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OAI收割 [16]
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发表日期
2014 [1]
2012 [2]
2011 [3]
2010 [1]
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学科主题
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共16条,第1-10条
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利用分析Unigene在转录组中表达模式的方法拼接盐角草铵转运基因/Assembling of an ammonium transporter gene in Salicornia europaea by expression pattern analysis of Unigene in transcriptome[J]
期刊论文
OAI收割
生物工程学报, 2014, 卷号: 30, 期号: 11, 页码: 1763-1773
作者:
肖薪龙
;
张选
;
吴晓朦
;
马金彪
;
姚银安
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提交时间:2017/12/29
转录组测序 基因表达 序列组装 克隆方法 Rpkm 氮吸收 Rna-seq Gene Expression Sequence Assembly Cloning Method Rpkm Nitrogen Uptake
一种适用于文蛤家系鉴定的微卫星标记方法
专利
OAI收割
专利类型: 发明, 专利号: CN201210112325.X, 申请日期: 2012-10-10, 公开日期: 2012-10-10
作者:
刘保忠
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提交时间:2014/08/04
一种适用于文蛤家系鉴定的微卫星标记方法
2)引物设计:在微卫星重复的侧翼序列利用软件Primer?Premier?5.0设计引物
GC含量为40%?60%
退火温度为45?65℃
预期PCR产物长度为100?400bp
3)引物优化:根据不同引物的Tm值进行温度梯度优化
4)微卫星标记家系鉴定体系的确立:微卫星位点的多态性水平可用信息含量值(PIC)衡量
包括微卫星位点来源
引物设计条件为:引物长度为19?25mer
在Tm值上下各10℃
根据上述优化获得的Ta值
引物设计
温度梯度优化扩增得到的PCR产物用8%非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳?EB染色系统进行检测
选取多个体作为群体进行计算微卫星位点的多态性水平可用信息含量值(PIC)进而衡量多态性信息
引物优化和微卫星标记家系鉴定体系
选取杂带较少
根据PIC值
其特征在于:1)微卫星位点的来源:提取文蛤的基因组DNA利用提取的DNA
特异性产物亮度较高的PCR反应对应的温度为该引物的最佳退火温度Ta
PIC小于0.25的标记
采用限制性内切酶法获得文蛤基因组DNA片段
筛选得到重复性好
并构建微卫星磁珠富集文库
稳定性好
检测阳性克隆
PIC值大于0.25的位点
经测序得到含有微卫星重复的DNA序列
作为文蛤微卫星标记家系鉴定体系
用于文蛤的家系区分与个体识别。
一种构建亚心型扁藻叶绿体表达系统的方法
专利
OAI收割
专利类型: 发明, 专利号: CN201110036552.4, 申请日期: 2012-08-01, 公开日期: 2012-08-01
崔玉琳
;
姜鹏
;
陈华新
;
李富超
;
秦松
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提交时间:2014/08/04
一种构建亚心型扁藻叶绿体表达系统的方法
其特征在于:利用SEQ?ID?NO:1所示的序列
SEQ?ID?NO:2所示的序列和带有选择标记的外源基因构建的DNA重组片段
将其插入克隆载体并导入亚心型扁藻细胞
转化后经培养筛选获得转基因亚心型扁藻。
一种制备别藻蓝蛋白三聚体荧光蛋白的方法
专利
OAI收割
专利类型: 发明, 专利号: CN200910255643.X, 申请日期: 2011-06-15, 公开日期: 2011-06-15
刘少芳
;
陈英杰
;
路延笃
;
陈华新
;
李富超
;
秦松
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提交时间:2014/08/04
一种制备别藻蓝蛋白三聚体荧光蛋白的方法
其次将别藻蓝蛋白β亚基脱辅基蛋白基因与色基裂合酶基因cpcS和cpcU克隆到另一个载体上
其特征在于:首先将别藻蓝蛋白α亚基脱辅基蛋白基因与藻胆素生物合成酶基因ho1和pcyA克隆到一个表达载体中
将两个表达载体同时转化大肠杆菌
筛选出同时表达上述基因的工程菌
即为别藻蓝蛋白三聚体荧光蛋白。
Fe(II)、DO含量对养殖大菱鲆幼鱼生理学性状影响的研究
学位论文
