RKTG基因剔除小鼠模型的建立及功能分析
文献类型：学位论文
| 作者 | 谢小多 |
| 学位类别 | 博士 |
| 答辩日期 | 2008 |
| 授予单位 | 中国科学院上海生命科学研究院营养科学研究所 |
| 授予地点 | 中国科学院上海生命科学研究院 |
| 导师 | 陈雁 |
| 关键词 | 丝裂原信号通路 RKTG Raf激酶 基因剔除 DMBA/TPA |
| 其他题名 | Establishment and function analysis of RKTG knockout mice |
| 学位专业 | 生物化学与分子生物学 |
| 中文摘要 | RKTG（Raf Kinase Trapping to Golgi，RKTG）又名PAQR3,属于PAQR家族（Progesterone and AdipoQ Receptor family）的成员, RKTG是一个定位于高尔基体上具有类似3型拓扑结构的七次跨膜蛋白，初步研究表明它能在高尔基体上结合细胞质内的Raf激酶、将其锚定到高尔基体上、从而干扰Raf激酶与其上下游信号分子的结合，使得Ras/Raf/MEK/ERK丝裂原信号途经的活化受到抑制。然而, RKTG在丝裂原信号途经及其相关癌症发生过程中的生理功能并未被了解。为了进一步研究RKTG在机体内通过对Ras/Raf/MEK/ERK信号通路活化的阻抑作用所发挥的生理功能，我们构建了RKTG基因剔除小鼠模型。通过对动物的分析检测，发现基因剔除小鼠的皮肤、脑、睾丸等组织中ERK信号活性明显上升；鉴于RKTG缺失对Ras下游信号的这种激活效应，我们运用一个经典的两步皮肤癌诱导实验分析了RKTG在H-Ras突变激活所诱导的皮肤癌发生发展过程中所发挥的生理功能。结果显示，在DMBA/TPA两步法诱导的皮肤癌发生发展过程中，RKTG基因的缺失能促使皮肤癌发生；病理及免疫组织化学分析表明，RKTG基因缺失能提高小鼠表皮层角质细胞的扩增水平，促进皮肤肿瘤的生长及恶化；体外培养的小鼠胚胎成纤维细胞及角质细胞在FBS或TPA等分裂原信号的刺激下，RKTG基因剔除细胞内Raf/MEK/ERK通路上的激酶都有异常激活现象，细胞扩增速率明显增高；而在进一步的细胞功能实验中发现，RKTG的过表达能抑制而缺失则促进细胞的扩增及体外转化。总之，RKTG能通过Raf来抑制Ras/Raf/MEK/ERK丝裂原信号通路，从而抑制细胞在分裂原刺激或原癌基因激活时的过度增殖和恶性转化，具有保障动物机体细胞正常增殖的生理功能。 |
| 索取号 | D2008-011 |
| 英文摘要 | RKTG (Raf Kinase Trapping to Golgi), also called PAQR3, belongs to the PAQR (Progesterone and AdipoQ Recepoter) superfamily. It is a Golgi membrane protein with 7 trans-membrane structure similar to type 3 topology. It has recently been characterized as a negative regulator of the Ras-Raf-MEK-ERK mitogenic pathway via sequestrating Raf1 to the Golgi apparatus. However, little is known about the physiological functions of RKTG in mitogenic pathway and carcinogenesis. Here, we generated the RKTG knockout mouse model and found that many tissues including skin, testis and brain in RKTG knockout mice exhibited an elevation of ERK signaling. In a DMBA/TPA-induced skin carcinogenesis model, RKTG deficiency promoted the incidence and development of skin papillomas, accompanied by shortened tumor latency, enhanced keratinocyte proliferation and thickened skin epidermis. Furthermore, the Raf/MEK/ERK signaling and the proliferation capabilities were enhanced in the primary mouse embryonic fibroblasts and keratinocytes due to the absence of RKTG, especially under the challenge of mitogenic stimulus such as FBS or TPA. Additionally, hyper-proliferation and malignant transformation were suppressed by over-expression but promoted by abrogation of RKTG in cell lines. In summary, RKTG acts to suppress the over-activation of Ras/Raf/MEK/ERK signaling pathway in vivo and regulate keratinocytes proliferation upon the mitogenic or oncogenic stimulaton. |
| 语种 | 中文 |
| 源URL | [http://202.127.25.144/handle/331004/126]  |
| 专题 | 中国科学院上海生命科学研究院营养科学研究所_信号转导与营养相关疾病研究组 |
| 推荐引用方式 GB/T 7714 | 谢小多. RKTG基因剔除小鼠模型的建立及功能分析[D]. 中国科学院上海生命科学研究院. 中国科学院上海生命科学研究院营养科学研究所. 2008. |
入库方式： OAI收割
来源：上海营养与健康研究所
浏览0
下载0
收藏0
其他版本
除非特别说明，本系统中所有内容都受版权保护，并保留所有权利。