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	一种从泡叶藻中提取制备低分子岩藻聚糖硫酸酯的方法专利 OAI收割专利类型: 发明, 专利号: CN201210424580.8, 申请日期: 2014-05-14, 公开日期: 2014-05-14 韩丽君; 袁毅; 郭书举; 曲桂艳; 刘旭收藏 \| 浏览/下载：67/0 \| 提交时间：2014/08/04 一种从泡叶藻中提取制备低分子岩藻聚糖硫酸酯的方法酸浸泡后的泡叶藻固体继续加入其体积3‑6倍的水溶液 2）将上层漂浮物调节至pH5.5‑6.5 将上述依次经稀酸和水浸泡后固态藻体采用纳米高压均质机进行细胞破碎 3）将上述合并液 4）将上述岩藻聚糖硫酸酯粗干品加入其3‑5倍重量的蒸馏水中进行溶解其特征在于：1）将泡叶藻原料于40‑60℃下浸泡提取在泡叶藻原料干藻重量6‑10倍的稀盐酸溶液中1.3‑4.8h 搅拌浸泡4‑7h 在经过滤或高速离心破碎后进行离心分离收集上清液B 过滤液A和上清液B混合均匀后进行超滤去除盐分溶解后通过装有DEAE‑Sepharose F.F.的阴离子交换树脂柱进行洗脱稀酸浸泡液待用收集水浸泡液收集过滤液A 而后超滤浓缩至原料重量的1/2体积（V/W）收集洗脱液透析后于55‑65℃低温浓缩并冷冻干燥获得保留上层漂浮物将稀酸浸泡和水浸泡液合并待用浓缩液进行醇沉淀即得到原藻重量1.5‑2.3％的岩藻聚糖硫酸酯。沉淀物干燥即为岩藻聚糖硫酸酯粗干品
	一种从霞水母刺丝囊毒素内分离致死毒素蛋白的方法专利 OAI收割专利类型: 发明, 专利号: CN201110027667.7, 申请日期: 2011-09-07, 公开日期: 2011-09-07 作者: 于华华; 邢荣娥; 李鹏程; 秦玉坤收藏 \| 浏览/下载：31/0 \| 提交时间：2014/08/04 一种从霞水母刺丝囊毒素中分离致死毒素蛋白的方法 2)将上述步骤1)上清液于2～6℃下用缓冲液透析过夜 3)将步骤2)所得上清液过滤 4)将步骤3)得到的上清液用强阴离子交换树脂Mono?Q预装柱纯化分离其特征在于：1)将霞水母刺丝囊细胞加入预冷缓冲液中破碎然后低温离心而后用含Con?A?Sepharose?4B亲和柱进行分离依次采用pH7.8 破碎后2～6℃离心收集上清液分离时采用含有0.1～0.3Mα?甲基?D?甘露糖苷和0.1～0.3MNaCl的pH7.4 浓度为10～30mM的Tris?HCl缓冲液和含1M?NaCl的pH7.8 收集上清液待用浓度10～30mM的Tris?HCl缓冲液进行洗脱并收集洗脱液浓度为10～30mM的Tris?HCl缓冲液进行梯度洗脱待用低温离心流速为0.2～0.5mLmin?1 收集上清液收集约25～40min洗脱液待用即为从霞水母刺丝囊毒素中分离致死毒素蛋白。
	一种从霞水母刺丝囊毒素内分离热激蛋白60的方法专利 OAI收割专利类型: 发明, 专利号: CN201010596892.8, 申请日期: 2011-08-17, 公开日期: 2011-08-17 作者: 邢荣娥; 李鹏程; 于华华; 秦玉坤收藏 \| 浏览/下载：54/0 \| 提交时间：2014/08/04 一种从霞水母刺丝囊毒素中分离热激蛋白60的方法 2)步骤1)所得上清液即为霞水母刺丝囊细胞毒素于2?6℃下对pH7.820mM?Tris?HCl缓冲液透析过夜 3)将步骤2)所得上清液过滤 4)将步骤3)用截留分子量为3kDa的超滤管浓缩的浓缩物用凝胶树脂Superdex75柱纯化分离其特征在于：1)将从霞水母触手中得到的霞水母刺丝囊细胞加入预冷缓冲液中破碎然后低温离心而后将其上含DEAE?SepharoseFast?Flow的阴离子交换树柱进行分离采用含有浓度为0.15?0.5M的NaCl的pH7.820mM?Tris?HCl缓冲液洗脱破碎后低温离心收集上清液首先采用pH7.820mMTris?HCl缓冲液洗脱流速为0.2?0.5mLmin?1 收集上清液待用而后采用含有浓度分别为0.1?2M不同浓度的NaCl的pH7.820mM?Tris?HCl缓冲液进行梯度洗脱收集各洗脱峰待用收集各洗脱峰其中流出体积50mL?80mL内的组分即为热激蛋白60。而后用截留分子量为3kDa的超滤管浓缩待用