真鲷精子在外源DNA下的生理特性和转染效果
文献类型:CNKI期刊论文
作者 | 郑君飘; 刘清华; 徐世宏; 马道远; 肖志忠; 林帆; 肖永双; 李军 |
发表日期 | 2014-07-15 |
出处 | 海洋科学
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关键词 | 外源DNA 真鲷(Pagrus major) 精子 精子介导转基因 |
英文摘要 | 为研究真鲷(Pagrus major)精子在外源DNA下的生理特性和转染效果,探索真鲷精子介导转基因技术,作者通过计算机辅助分析外源DNA环境下(不同孵育时间、DNA长度、DNA浓度)真鲷精子活率和运动速度的变化,进一步采用PCR和荧光探针的方法检测外源DNA与真鲷精子的结合情况,并通过人工授精来评价外源DNA能否转染精子并传递至F0代。结果表明:外源DNA浓度、孵育时间及DNA长度对精子活率无显著影响。在5μg/106个精子的高浓度10 kb DNA下孵育12 h,真鲷精子仍具有(75.89±5.55)%的精子活率,平均直线速度(70.97±6.37)μm/s,与对照组无显著差异,但精子平均曲线速度显著下降,比对照组低21.85μm/s。真鲷精子与带Fluorescein荧光素的DNA片段共孵育后,部分精子在荧光显微镜下观察到绿光。将DNA孵育后精子进行人工授精表明经过1μg DNA/106个精子孵育后的受精率和孵化率无显著下降,通过PCR法并没有在外源DNA处理的精子和F0代中检测到目的基因,表明外源DNA虽然能够吸附在真鲷精子表面,但并不足以携带进入卵子产生转基因后代。 |
文献子类 | CNKI期刊论文 |
资助机构 | 国家自然科学基金资助项目(31072212,41076100) ; 海洋经济创新发展区域示范项目(12PYY001SF08) ; 国家科技基础条件平台建设运行项目–水产资源平台运行服务 |
卷 | v.38;No.301期:07页:3-8 |
语种 | 中文; |
分类号 | S917.4 |
ISSN号 | 1000-3096 |
源URL | [http://ir.qdio.ac.cn/handle/337002/190405] ![]() |
专题 | 中国科学院海洋研究所 |
作者单位 | 1.中国科学院研究生院 2.中国科学院海洋研究所 |
推荐引用方式 GB/T 7714 | 郑君飘,刘清华,徐世宏,等. 真鲷精子在外源DNA下的生理特性和转染效果. 2014. |
入库方式: OAI收割
来源:海洋研究所
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