基于核酸适配体的荧光偏振检测银离子的方法研究
文献类型：学位论文
| 作者 | 李文静 |
| 学位类别 | 硕士 |
| 答辩日期 | 2014-05 |
| 授予单位 | 中国科学院研究生院 |
| 授予地点 | 北京 |
| 导师 | 汪海林 |
| 关键词 | 核酸适配体 荧光各向异性 银 荧光分度计 UPLC-MS/MS 能量代谢物 ATP |
| 学位专业 | 环境科学 |
| 中文摘要 | 近年来，环境污染已经引起了人类越多的关注诸空气水染，食品安全问题亟待解决。这就需要科学工作者们开发出更有效率优越的检测方法和手段。 而经过二十多年的研究， 核酸适配体 已成为广瞩目的研究热点，在国内 外化学、生物医药蛋白质科纳米材料等多领域均有广泛应用。 由于核酸适 配体具有相对分子量较小、特异性识别无毒易于功能化 修饰、水溶性好等优点，其在生化分析医学诊断和治疗方面显示出了潜的应用前景。目前，已筛选出超过几百种的核酸适配体，但是人们对如何识别靶分子这一关键科学问题尚不清楚。为此，我们课组在核酸适配体与蛋白质相互作用研究和分析方法两面开展了有益的探索。实验室已发展了一种新型的基于核酸适配体荧光各向异性降低来检测靶蛋白分析方法，在已有基础上，将新型的于核酸适配体荧光各向异性降低来检测靶蛋白分析方法应用到检测金属银离子 上。因为适配体结合导致空间结构发生变 化，从而影响到荧光各向异性的变以此作为分析对象将金属银离子定性与定量分析转化为荧光各向异降低值的变。 通过我们的研究，发现：在 T9 标记的TMR染色的 TA15TA15 作为探针，在pH=7.5时可以在两分钟内快速检测银离子的浓度。该方法能到为 时可以在两分钟内快速检测银离子的浓度。该方法能到为5nM的 Ag+，并且在 50nM-350 nM的银离子浓度与检测荧光各向异性呈线相关，可以检测 5 nM ﹣5 μM的银离子。 此方法不仅 检测各种环境和食品等的银污染，还 可能以在细胞级别的检测、生物体内中发挥应用价值。该实验有利于进一步揭示适配体与对应的结合机理、进一步了解 G-四链体 等与生物联系密切的结构。 除了建 立一种基于核酸适配体的荧光偏振检测银离子方法外，还创了一种使用 UPLC UPLC-MS/MS检测能量代谢物的方法，可以分别到 0.5 μM 的 包括 ATP 在内的 五种代谢物，得到标准品在 0.5 μM﹣100 μM的浓度标准曲线，线性良好。加标回收率良好，可以检测实际样品。实验使用了C13内标法，提高了检测的可靠性。 |
| 公开日期 | 2015-07-07 |
| 源URL | [http://ir.rcees.ac.cn/handle/311016/15639]  |
| 专题 | 生态环境研究中心_环境化学与生态毒理学国家重点实验室 |
| 推荐引用方式 GB/T 7714 | 李文静. 基于核酸适配体的荧光偏振检测银离子的方法研究[D]. 北京. 中国科学院研究生院. 2014. |
入库方式： OAI收割
来源：生态环境研究中心
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