副溶血弧菌tdh基因在毕赤酵母中的表达及溶血活性检测
文献类型：CNKI期刊论文
| 作者 | 赵永刚; 战文斌; 萨仁高娃; 王君玮; 王志亮 |
| 发表日期 | 2010-09-09 |
| 出处 | 海洋科学
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| 关键词 | 耐热溶血素 分泌表达 毕赤酵母 溶血活性 |
| 英文摘要 | 通过PCR技术从副溶血弧菌(Vibrio Parahaemolyticus,VP)基因组DNA上扩增耐热溶血素基因tdh,双酶切后定向插入到酵母表达载体pPICZaA中,构建重组表达质粒pPICZaA-tdh,经限制性内切酶SacI线性化后电转化毕赤酵母(Pichia pastoris,P.pastoris)GS115,经PCR和测序鉴定耐热溶血素基因成功整合到毕赤酵母的基因组中。在甲醇诱导下进行tdh的表达,SDS-PAGE分析证明重组TDH(thermostable direct hemolysin,TDH)的分子质量约为23ku,经Western blotting鉴定VP抗体能与表达的TDH发生特异反应,说明tdh基因在毕赤酵母中的表达是准确的。溶血实验证明了表达的TDH具有溶血活性。本研究首次应用毕赤酵母表达耐热溶血素基因tdh,在培养基中获得分泌表达的耐热溶血素,为研究tdh基因的功能奠定了基础。 |
| 文献子类 | CNKI期刊论文 |
| 资助机构 | 国家863计划项目(2006AA100306 ; 2006AA100307) |
| 卷 | v.34;No.255期:09页:12-16 |
| 语种 | 中文; |
| 分类号 | Q789 |
| ISSN号 | 1000-3096 |
| 源URL | [http://ir.qdio.ac.cn/handle/337002/191975]  |
| 专题 | 中国科学院海洋研究所 |
| 作者单位 | 1.中国动物卫生与流行病学中心 2.中国海洋大学教育部海水养殖重点实验室 3.中国科学院海洋研究所海洋地质与环境重点实验室 |
| 推荐引用方式 GB/T 7714 | 赵永刚,战文斌,萨仁高娃,等. 副溶血弧菌tdh基因在毕赤酵母中的表达及溶血活性检测. 2010. |
入库方式： OAI收割
来源：海洋研究所
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