应用高效体积排阻色谱偶联多角度激光散射鉴定猪圆环病毒2型灭活疫苗及病毒样颗粒疫苗抗原
文献类型：期刊论文
| 作者 | 徐嫄; 杨延丽; 邹兴启; 李翠; 朱元源; 秦义娴; 李琰; 盛亚男; 刘业兵; 彭国瑞 |
| 刊名 | 生物工程学报
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| 出版日期 | 2022 |
| 卷号 | 38期号:08页码:2948-2958 |
| 关键词 | 猪圆环病毒2型 Cap蛋白 病毒样颗粒 疫苗 高效体积排阻色谱 多角度激光散射 |
| ISSN号 | 1000-3061 |
| DOI | 10.13345/j.cjb.210937 |
| 英文摘要 | 本文旨在建立基于高效体积排阻色谱(high-performance size-exclusion chromatography,HPSEC)偶联多角度激光散射仪(multi-angle laser light scattering,MALLS)的猪圆环病毒2型(porcine circovirus type 2,PCV2)疫苗抗原检测方法。以纯化的PCV2灭活病毒及病毒样颗粒(virus-like particles,VLP)为参照，对4家生产企业的2种PCV2灭活病毒疫苗(a、b)及VLP疫苗(c、d)破乳后进行HPSEC-MALLS检测及分子量分析；结合PCV2抗原检测卡、Western blotting和透射电子显微镜(transmission electron microscope,TEM)，鉴定了特征色谱峰；考察了方法的重复性和检测线性。结果表明，两家企业生产的PCV2灭活病毒疫苗破乳液水相经HPSEC分离，在保留时间约13.3 min处出现抗原特征峰；MALLS计算该色谱峰分子量分别为2.61×10~6 (±4.34%) Da和2.40×10~6 (±2.51%) Da。两种VLP疫苗也在13.3 min处出现抗原特征峰，分子量分别为2.09×10~6 (±2.94%) Da和2.88×10~6 (±11.85%) Da，接近PCV2的理论分子量；同时在保留时间约11.4 min处也出现色谱峰，经检测分子量为4.37×10~6 (±0.42%) Da,TEM表征显示为VLP二聚体。取疫苗d和PCV2 VLP纯品进行重复检测，抗原色谱峰面积的RSD (n=3)均小于1.5%，重复性好；将PCV2 VLP纯品梯度稀释检测，VLP及其多聚体的色谱峰面积与浓度均呈良好的线性关系，R2分别为0.999及0.997，能够满足定量及多聚体含量分析。该方法有望成为一种准确、高效的PCV2疫苗的体外评价方法，用于质量评价与提升。 |
| URL标识 | 查看原文 |
| 资助机构 | 国家自然科学基金(21821005,31970872) ; 中国兽医药品监察所“兽药行业公益性重点专项”(GY202102)~~ |
| 源URL | [http://ir.ipe.ac.cn/handle/122111/57648]  |
| 作者单位 | 1.中国兽医药品监察所 2.中国科学院过程工程研究所生化工程国家重点实验室 3.中国科学院大学化学工程学院 |
| 推荐引用方式 GB/T 7714 | 徐嫄,杨延丽,邹兴启,等. 应用高效体积排阻色谱偶联多角度激光散射鉴定猪圆环病毒2型灭活疫苗及病毒样颗粒疫苗抗原[J]. 生物工程学报,2022,38(08):2948-2958. |
| APA | 徐嫄.,杨延丽.,邹兴启.,李翠.,朱元源.,...&赵启祖.(2022).应用高效体积排阻色谱偶联多角度激光散射鉴定猪圆环病毒2型灭活疫苗及病毒样颗粒疫苗抗原.生物工程学报,38(08),2948-2958. |
| MLA | 徐嫄,et al."应用高效体积排阻色谱偶联多角度激光散射鉴定猪圆环病毒2型灭活疫苗及病毒样颗粒疫苗抗原".生物工程学报 38.08(2022):2948-2958. |
入库方式： OAI收割
来源：过程工程研究所
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