抗人AFP单链抗体与藻胆蛋白融合蛋白的构建、表达与活性分析
文献类型：CNKI期刊论文
| 作者 | 陈华新; 武静 ; 赵瑾; 姜鹏
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| 发表日期 | 2016-05-15 |
| 出处 | 中国生物工程杂志
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| 关键词 | 甲胎蛋白 单链抗体 别藻蓝蛋白 融合蛋白 |
| 英文摘要 | 目的:构建多基因表达载体,在大肠杆菌中同时表达AFP单链抗体(sc Fv)和蓝藻别藻蓝蛋白α亚基脱辅基蛋白(apc A)组成的融合蛋白(sc Fv-apc A)、藻胆蛋白裂合酶(cpc S)及藻红蛋白生物合成酶(Ho1和peb S),获得共价结合藻红胆素的融合蛋白(sc Fv-apc A-PEB)。方法:利用融合PCR将sc Fv和apc A基因连接起来,形成sc Fv-apc A融合基因,并将该融合基因与cpc S克隆到表达载体p CDFDuet-1中;将Ho1和peb S基因克隆到表达载体pRSFDuet-1中。将两种载体共转化到大肠杆菌中,IPTG诱导重组蛋白表达,经亲和层析获得重组蛋白,通过光谱学分析和抗体竞争性抑制法,测定重组蛋白的生物学活性。结果:成功表达融合蛋白sc Fv-apc A-PEB,分子质量约为45k Da,与理论值相符,其最大吸收峰为549.5nm,最大荧光发射峰为560nm,竞争抑制ELISA法初步鉴定活性,竞争抑制率达到48%。结论:利用大肠杆菌表达系统,获得了同时具有荧光特性和免疫学活性的重组蛋白。 |
| DOI标识 | 10.13523/j.cb.20160511 |
| 文献子类 | CNKI期刊论文 |
| 资助机构 | 国家“863”计划(2014AA093505 ; 2014AA093501) ; 国家海洋公益性行业科研专项经费项目(201205027-2) ; 国家自然科学基金(41276164)资助项目 |
| 卷 | v.36;No.290期:05页:80-86 |
| 语种 | 中文; |
| 分类号 | Q78 |
| ISSN号 | 1671-8135 |
| 源URL | [http://ir.qdio.ac.cn/handle/337002/189681]  |
| 专题 | 中国科学院海洋研究所 |
| 作者单位 | 1.中国科学院海洋研究所实验海洋生物学重点实验室 2.青岛海洋科学与技术国家实验室海洋生物学与生物技术功能实验室 3.中国科学院大学 |
| 推荐引用方式 GB/T 7714 | 陈华新,武静,赵瑾,等. 抗人AFP单链抗体与藻胆蛋白融合蛋白的构建、表达与活性分析. 2016. |
入库方式： OAI收割
来源：海洋研究所
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