人肿瘤坏死因子α基因穿梭表达载体的构建和在鱼腥藻7120中的表达
文献类型：CNKI期刊论文
| 作者 | 刘凤龙,张宏斌,施定基,商之狄,林晨,邵宁,彭国宏,张雪艳,张海霞,吴锦银,王捷,徐旭东,江悦华,钟泽璞,赵树进,吴旻,曾呈奎 |
| 发表日期 | 1999-04-15 |
| 出处 | 中国科学C辑:生命科学
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| 关键词 | 人肿瘤坏死因子α 鱼腥藻7120 穿梭表达载体 三亲接合转移 Southern和Western 印迹细胞毒活性 |
| 英文摘要 | 报道了人肿瘤坏死因子α(hTNFα)基因穿梭表达载体的构建及其在丝状体蓝藻鱼腥藻 712 0中的表达和鉴定结果 .将质粒pRL rhTNF上hTNFα的cDNA连于pRL 43 9质粒上的PpsbA启动子下游 ,得到中间载体pRL TC .进一步与穿梭质粒pDC 8重组 ,得到可在大肠杆菌和蓝藻中均可表达的穿梭表达载体pDC TNF .pRL rhTNF ,pRL TC和pDC TNF三者在大肠杆菌中的表达量分别为 11.8% ,16 9%和 15 .0 % .通过三亲接合转移将pDC TNF引入鱼腥藻 712 0中并获稳定遗传的转基因株 .从转基因的鱼腥藻 712 0中检测到pDC TNF质粒的存在 ,且在和TNFα的cDNA探针进行的Southern杂交中呈阳性反应 .抽提转基因藻的蛋白样品进行检测 ,在Western印迹中和TNFα单克隆抗体呈阳性反应 .采用TNF对L92 9细胞的细胞毒性方法 ,证明转基因藻粗提液中 ,TNF确有细胞毒活性 . |
| 文献子类 | CNKI期刊论文 |
| 资助机构 | 国家自然科学基金!资助项目 (批准号 :392 80 0 1 6) |
| 期 | 02页:106-113 |
| 语种 | 中文; |
| 分类号 | R73-3 |
| 源URL | [http://ir.qdio.ac.cn/handle/337002/194788]  |
| 专题 | 中国科学院海洋研究所 |
| 作者单位 | 中国科学院植物研究所!北京100093,广州军区广州总医院医学实验科!广州510010,中国科学院植物研究所!北京100093,中国科学院植物研究所!北京100093,中国医学科学院肿瘤研究所分子肿瘤学国家重点实验室!北京100021,中国科学院植物研究所!北京100093,中国科学院海洋研究所实验海? |
| 推荐引用方式 GB/T 7714 | 刘凤龙,张宏斌,施定基,商之狄,林晨,邵宁,彭国宏,张雪艳,张海霞,吴锦银,王捷,徐旭东,江悦华,钟泽璞,赵树进,吴旻,曾呈奎. 人肿瘤坏死因子α基因穿梭表达载体的构建和在鱼腥藻7120中的表达. 1999. |
入库方式： OAI收割
来源：海洋研究所
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