三角褐指藻基因枪转化体系的建立
文献类型：CNKI期刊论文
| 作者 | 路延笃; 崔红利; 秦松; 冯大伟; 姜鹏; 衣悦涛 |
| 发表日期 | 2009-06-15 |
| 出处 | 中国生物工程杂志
 |
| 关键词 | 三角褐指藻 基因枪转化 GUS 抗生素敏感性 |
| 英文摘要 | 三角褐指藻具有较高的脂肪酸含量,是一种很有潜力的生物柴油生产原料。此外,它是多不饱和脂肪酸尤其是二十碳五烯酸(EPA)重要的来源。合适转化体系的缺乏限制了通过基因工程手段对其进行改造。首次采用基因枪方法成功地将外源基因转入三角褐指藻,转化细胞经染色后呈现蓝色,表明外源报告基因β-糖苷酸酶(GUS)基因得到了成功的表达。同时还进行了转化参数等因素对转化效率影响的分析,优化了转化条件。结果显示最佳的转化条件为:每60μg钨粉包被1μg质粒DNA,样品室真空度为27英寸汞柱,可裂膜为1500psi,受体与阻挡网距离6cm。此外,转化载体采用了三角褐指藻内源基因fcp的启动子,实现了外源基因在细胞内的表达。通过5种基因工程中常用抗生素对三角褐指藻生长抑制的研究发现,三角褐指藻对卡那霉素、氨苄青霉素、链霉素和新霉素不敏感,500mg/L的卡那霉素、氨苄青霉素和新霉素,以及1000mg/L链霉素仍不能抑制其生长;三角褐指藻对氯霉素非常敏感,130mg/L的氯霉素可以完全抑制其生长,其半抑制浓度为60mg/L。这为基因工程手段改造三角褐指藻脂肪酸代谢相关途径奠定了基础。 |
| DOI标识 | 10.13523/j.cb.20090617 |
| 文献子类 | CNKI期刊论文 |
| 资助机构 | 国家“863”计划(2006AA100311 ; 20060110A4013) ; 中国科学院知识创新工程重要方向项目(KZCX2-YW-209,KSCX2-YW-G-002,KZCX2-YW-225)资助项目 |
| 卷 | v.29;No.207期:06页:96-101 |
| 语种 | 中文; |
| 分类号 | Q943.2 |
| ISSN号 | 1671-8135 |
| 源URL | [http://ir.qdio.ac.cn/handle/337002/192543]  |
| 专题 | 中国科学院海洋研究所 |
| 作者单位 | 1.中国科学院烟台海岸带可持续发展研究所 2.中国科学院海洋研究所 3.中国科学院研究生院 |
| 推荐引用方式 GB/T 7714 | 路延笃,崔红利,秦松,等. 三角褐指藻基因枪转化体系的建立. 2009. |
入库方式： OAI收割
来源：海洋研究所
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