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一种查尔霉素化合物的制备方法
专利
OAI收割
专利类型: 发明, 专利号: CN201110080565.1, 申请日期: 2011-10-19, 公开日期: 2011-10-19
丁玲
;
秦松
;
李富超
;
张伟杰
;
哈特穆特·拉赤
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提交时间:2014/08/04
一种查尔霉素化合物的制备方法
其中链霉菌M491保存于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心CGMCC
2)摇床培养:将上述培养的0.5?1.0cm2带有孢子丝的琼脂块接种到200?250ml豆粉液体培养基
3)萃取:将上述发酵液用有机溶剂浸提3?4次
4)纯化:将粗提物经硅胶柱层析
组分4经浓硫酸/茴香醛显色待含棕黄色的条带
其特征在于:按如下步骤操作:1)固体培养:将海洋链霉菌M491接种于M2+固体培养基
保藏编号为:CGMCC?No.2446
在28?35℃温度以110?130rpm的转速下进行摇床培养4?5天后
合并有机相浓缩得粗提物
以1?3L二氯甲烷
再将组分4经硅胶柱层析以二氯甲烷/7%甲醇进行梯度洗脱
在28?30℃下培养直至长出青灰色的孢子
待用
2?4L二氯甲烷/2%甲醇
待以展开剂为二氯甲烷/10%甲醇时Rf=0.22?0.24处
1?3L二氯甲烷/5%甲醇
分离得到式二化合物
1?3L二氯甲烷/10%甲醇梯度进行洗脱
在Rf=0.25?0.27分离得到式三化合物。
流速为8?11mL/min
将所得组分3经浓硫酸/茴香醛显色待含棕黄色的条带
经葡聚糖层析后
在展开剂为二氯甲烷/10%甲醇时Rf=0.50?0.52分离得到式一化合物
一种从霞水母刺丝囊毒素内分离致死毒素蛋白的方法
专利
OAI收割
专利类型: 发明, 专利号: CN201110027667.7, 申请日期: 2011-09-07, 公开日期: 2011-09-07
作者:
于华华
;
邢荣娥
;
李鹏程
;
秦玉坤
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提交时间:2014/08/04
一种从霞水母刺丝囊毒素中分离致死毒素蛋白的方法
2)将上述步骤1)上清液于2~6℃下用缓冲液透析过夜
3)将步骤2)所得上清液过滤
4)将步骤3)得到的上清液用强阴离子交换树脂Mono?Q预装柱纯化分离
其特征在于:1)将霞水母刺丝囊细胞加入预冷缓冲液中破碎
然后低温离心
而后用含Con?A?Sepharose?4B亲和柱进行分离
依次采用pH7.8
破碎后2~6℃离心
收集上清液
分离时采用含有0.1~0.3Mα?甲基?D?甘露糖苷和0.1~0.3MNaCl的pH7.4
浓度为10~30mM的Tris?HCl缓冲液和含1M?NaCl的pH7.8
收集上清液
待用
浓度10~30mM的Tris?HCl缓冲液进行洗脱并收集洗脱液
浓度为10~30mM的Tris?HCl缓冲液进行梯度洗脱
待用
低温离心
流速为0.2~0.5mLmin?1
收集上清液
收集约25~40min洗脱液
待用
即为从霞水母刺丝囊毒素中分离致死毒素蛋白。
一种从霞水母刺丝囊毒素内分离热激蛋白60的方法
专利
OAI收割
专利类型: 发明, 专利号: CN201010596892.8, 申请日期: 2011-08-17, 公开日期: 2011-08-17
作者:
邢荣娥
;
李鹏程
;
于华华
;
秦玉坤
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提交时间:2014/08/04
一种从霞水母刺丝囊毒素中分离热激蛋白60的方法
2)步骤1)所得上清液即为霞水母刺丝囊细胞毒素于2?6℃下对pH7.820mM?Tris?HCl缓冲液透析过夜
3)将步骤2)所得上清液过滤
4)将步骤3)用截留分子量为3kDa的超滤管浓缩的浓缩物用凝胶树脂Superdex75柱纯化分离
其特征在于:1)将从霞水母触手中得到的霞水母刺丝囊细胞加入预冷缓冲液中破碎
然后低温离心
而后将其上含DEAE?SepharoseFast?Flow的阴离子交换树柱进行分离
采用含有浓度为0.15?0.5M的NaCl的pH7.820mM?Tris?HCl缓冲液洗脱
破碎后低温离心
收集上清液
首先采用pH7.820mMTris?HCl缓冲液洗脱
流速为0.2?0.5mLmin?1
收集上清液
待用
而后采用含有浓度分别为0.1?2M不同浓度的NaCl的pH7.820mM?Tris?HCl缓冲液进行梯度洗脱
收集各洗脱峰
待用
收集各洗脱峰
其中流出体积50mL?80mL内的组分即为热激蛋白60。
而后用截留分子量为3kDa的超滤管浓缩
待用
离子色谱法同时测定嗜热厌氧菌发酵液中的有机酸与无机阴离子
期刊论文
OAI收割
海洋科学, 2010, 卷号: 34, 期号: 11, 页码: 23-26
法芸
;
张聪
;
杨海燕
;
包艳
;
秦勇
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提交时间:2011/09/09
离子色谱法
梯度洗脱
有机酸
发酵液
宽口径填充毛细管液相色谱
学位论文
OAI收割
硕士: 中国科学院研究生院, 2001
唐意红
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提交时间:2011/07/11
不锈钢宽口径填充毛细管液相色谱柱
柱制备
梯度洗脱
计算机在液相色谱梯度洗脱程序设定中的应用
期刊论文
OAI收割
环境化学, 1990, 期号: 4, 页码: 38-42
李光平
;
朱小红
;
黄克武
;
胡婉华
;
李荣春
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提交时间:2012/03/20
梯度洗脱
Triton
程序设定
液相色谱仪
流动相
等强度
强溶剂
保留时间
迁移速度
切换点
反相高效液相色谱分离肽的有关实验问题
期刊论文
OAI收割
化学通报, 1984, 期号: 05, 页码: 31-35
作者:
唐易全
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提交时间:2019/01/08
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