拟南芥基因组中注释为(S)-去甲乌药碱合成酶的分子克隆与异源表达(英文)
文献类型：期刊论文
| 作者 | 张翔 ; 马磊 ; 田永强 ; 张国林 ; 罗应刚 |
| 刊名 | 应用与环境生物学报
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| 出版日期 | 2013 |
| 卷号 | 19期号:1页码:61-68 |
| 关键词 | 分子克隆 RT-PCR 异源表达 (S)-去甲乌药碱合成酶 苄基异喹啉 |
| ISSN号 | 1006-687X |
| 其他题名 | Molecular Cloning and Heterologous Expression of Putative (S)-norcoclaurine Synthases from Arabidopsis thaliana |
| 通讯作者 | 罗应刚 |
| 中文摘要 | 至今在拟南芥中尚未发现复杂生物碱,但是其基因组测序则表明有35个以上基因可编码(S)-去甲乌药碱合成酶(NCS).本研究首先以经过生化表征、机理清楚的来自罂粟、日本黄连、黄唐松草和花菱草的NCS为参考,与拟南芥中注释的NCS进行了广泛的生物信息学分析与比对,从中选择5个AtNCS为目的基因,设计特异性引物;从拟南芥中提取总RNA,一步法RT-PCR克隆得到上述基因;通过TA克隆将上述基因转入pGM-T载体,筛选、酶切及PCR鉴定,DNA测序验证它们的核酸序列;将测序验证的AtNCS基因经过PCR扩增、质粒构建、转入Escherichia coli BL21(DE3)中进行异源表达和蛋白纯化;在整体细胞、细胞裂解液、细胞裂解液上清和纯化蛋白共4个层次进行了AtNCS酶功能表征,未发现目标产物或新产物的生成;上述基因的具体功能还有待进一步研究. 更多还原 |
| 语种 | 英语 |
| 公开日期 | 2014-11-21 |
| 源URL | [http://210.75.237.14/handle/351003/24049]  |
| 专题 | 成都生物研究所_天然产物研究 |
| 推荐引用方式 GB/T 7714 | 张翔,马磊,田永强,等. 拟南芥基因组中注释为(S)-去甲乌药碱合成酶的分子克隆与异源表达(英文)[J]. 应用与环境生物学报,2013,19(1):61-68. |
| APA | 张翔,马磊,田永强,张国林,&罗应刚.(2013).拟南芥基因组中注释为(S)-去甲乌药碱合成酶的分子克隆与异源表达(英文).应用与环境生物学报,19(1),61-68. |
| MLA | 张翔,et al."拟南芥基因组中注释为(S)-去甲乌药碱合成酶的分子克隆与异源表达(英文)".应用与环境生物学报 19.1(2013):61-68. |
入库方式： OAI收割
来源：成都生物研究所
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