草芽孢杆菌联产纳豆激酶和γ-聚谷氨酸的研究[D]. 过程工程研究所. 中国科学院过程工程研究所. 2007. |
入库方式： OAI收割
来源：过程工程研究所
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