大连蛇岛蝮蛇类凝血酶基因在毕赤酵母中的克隆表达及分离纯化(英文)
文献类型：期刊论文
| 作者 | 杨青 ; 胡学军 ; 许小明 ; 高晓蓉 ; 安利佳 ; 苏志国 ; J.C.JANSON |
| 刊名 | 生物化学与生物物理进展
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| 出版日期 | 2002 |
| 期号 | 03页码:390-393 |
| 关键词 | 类凝血酶 克隆 表达 纯化 特性表征 |
| 中文摘要 | 根据同源性分析设计引物 ,通过RT PCR方法从大连蛇岛蝮蛇毒腺总RNA中合成扩增出类凝血酶基因 ,之后将该基因克隆到表达载体 pPIC9K中 ,经电激转化后整合至毕赤酵母细胞基因组中 .经筛选得到甲醇快速生长型转化子His+ Mut+ 在 5 0 0ml摇瓶中培养 ,甲醇诱导分泌表达 .上清液中重组类凝血酶是通过两步柱层析得到 :QSepharoseFF和Benzamidine Sepharose 4BCL .与天然蛇毒类凝血酶一致 ,分泌表达的重组类凝血酶具有较强的酯酶活性 ,但精氨酸甲酯如TAME的水解活性较弱 .此重组类凝血酶在 37℃中性溶液中保存过夜将分解成小肽 ,但在 0℃下很稳定 .该酶的最适pH为 8 0 . |
| 公开日期 | 2013-12-24 |
| 版本 | 出版稿 |
| 源URL | [http://ir.ipe.ac.cn/handle/122111/6944]  |
| 专题 | 过程工程研究所_研究所（批量导入） |
| 推荐引用方式 GB/T 7714 | 杨青,胡学军,许小明,等. 大连蛇岛蝮蛇类凝血酶基因在毕赤酵母中的克隆表达及分离纯化(英文)[J]. 生物化学与生物物理进展,2002(03):390-393. |
| APA | 杨青.,胡学军.,许小明.,高晓蓉.,安利佳.,...&J.C.JANSON.(2002).大连蛇岛蝮蛇类凝血酶基因在毕赤酵母中的克隆表达及分离纯化(英文).生物化学与生物物理进展(03),390-393. |
| MLA | 杨青,et al."大连蛇岛蝮蛇类凝血酶基因在毕赤酵母中的克隆表达及分离纯化(英文)".生物化学与生物物理进展 .03(2002):390-393. |
入库方式： OAI收割
来源：过程工程研究所
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