真菌感染威胁人体健康，情况严重时甚至会导致死亡。传统抗真菌药物的反 复使用易使真菌产生耐药性。目前，真菌耐药性已成为临床医学面临的重大挑战 之一。因此，亟需开发一种抗菌效率高且不易产生耐药性的抗真菌药物。纳米材 料的优异抗菌性能为开发新型抗菌药物开辟了新的方向。其中，许多研究表明银 纳米颗粒（Silver nanoparticle, AgNPs）对细菌有良好的抑菌效应，且不易产生耐 药性，但 AgNPs 对真菌是否具有抑菌效应却鲜有研究。

       本论文以巴斯德毕赤酵母（Pichia pastoris）GS115 作为模式菌株，对 AgNPs 的抗真菌效应及其作用机制开展了研究。通过研究不同粒径（30 nm、50 nm 和 100 nm）和不同修饰（柠檬酸盐（Citrate, CIT）、聚乙烯亚胺（Polyethyleneimine, PEI）、聚乙烯吡咯烷酮（Polyvinyl pyrrolidone, PVP）和聚乙二醇（Polyethylene glycol, PEG））的 AgNPs 对毕赤酵母生长抑制作用的差异性，探索了 AgNPs 的 理化性质对其抗真菌效应的影响；通过表征和测定 AgNPs 的摄入、活性氧积累、 胞内总 Ag 含量以及酵母结构变化，开展了 AgNPs 抑真菌效应的作用机制研究。 本论文还首次采用散射光成像技术，研究了毕赤酵母对 AgNPs 的摄入和 AgNPs 在毕赤酵母中的分布情况，并首次观察到毕赤酵母通过囊泡外排 AgNPs 的现象。

       研究结果表明，AgNPs 对毕赤酵母有良好的生长抑制作用，本研究所选用的 这几种 AgNPs 的最小抑菌浓度介于 0.2 μg/mL 到 5 μg/mL 之间。研究发现粒径 小的 AgNPs 抑制作用强于大粒径的 AgNPs，带正电的 AgNPs 抑制作用强于带负 电的 AgNPs。散射光成像和 TEM 结果表明，小粒径的 AgNPs 可以通过细胞壁， 进入毕赤酵母内部，进入胞内的 AgNPs 可以被囊泡包裹，也可以聚在液泡周围 的细胞质中或分布在细胞壁与细胞膜之间。尽管进入胞内的 AgNPs 可以通过诱 导活性氧对毕赤酵母产生毒性，但其跨壁过程中引起的细胞壁损伤可能是产生抑 菌效应的关键。散射光成像表明毕赤酵母通过产生囊泡外排进入胞内的 AgNPs， 并在分裂过程中能够将 AgNPs 传递给子代，该过程可能是毕赤酵母对 AgNPs 的 抗性机制。

      综上所述，本论文证明了 AgNPs 具有良好的抗真菌效果，AgNPs 的理化性 质可显著影响其抗真菌效率。AgNPs 对毕赤酵母细胞壁的破坏可能是其产生抑菌效应的关键，而囊泡外排和子代传递可能是毕赤酵母对 AgNPs 重要的抗性机 制。本研究的结果对 AgNPs 在抗真菌领域的应用提供了数据支撑。