RKTG基因在人恶性黑色素瘤中的功能研究
文献类型：学位论文
| 作者 | 范凤娟 |
| 学位类别 | 博士 |
| 答辩日期 | 2010-01-28 |
| 授予单位 | 中国科学院上海生命科学研究院营养科学研究所 |
| 授予地点 | 中国科学院上海生命科学研究院 |
| 导师 | 陈雁 |
| 关键词 | RKTG 恶性黑色素瘤 B-Raf激酶 细胞衰老 转录调控 |
| 学位专业 | 生物化学与分子生物学 |
| 中文摘要 | RKTG（Raf Kinase Trapping to Golgi）是新近发现的Ras-Raf-MEK-ERK促有丝分裂原信号通路的负调节因子，通过与该通路成员Raf-1的相互结合，将胞质中分布的Raf-1锚定在高尔基体上，削弱下游ERK信号。在Raf蛋白家族成员里，B-Raf基因在人类癌症中发生突变的频率最高。特别是B-Raf(V600E)这个激酶组成型活化的突变体，与超过60 %的人恶性黑色素瘤相关。在研究中，我们发现，RKTG也能和B-Raf结合，将其定位到高尔基体，并阻碍A375细胞（一种携带有B-Raf(V600E)突变的人黑色素瘤细胞株）中ERK的活化。稳定表达RKTG后，A375细胞在体外的增殖和转化能力下降，在裸鼠体内形成肿瘤的能力也被显著削弱。进一步的研究还发现，在A375黑色素瘤细胞以及原代小鼠黑色素细胞中，RKTG的表达在转录水平受到ERK信号的调控。ERK通路的抑制剂能上调A375细胞中RKTG基因的mRNA水平，增强其启动子的转录活性；而用促癌剂处理正常黑色素细胞中，则会抑制RKTG基因的表达。另一方面，对于很多癌症，包括恶性黑色素瘤来说，细胞衰老是癌症发展过程中必须跨越的屏障。我们的研究发现，RKTG基因敲除小鼠的胚胎成纤维细胞对过氧化氢诱导的细胞衰老产生抵抗，并伴随着ERK活化水平的提高。这一数据初步表明，RKTG可能具有维持细胞衰老状态，阻止细胞恶性转化的作用。而RKTG在癌基因诱导的细胞衰老中的作用及其机制还有待进一步研究阐明。综上所述，RKTG能够通过对Raf激酶的拮抗，负向调节ERK信号，在携带B-Raf致癌突变体的人黑色素瘤中发挥抑制癌症发生发展的作用。 |
| 索取号 | D2010-002 |
| 英文摘要 | Raf kinase trapping to Golgi (RKTG) is a newly characterized negative regulator of the Ras–Raf–MEK-ERK signaling pathway via sequestrating Raf-1 to the Golgi apparatus. Among Raf kinase family members, B-Raf is the most frequently mutated gene in human cancers and an activated B-Raf mutation V600E is associated with >60% of human melanomas. Here, we show that RKTG can also bind and translocate B-Raf to the Golgi apparatus. When overexpressed in A375, a human malignant melanoma cell line with B-Raf(V600E), RKTG inhibits ERK activation, cell proliferation and transformation of A375 cells. In addition, the tumorigenicity of the RKTG-expressing A375 cells is suppressed in nude mice. In our study, we also analyzed the transcriptional regulation of RKTG by ERK signaling in melanoma. MEK inhibitors elevate the mRNA level and stimulate the promoter activity of RKTG in A375 cells, while tumor promoter represses the mRNA level of RKTG in primary mouse melanocytes. Furthermore, cellular senescence is thought to be an anti-tumor mechanism similar to apoptosis. Cancer cells need override senescence to proliferation. Here, we show that mouse embryonic fibroblasts deficient for RKTG resist cellular senescence induced by oxidative stress. The preliminary results indicate RKTG may promote and maintain the senescent phenotype in response to cellular stress. Collectively, our results suggest that RKTG may play a suppressive role in human melanoma that harbors an oncogenic B-Raf mutation via its antagonistic action on B-Raf. |
| 语种 | 中文 |
| 源URL | [http://202.127.25.144/handle/331004/120]  |
| 专题 | 中国科学院上海生命科学研究院营养科学研究所_信号转导与营养相关疾病研究组 |
| 推荐引用方式 GB/T 7714 | 范凤娟. RKTG基因在人恶性黑色素瘤中的功能研究[D]. 中国科学院上海生命科学研究院. 中国科学院上海生命科学研究院营养科学研究所. 2010. |
入库方式： OAI收割
来源：上海营养与健康研究所
浏览0
下载0
收藏0
其他版本
除非特别说明，本系统中所有内容都受版权保护，并保留所有权利。