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白木香叶抗炎组分的筛选、制备及评价研究

文献类型:学位论文

作者王培东
答辩日期2022
文献子类硕士
授予单位中国科学院过程工程研究所
导师赵兵 and 郭元亨
关键词白木香叶,抗炎,网络药理学,双水相萃取
英文摘要

白木香(Aquilaria sinensis)为瑞香科白木香属常绿乔木。白木香叶常被制成茶饮(沉香茶),用于抗炎、安神,为广东省地方特色食品。但白木香叶的抗炎组分及抗炎机理未见有较深入的研究,导致其产品未能向产业链高附加值一端充分延伸。因此,本文通过网络药理学方法筛选抗炎组分、预测抗炎机理,结合液质联用及分子对接进一步确定其乙醇提取物中的主要抗炎组分,再通过组分含量分析研究了白木香叶预处理工艺和探索了双水相体系富集抗炎组分的萃取工艺,并采用体外炎症和氧化损伤模型评价了不同提取物的活性。本论文主要研究成果如下:(1)采用网络药理学初步完成了白木香叶抗炎组分的筛选。统计具有炎症靶点的白木香叶化合物,构建蛋白-蛋白互作网络和化合物类型-化合物-炎症靶点网络,并进行MCODE聚类分析和拓扑分析,最后分析了炎症靶点的GO和KEGG富集通路。预测得到112种化合物的炎症靶点212个,包括SRC、MAPK1和AKT1等8个核心靶点,其中57种化合物作用于核心靶点;主要抗炎组分为黄酮类和甾体类化合物,主要靶点为GSK3B、NOS2和IL2等作用于VEGF、PI3K-Akt和TNF信号通路等15条炎症通路,参与凋亡过程的负调节等生物过程。对白木香叶乙醇粗提物进行HPLC-ESI/MS成分鉴定,分子对接分析了已鉴定化合物与核心靶点的结合能和作用方式。发现乙醇粗提物中16种化合物具有抗炎活性,其中与核心靶点作用的化合物有槲皮素和芒果苷等5个,它们可能通过作用于多个靶点以实现协同抗炎效果。(2)研究了白木香叶预处理工艺和富集抗炎组分的双水相萃取工艺。通过对比分析不同预处理叶(鲜叶、阴干叶、烘干叶、晒干叶、冻干叶、微波叶和茶叶)的水分、灰分、黄酮、多酚、总糖、蛋白的含量差异及可能原因,确定白木香叶采用烘干处理方式。以磷酸二氢钠的添加量、乙醇添加量、原提取液添加量、萃取温度、pH值为自变量,抗炎标志物芒果苷的萃取效率和分配系数为因变量,进行单因素实验。并以此为基础采用响应面法优化,得到芒果苷的最佳萃取工艺为磷酸二氢钠质量分数31.3%、乙醇质量分数25.7%、原提取液体积2.8 mL、水添加量5 mL、温度293.15 K和pH值4.0,芒果苷的萃取效率最大为98.48%。与粗提物相比,正丁醇萃取物中的芒果苷(38.15±0.24%)、多酚(28.17±0.22%)、黄酮(5.37±0.17%)含量和双水相萃取物中芒果苷(23.3±0.31%)、多酚(16.64±0.16%)、黄酮(3.98±0.14%)含量均有所提高,总糖和蛋白含量均有所下降,说明双水相萃取同有机溶剂萃取一样可以有效富集以芒果苷为代表的抗炎组分。(3)利用体外模型评价了不同提取物的活性。体外抗炎与抗氧化损伤研究发现,白木香叶乙醇粗提物、双水相萃取物、正丁醇相萃取物和芒果苷通过对LPS诱导的Raw264.7炎症细胞的NO、TNF-α、IL-6的释放抑制和IL-10的分泌增强以起到抗炎作用,且对H2O2诱导HUVEC氧化损伤细胞具有保护作用。抗炎和抗氧化活性在30-150 μg/mL范围内呈浓度依赖趋势,且芒果苷的量效关系最具代表性,说明双水相萃取富集的抗炎组分较粗提物能有效提升体外抗炎活性和抗氧化活性。

语种中文
源URL[http://ir.ipe.ac.cn/handle/122111/60744]  
推荐引用方式
GB/T 7714
王培东. 白木香叶抗炎组分的筛选、制备及评价研究[D]. 中国科学院过程工程研究所. 2022.

入库方式: OAI收割

来源:过程工程研究所

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