OAI收割
博士: 中国科学院研究生院, 2011
吴志昊
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提交时间:2014/08/08
大菱鲆幼鱼
亚铁
水中铁测定方法
溶解氧
生理学性状
HO-1基因
克隆
RT-PCR
Fe(II)、DO 含量对养殖大菱鲆幼鱼生理学性状影响的研究
学位论文
OAI收割
博士, 北京: 中国科学院研究生院, 2011
吴志昊
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提交时间:2012/06/24
大菱鲆幼鱼
亚铁
水中铁测定方法
溶解氧
生理学性状
HO-1基因
克隆
RT-PCR
一种高稳定性藻蓝蛋白类融合荧光蛋白质的制备方法
专利
OAI收割
专利类型: 发明, 专利号: CN200910019914.1, 申请日期: 2010-09-22, 公开日期: 2010-09-22
秦松
;
陈华新
;
刘少芳
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提交时间:2014/08/04
一种荧光类融合藻蓝蛋白的生物合成方法
2)将上述表达质粒转化大肠杆菌后
其特征包括以下步骤:1)将藻蓝蛋白脱辅基蛋白基因和麦芽糖结合蛋白融合
筛选得到高产菌
并与色基裂合酶基因(cpcE和cpcF)克隆到表达载体的第一个表达框
应用此工程菌发酵
藻胆素生物合成酶基因(hox1和pcyA)克隆到同一载体的第二个表达框
经蛋白的分离纯化
得到一个含有多个相关基因的表达质粒
得到荧光类融合藻蓝蛋白。
一种别藻蓝蛋白类荧光蛋白质的制备方法
专利
OAI收割
专利类型: 发明, 专利号: CN200810157782.4, 申请日期: 2009-05-27, 公开日期: 2009-05-27
张伟杰
;
关翔宇
;
秦松
;
陈华新
;
杨雨
;
刘少芳
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提交时间:2014/08/04
1. 一种别藻蓝蛋白类荧光蛋白质的制备方法
2)将上述表达质粒转化宿主菌后
发酵后
其特征包括以下步骤:1)将别藻蓝蛋白类脱辅基蛋白基因或其同源基因和藻胆素生物合成酶基因(Hox1和pcyA)克隆于同一表达载体中
得到相应的工程菌
用常规方法纯化蛋白质
得到脱辅基蛋白和色素合成酶共同的表达质粒
应用此工程菌发酵生产别藻蓝蛋白类荧光蛋白质
纯化得到相应的别藻蓝蛋白类荧光蛋白质。
栉孔扇贝G-型溶菌酶基因多态性标记筛选及其辅助育种方法
专利
OAI收割
专利类型: 发明, 专利号: CN200810015048.4, 申请日期: 2008-09-03, 公开日期: 2008-09-03
宋林生
;
李凌
;
赵建民
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提交时间:2014/08/04
1
2)抗病群体和敏感群体的制备
3)抗病相关G-型溶菌酶基因标记的筛选
4)携带抗病相关基因标记个体的快速筛查。1)栉孔扇贝G-型溶菌酶基因启动区部分序列的克隆:参照分子克隆所述方法从栉孔扇贝闭壳肌中提取总DNA
根据已知的G-型溶菌酶基因序列在其启动子区设计引物
即从不同海区和养殖场收集栉孔扇贝个体
PCR扩增42个敏感个体和40个抗病个体的G-型溶菌酶启动区序列后
其中-754ID和-754II个体在抗病群体和敏感群体中出现的频率无显著差别
一种栉孔扇贝抗病相关G-型溶菌酶基因标记
克隆得到一段762个碱基的DNA序列
用病原菌浸泡感染
针对-754TATCTCGATCAGG插入/缺失(I/D)及-391A/G转换分别选用Taq I和Hap II对PCR产物进行酶切
而-391AA个体在敏感群体中出现的频率显著高于抗病群体
其特征在于它的技术内容包括以下四个方面:1)栉孔扇贝G-型溶菌酶基因启动区部分序列的克隆
连入T载体后进行测序
根据死亡时间判断扇贝对病原菌感染抵抗能力
聚丙烯酰胺凝胶电泳后
-391AG个体在抗病群体中出现的频率显著高于敏感群体。因此
获得其核苷酸序列。2)抗病群体和敏感群体的制备:采用人工感染的方法获得抗病群体和敏感群体
将扇贝分为抗病群体和敏感群体。3)抗病相关G-型溶菌酶基因标记的筛选:对来自5个个体的10个克隆进行了测序
各发现两种基因型
将-391AA作为疾病敏感相关的G-型溶菌酶基因标记
发现了10处多态性位点
-754II
而将-391AG作为抗病相关的G-型溶菌酶基因标记。4)携带抗病相关基因标记个体的快速筛查:取栉孔扇贝个体全血1μl作为模版
-754ID
PCR扩增G-型溶菌酶基因启动区序列
-391AA和-391AG
用Hap II对产物进行酶切
聚丙烯酰胺凝胶电泳分型后
选择-391AG个体作为抗病个体。
中国明对虾病原检测新方法及酚氧化酶通路相关基因的研究
学位论文
OAI收割
海洋研究所: 中国科学院海洋研究所, 2008
作者:
高宏伟
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提交时间:2010/11/04
中国明对虾
Propo
丝氨酸蛋白酶fcsp3
基因克隆
表达分析
Lamp
检测方法