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	栉孔扇贝G-型溶菌酶基因多态性标记筛选及其辅助育种方法专利 OAI收割专利类型: 发明, 专利号: CN200810015048.4, 申请日期: 2008-09-03, 公开日期: 2008-09-03 宋林生; 李凌; 赵建民收藏 \| 浏览/下载：35/0 \| 提交时间：2014/08/04 1 2)抗病群体和敏感群体的制备 3)抗病相关G-型溶菌酶基因标记的筛选 4)携带抗病相关基因标记个体的快速筛查。1)栉孔扇贝G-型溶菌酶基因启动区部分序列的克隆：参照分子克隆所述方法从栉孔扇贝闭壳肌中提取总DNA 根据已知的G-型溶菌酶基因序列在其启动子区设计引物即从不同海区和养殖场收集栉孔扇贝个体 PCR扩增42个敏感个体和40个抗病个体的G-型溶菌酶启动区序列后其中-754ID和-754II个体在抗病群体和敏感群体中出现的频率无显著差别一种栉孔扇贝抗病相关G-型溶菌酶基因标记克隆得到一段762个碱基的DNA序列用病原菌浸泡感染针对-754TATCTCGATCAGG插入/缺失(I/D)及-391A/G转换分别选用Taq I和Hap II对PCR产物进行酶切而-391AA个体在敏感群体中出现的频率显著高于抗病群体其特征在于它的技术内容包括以下四个方面：1)栉孔扇贝G-型溶菌酶基因启动区部分序列的克隆连入T载体后进行测序根据死亡时间判断扇贝对病原菌感染抵抗能力聚丙烯酰胺凝胶电泳后 -391AG个体在抗病群体中出现的频率显著高于敏感群体。因此获得其核苷酸序列。2)抗病群体和敏感群体的制备：采用人工感染的方法获得抗病群体和敏感群体将扇贝分为抗病群体和敏感群体。3)抗病相关G-型溶菌酶基因标记的筛选：对来自5个个体的10个克隆进行了测序各发现两种基因型将-391AA作为疾病敏感相关的G-型溶菌酶基因标记发现了10处多态性位点 -754II 而将-391AG作为抗病相关的G-型溶菌酶基因标记。4)携带抗病相关基因标记个体的快速筛查：取栉孔扇贝个体全血1μl作为模版 -754ID PCR扩增G-型溶菌酶基因启动区序列 -391AA和-391AG 用Hap II对产物进行酶切聚丙烯酰胺凝胶电泳分型后选择-391AG个体作为抗病个体。
	用压缩质面法估算海区地壳厚度的几点认识 CNKI期刊论文 OAI收割 1986 作者: 李乃胜 \| 收藏 \| 浏览/下载：1/0 \| 提交时间：2024/12/18 平滑滤波取样点布格重力异常沉积层重力值地壳厚度已知点几点认识
	序贯参数估算期刊论文 OAI收割计算机与应用化学, 1985, 期号: 01, 页码: 61-67 作者: 刘学文收藏 \| 浏览/下载：8/0 \| 提交时间：2014/08/27 参数估算目标函数已知点速度常数最优化计算不变嵌入实验数据数学模型五恶速度方程
	无机热化学数据库中复氧化物高温熵的预报期刊论文 OAI收割硅酸盐学报, 1984, 期号: 04, 页码: 441-444 作者: 许志宏; 王乐珊; 戚其平; 陈念贻; 朱建中收藏 \| 浏览/下载：20/0 \| 提交时间：2014/08/27 复氧化物热化学熵值正负离子均方根实验误差样本值已知数据价数相变点