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中国对虾6种组织cDNA文库的构建

文献类型:CNKI期刊论文

作者张晓军,王兵,张绍萍,李云,钟文慧,李富花,相建海
发表日期2005-09-13
出处海洋学报(中文版)
关键词中国对虾 cDNA文库 功能基因
英文摘要以中国对虾血液、眼柄、卵巢、雌虾头胸部、雄虾头胸部和三倍体对虾头胸部组织为材料,采用异硫氰酸胍-酸酚法提取总RNA;用磁珠法纯化mRNA;用Uni ZAP cDNA合成试剂盒合成双链cDNA并进行修饰,将cDNA定向连接在Uni ZAP载体上;经Gigapack GoldPackage包装试剂盒包装成为噬菌体颗粒,转染宿主XL1 Blue MRF’菌株细胞,形成初级文库.初级文库经转染进一步扩增,形成稳定的cDNA文库.6个文库的库容在0.2×106~1.3×106之间,重组率都超过90%.从各文库随机取出6~10个清晰的噬菌斑进行PCR扩增,用琼脂糖凝胶电泳检测,其插入片段长度为500~2 500 bp.由初步功能基因克隆获得阳性结果.多项指标表明,所构建的对虾cDNA文库质量较高,为进一步筛选目的基因、EST测序和制作基因芯片提供了有效的工具.
文献子类CNKI期刊论文
资助机构国家高技术研究发展计划(“863”计划)资助项目(2002AA628030,2003AA603440) ; 国家自然科学基金资助项目(30230280).
05页:94-97
语种中文;
分类号S917.4
ISSN号0253-4193
源URL[http://ir.qdio.ac.cn/handle/337002/198960]  
专题中国科学院海洋研究所
作者单位1.中国科学院海洋研究所实验海洋生物学重点实验室
2.中国科学院海洋研究所实验海洋生物学重点实验室山东青岛266071
3.山东青岛266071
推荐引用方式
GB/T 7714
张晓军,王兵,张绍萍,李云,钟文慧,李富花,相建海. 中国对虾6种组织cDNA文库的构建. 2005.

入库方式: OAI收割

来源:海洋研究所

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