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动物细胞培养中的磁性微载体和胰岛培养的应用研究

文献类型:学位论文

作者吕秀菊
学位类别博士
答辩日期2002
授予单位中国科学院过程工程研究所
授予地点中国科学院过程工程研究所
导师欧阳藩
关键词动物细胞培养 磁响应性微载体 11型糖尿病 细胞水平药物筛选模型
学位专业生物化工
中文摘要为建立和推广药物筛选的细胞模型,本文从工程和生物学两方面,选择两个关键问题进行了实验研究。为实现动物细胞高密度培养和细胞分离,研制了核/壳式磁响应性复合微载体。探索了两步聚合法,使e304包埋量提高了25%a最终达到46%;磁化强度为7.78emu/g,矫顽力仅为840e;球形度好,粒径分布可调。乳化包覆时先对磁核表面氧化处理,使包埋率提高10%Q自行设计的锥形转盘雾化器,实现了连续稳定地制备核/壳式微胶囊,产率较平盘雾化器提高36%,适合连续大规模制备。所研制的磁性微载体培养非洲绿猴肾(hero)细胞系,与国外同类产品效果相近,可进一步用于产物或细胞分离。为建立治疗糖尿病药物的胰岛筛选模型,提出并实现了冷消化和热消化两阶段消化模式,可提高活性胰岛收率10%,优化培养工艺和条件使胰岛体外存活6周,维持稳定分泌功能10天。在此基础上建立了高糖损伤模型和胰岛自由基损伤模型,使用己知治疗糖尿病的三类四种药物,验证模型的可靠性。通过定量检测胰岛素分泌水平和葡萄糖敏感性指数(SRI),得到的结果与临床应用结果有很好的一致性,并同时发现二甲双肌具有维持胰岛对葡萄糖的敏感性功能。利用该模型分别检测玉芙蓉和魔芋寡糖粗分组分,结果表明玉芙蓉水相和正丁醇相提取物可促进胰岛素分泌,魔芋寡糖的5%乙醇洗脱组分在剂量为1.Omg/ml以下有清除由基特性,进一步分离纯化单体后用同样办法筛选,有望发现生物活性强的中间体或化合物。
语种中文
公开日期2013-09-16
页码167
源URL[http://ir.ipe.ac.cn/handle/122111/1344]  
专题过程工程研究所_研究所(批量导入)
推荐引用方式
GB/T 7714
吕秀菊. 动物细胞培养中的磁性微载体和胰岛培养的应用研究[D]. 中国科学院过程工程研究所. 中国科学院过程工程研究所. 2002.

入库方式: OAI收割

来源:过程工程研究所

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