罗非鱼源无乳链球菌(Streptococcus agalactiae)新型AI-2信号分子受体RbsB蛋白结晶生长研究
文献类型：CNKI期刊论文
| 作者 | 樊博琳; 潘丽霞; 王忠良; 黎源; 简纪常; 王蓓
|
| 发表日期 | 2020-01-15 |
| 出处 | 海洋与湖沼
 |
| 关键词 | 无乳链球菌 RbsB蛋白 蛋白纯化 结晶化 |
| 英文摘要 | 为了开展无乳链球菌(Streptococcus agalactiae)核糖结合蛋白(Ribose binding protein B, RbsB)结构功能的研究,本实验根据已知无乳链球菌ZQ0910全基因组序列设计相关引物。采用PCR方法扩增其RbsB基因,随后将该基因定向克隆到原核表达载体pGEX-6p-1中,在大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中进行IPTG诱导表达;采用HRV3C蛋白酶切除GST标签,分子筛分离获得RbsB蛋白;运用生物信息学软件对RbsB基因序列进行分析,并对RbsB蛋白二级和三级结构进行预测;采用NeXtal Tubes JCSG Core Suite结晶试剂盒筛选蛋白结晶条件。研究结果表明,该基因全长为969碱基,编码322个氨基酸, RbsB蛋白理论分子量33.9ku,等电点为9.41,二级结构中α螺旋结构所占比重最高,建立RbsB蛋白三维结构模式图;经IPTG诱导后表达的融合蛋白分子量为59ku,筛选RbsB蛋白的初始结晶条件为(0.2mol/Ldi-Potassiumhydrogenphosphate,20%(W/V)PEG3350;1.5mol/L ammonium sulfate, 25%(V/V) Glycerol),获得RbsB蛋白结晶体。本研究结果可为无乳链球菌核糖结合蛋白(RbsB)的功能解析提供实验及理论基础。 |
| 文献子类 | CNKI期刊论文 |
| 资助机构 | 国家自然科学基金项目,31702386号 ; 广东省科技厅国际合作领域项目,2017A050501037号 |
| 卷 | v.51期:01页:136-144 |
| 语种 | 中文; |
| 分类号 | S943 |
| ISSN号 | 0029-814X |
| 源URL | [http://ir.qdio.ac.cn/handle/337002/188363]  |
| 专题 | 中国科学院海洋研究所 |
| 作者单位 | 1.广西科学院 2.海洋生物学与生物技术功能实验室青岛海洋科学与技术试点国家实验室 3.广东海洋大学水产学院广东省水产经济动物病原生物学及流行病学重点实验室广东省水产经济动物病害控制重点实验室 4.中国科学院实验海洋生物学重点实验室中国科学院海洋研究所 |
| 推荐引用方式 GB/T 7714 | 樊博琳,潘丽霞,王忠良,等. 罗非鱼源无乳链球菌(Streptococcus agalactiae)新型AI-2信号分子受体RbsB蛋白结晶生长研究. 2020. |
入库方式： OAI收割
来源：海洋研究所
浏览0
下载0
收藏0
其他版本
除非特别说明，本系统中所有内容都受版权保护，并保留所有权利。