拟南芥基因组中注释为异胡豆苷合成酶的基因克隆及异源表达
文献类型:期刊论文
作者 | 马磊 ; 张翔 ; 田永强 ; 张国林 ; 罗应刚 |
刊名 | 应用与环境生物学报
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出版日期 | 2013 |
卷号 | 19期号:2页码:224-230 |
关键词 | 萜类吲哚生物碱 异胡豆苷合成酶 拟南芥 RT-PCR PCR 异源表达 |
ISSN号 | 1006-687X |
其他题名 | Molecular Cloning and Heterologous Expression of Putative Strictosidine Synthases from Arabidopsis thaliana |
通讯作者 | 罗应刚 |
中文摘要 | 拟南芥(Arabidopsis thaliana)是生物学研究中广泛使用的模式生物.到目前为止,没有证据表明拟南芥中存在复杂生物碱,但对其基因组数据的生物信息学分析表明,有很多基因与萜类吲哚生物碱(TIAs)生物合成途径中的相关基因有高度的同源性.为了从分子水平研究拟南芥是否具有合成该类复杂生物碱的潜力,首先对拟南芥中可能编码异胡豆苷合成酶(STR)的15个基因及其编码的酶进行广泛的生物信息学分析和计算;在此基础上,选择其中5个AtSTR基因为目的基因,设计特异性引物;从拟南芥中提取总RNA,一步法RT-PCR克隆得到上述基因;通过TA克隆将上述基因转入pGM-T载体,筛选、酶切及PCR鉴定,DNA测序验证它们的核酸序列;将测序验证的AtSTR基因经过PCR扩增、质粒构建、转入Escherichia coli BL21(DE3)中进行异源表达和蛋白纯化;在整体细胞、细胞裂解液、细胞裂解液上清和纯化蛋白共4个层次进行AtSTR酶功能表征,未发现目标产物或新产物的生成;上述基因的具体功能还有待进一步研究. |
语种 | 中文 |
公开日期 | 2014-11-21 |
源URL | [http://210.75.237.14/handle/351003/24051] ![]() |
专题 | 成都生物研究所_天然产物研究 |
推荐引用方式 GB/T 7714 | 马磊,张翔,田永强,等. 拟南芥基因组中注释为异胡豆苷合成酶的基因克隆及异源表达[J]. 应用与环境生物学报,2013,19(2):224-230. |
APA | 马磊,张翔,田永强,张国林,&罗应刚.(2013).拟南芥基因组中注释为异胡豆苷合成酶的基因克隆及异源表达.应用与环境生物学报,19(2),224-230. |
MLA | 马磊,et al."拟南芥基因组中注释为异胡豆苷合成酶的基因克隆及异源表达".应用与环境生物学报 19.2(2013):224-230. |
入库方式: OAI收割
来源:成都生物研究所
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