利用CRISPR/Cas9技术定点编辑烟草中半胱氨酸转移酶CYS基因
文献类型：期刊论文
| 作者 | 包雪梅; 李云; 曹东; 刘宝龙; 王洪伦 ; 宗渊
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| 刊名 | 分子植物育种
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| 出版日期 | 2024 |
| 卷号 | 22期号:24页码:8144-8151 |
| 关键词 | 烟草 CYS CRISPR/Cas9 基因编辑 突变体 |
| 英文摘要 | 为研究半胱氨酸转移酶(CYS)基因对烟草生长发育及花青素合成的影响，在烟草中建立CRISPR/Cas9基因编辑体系，构建双靶点CRISPR/Cas9基因编辑载体p35S-H-CYS，利用农杆菌介导的遗传转化体系获得CYS烟草突变体，通过碱基测序和RT-qPCR检验CYS基因敲除效果，分析靶位点序列突变类型。结果表明，3个突变体株系在靶位点发生了基因突变，突变类型包括碱基插入、碱基替换，其中，靶位点1可以更有效地与靶位点结合，靶位点2处产生2个碱基替换，均为氨基酸同义突变。RT-qPCR结果表明，突变体株系中CYS基因的相对表达量均显著低于野生型烟草(P<0.01)。与野生型对比，CYS-1、CYS-2和CYS-3突变体株系中CYS基因转录水平倍数分别为0.31、0.45和0.34。敲除CYS基因后对烟草株高、叶形等表型未见明显影响，而突变体烟草中花青素含量均有不同程度的提高，其中，CYS-1突变体株系中花青素含量为野生型的1.3倍，显著高于野生型烟草(P<0.05)，说明CYS基因会抑制花青素的合成，该结果与先前转录组结果相符。本研究通过CRISPR/Cas9基因编辑技术对CYS基因设计2个靶位点进行定点编辑，以烟草为转化受体，为进一步研究CYS基因功能提供了重要的材料基础。 |
| 源URL | [http://210.75.249.4/handle/363003/62185]  |
| 专题 | 西北高原生物研究所_中国科学院西北高原生物研究所 |
| 推荐引用方式 GB/T 7714 | 包雪梅,李云,曹东,等. 利用CRISPR/Cas9技术定点编辑烟草中半胱氨酸转移酶CYS基因[J]. 分子植物育种,2024,22(24):8144-8151. |
| APA | 包雪梅,李云,曹东,刘宝龙,王洪伦,&宗渊.(2024).利用CRISPR/Cas9技术定点编辑烟草中半胱氨酸转移酶CYS基因.分子植物育种,22(24),8144-8151. |
| MLA | 包雪梅,et al."利用CRISPR/Cas9技术定点编辑烟草中半胱氨酸转移酶CYS基因".分子植物育种 22.24(2024):8144-8151. |
入库方式： OAI收割
来源：西北高原生物研究所
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