虹鳟肿瘤坏死因子(TNFα)基因体外表达与纯化的研究
文献类型：CNKI期刊论文
| 作者 | 蔡中华,宋林生,C J SECOMBES,董双林 |
| 发表日期 | 2003-11-20 |
| 出处 | 水生生物学报
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| 关键词 | 肿瘤坏死因子 重组 纯化 |
| 英文摘要 | 将虹鳟两种肿瘤坏死因子TNFα1和TNFα2基因的成熟肽编码区域 ,用带有BamHI和HindIII酶切位点的基因特异性引物进行PCR扩增。扩增片段用限制性内切酶消化并连接到pQE30表达载体上 ,连接产物转化到大肠杆菌JM10 9感受态细菌中。转化子经PCR筛选 ,质粒测序 ,完成了虹鳟两种TNFα基因重组子的构建。重组子经体外培养和诱导后 ,获得了高效表达的TNFα重组蛋白。高效表达的重组TNFα不受诱导剂IPTG的影响 ,并且由于重组子高效表达而形成了包涵体 ;重组蛋白产量约占菌体蛋白总量的 2 5 %— 30 %。应用Ni NTA和固定金属亲和层析 (IM PC)技术 ,在变性条件下获得了高度纯化的重组蛋白 ,纯化重组蛋白的产量约为 0 5— 1mg L。 |
| 文献子类 | CNKI期刊论文 |
| 资助机构 | 国家 8 63基金 (No 2 0 0 1AA62 8118) ; 王宽城博士后奖励基金 (2 0 0 110 0 2 110 14 0 )资助 |
| 期 | 06页:41-46 |
| 语种 | 中文; |
| 分类号 | S941 |
| ISSN号 | 1000-3207 |
| 源URL | [http://ir.qdio.ac.cn/handle/337002/196717]  |
| 专题 | 中国科学院海洋研究所 |
| 作者单位 | 1.266003 2.中国科学院海洋研究所 3.DepartmentofZoology 4.青岛海洋大学青岛266071 5.天津农学院 6.300384 7.青岛266071 8.UniversityofAberdeen 9.AberdeenAB242TZ |
| 推荐引用方式 GB/T 7714 | 蔡中华,宋林生,C J SECOMBES,董双林. 虹鳟肿瘤坏死因子(TNFα)基因体外表达与纯化的研究. 2003. |
入库方式： OAI收割
来源：海洋研究所
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