利用果糖基转移酶制备低聚果糖的研究
文献类型:学位论文
作者 | 曹伟蕾 |
答辩日期 | 2022-06-01 |
文献子类 | 硕士 |
授予单位 | 中国科学院过程工程研究所 |
导师 | 曹伟锋 |
关键词 | 低聚果糖,果糖基转移酶,膜,金属-有机框架材料,蔗糖蜜 |
英文摘要 | 低聚果糖(Fructo-oligosaccharides,FOS)是目前研究较多的线性果糖低聚物,具有多种功能性,能够维持肠道平衡和预防癌症等,应用前景广阔。市售低聚果糖的产品中一般含有蔗糖、葡萄糖和果糖,这些成分会降低其纯度,影响其作为功能性食品配料的应用范围,如在糖尿病人食谱中的应用。因此,提高低聚果糖纯度和生产效率的工艺的开发尤为必要,本文具体研究内容及结果如下。(1)以蔗糖为原料,优化果糖基转移酶(Fructosyltransferases,FTases)转化蔗糖生产低聚果糖的条件,发现所选的果糖基转移酶同时具有水解活性和转果糖基化活性;较佳的分批低聚果糖生产条件为酶活80 U/mL、蔗糖50 g/L、温度45 °C、反应时间2 h和pH 5.5,在该条件下获得的低聚果糖浓度为28.9 g/L,产率为57.8%;然后,建立了间歇补料生产低聚果糖的工艺,在酶反应进程中每2 h补充浓度为50 g/L的蔗糖,反应四个批次后果糖基转移酶的活性为79.6 U/mL,低聚果糖的总产量为111.7 g/L,产率为55.8%。(2)利用膜集成技术开发了一种超滤-洗滤-浓缩一体化工艺,发现PES10超滤膜适于果糖基转移酶的回收及再利用,此时酶截留率为100%,膜平均通量为185.5 L/(hˑm2)和较低的不可逆污因子(39.6%),同时膜污染的主要机制是滤饼层的形成;采用间歇补料工艺,酶被重复利用了4次,酶活回收率为95.5%;采用NF5纳滤膜,在45 °C恒流-死端的洗滤条件下对低聚果糖料液进行纯化,低聚果糖的纯度从55.8%提高到92.3%;采用DL纳滤膜,在60 °C恒流-死端条件下,实现NF5透过液中的低聚果糖和蔗糖回收。(3)开发了以蔗糖蜜为原料生产低聚果糖的工艺。发现蔗糖蜜中糖类(果糖和葡萄糖)、大分子物质葡聚糖和有机酸(乌头酸、柠檬酸和苹果酸)均会抑制果糖基转移酶的转果糖基化活性,而促进其水解活性;除了Fe2+和Fe3+会抑制酶活性以外,微量的无机盐能够提升酶活性;以蔗糖蜜为原料,利用游离果糖基转移酶进行低聚果糖经4批次间歇补料实验,低聚果糖总产量为83.2 g/L,总产率为41.6%,洗滤后低聚果糖纯度可达97.5%。另外以蔗糖蜜为原料生产低聚果糖的成本仅为蔗糖的40%左右,这说明以蔗糖蜜为原料生产低聚果糖具有较好的研究价值。(4)开展了新型金属-有机框架材料(Metal-Organic Frameworks,MOFs)固定化果糖基转移酶研究,成功合成的MIL-125-NH2为六面体颗粒,颗粒直径分布在0.5-1.5 μm,大部分约为 1 μm,形态稳定,粒径较为均一;采用PES100膜进行FTases@MIL-125-NH2的分离与回收,通量可达214.8 L/(hˑm2)且不可逆污染因子低,但反应结束后FTases@MIL-125-NH2的将膜孔完全堵塞导致通量的大幅衰减;以蔗糖为底物,利用FTases@MIL-125-NH2补料间歇操作得到低聚果糖的总产量为34.4 g/L;以蔗糖蜜为原料,利用FTases@MIL-125-NH2生产低聚果糖生产,总产量为36.5 g/L,产率为18.3%。 |
语种 | 中文 |
源URL | [http://ir.ipe.ac.cn/handle/122111/60991] ![]() |
推荐引用方式 GB/T 7714 | 曹伟蕾. 利用果糖基转移酶制备低聚果糖的研究[D]. 中国科学院过程工程研究所. 2022. |
入库方式: OAI收割
来源:过程工程研究所
其他版本
除非特别说明,本系统中所有内容都受版权保护,并保留所有权利。