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分子生物学 [1]
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共11条,第1-10条
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高等植物质体转化体系的优化
学位论文
OAI收割
北京: 中国科学院大学, 2017
作者:
生承晔
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提交时间:2019/09/04
质体转化,可视化标记筛选,Crispr/cas9
Plastid Transformation, Visual Markers, Crispr/cas9
花苜蓿抗旱耐盐EST-SSR标记筛选
期刊论文
OAI收割
植物科学学报, 2013, 卷号: 31, 期号: 5, 页码: 493
作者:
刘洁
;
胡蝶
;
楚海家
;
闫娟
;
李建强
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提交时间:2020/10/04
花苜蓿
EST-SSR标记
抗旱耐盐
引物筛选
一种适用于文蛤家系鉴定的微卫星标记方法
专利
OAI收割
专利类型: 发明, 专利号: CN201210112325.X, 申请日期: 2012-10-10, 公开日期: 2012-10-10
作者:
刘保忠
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提交时间:2014/08/04
一种适用于文蛤家系鉴定的微卫星标记方法
2)引物设计:在微卫星重复的侧翼序列利用软件Primer?Premier?5.0设计引物
GC含量为40%?60%
退火温度为45?65℃
预期PCR产物长度为100?400bp
3)引物优化:根据不同引物的Tm值进行温度梯度优化
4)微卫星标记家系鉴定体系的确立:微卫星位点的多态性水平可用信息含量值(PIC)衡量
包括微卫星位点来源
引物设计条件为:引物长度为19?25mer
在Tm值上下各10℃
根据上述优化获得的Ta值
引物设计
温度梯度优化扩增得到的PCR产物用8%非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳?EB染色系统进行检测
选取多个体作为群体进行计算微卫星位点的多态性水平可用信息含量值(PIC)进而衡量多态性信息
引物优化和微卫星标记家系鉴定体系
选取杂带较少
根据PIC值
其特征在于:1)微卫星位点的来源:提取文蛤的基因组DNA利用提取的DNA
特异性产物亮度较高的PCR反应对应的温度为该引物的最佳退火温度Ta
PIC小于0.25的标记
采用限制性内切酶法获得文蛤基因组DNA片段
筛选得到重复性好
并构建微卫星磁珠富集文库
稳定性好
检测阳性克隆
PIC值大于0.25的位点
经测序得到含有微卫星重复的DNA序列
作为文蛤微卫星标记家系鉴定体系
用于文蛤的家系区分与个体识别。
一种构建亚心型扁藻叶绿体表达系统的方法
专利
OAI收割
专利类型: 发明, 专利号: CN201110036552.4, 申请日期: 2012-08-01, 公开日期: 2012-08-01
崔玉琳
;
姜鹏
;
陈华新
;
李富超
;
秦松
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提交时间:2014/08/04
一种构建亚心型扁藻叶绿体表达系统的方法
其特征在于:利用SEQ?ID?NO:1所示的序列
SEQ?ID?NO:2所示的序列和带有选择标记的外源基因构建的DNA重组片段
将其插入克隆载体并导入亚心型扁藻细胞
转化后经培养筛选获得转基因亚心型扁藻。
导入bar基因获得裙带菜草丁膦抗性配子体
期刊论文
OAI收割
海洋科学, 2012, 卷号: 36, 期号: 1 , 页码: 6-9
任宝永
;
姜鹏
;
崔玉琳
;
姜进举
;
秦松
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提交时间:2012/06/11
裙带菜(Undaria Pinnatifida)配子体:5223
基因工程:5172
草丁膦抗性基因:5122
气升式光生物反应器:2598
基因枪法:1932
阳性克隆:1771
营养增殖:1371
恢复培养:1270
筛选标记:1140
基因枪转化:1137
迟缓爱德华菌弱毒菌株及应用
专利
OAI收割
专利类型: 发明, 专利号: CN200910164591.5, 申请日期: 2010-05-12, 公开日期: 2010-05-12
莫照兰
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李杰
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茅云翔
;
肖鹏
;
杨佳银
;
王波
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提交时间:2014/08/04
一种迟缓爱德华菌弱毒菌株
迟缓爱德华菌野生毒株MZL?LSE40的aroA基因和esrB基因的突变株
其特征在于:迟缓爱德华菌野生毒株MZLLSE40的aroA基因突变株
所述迟缓爱德华氏菌突变株为MZL?LSE40aroAesrB
所述迟缓爱德华氏菌突变株为MZL?LSE40aroA
其保存于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心CGMCC
其保存于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心CGMCC
保藏编号为:CGMCC?No.2887
保藏编号为:CGMCC?No.2886
其突变株MZL?LSE40aroAesrB不含外源抗生素筛选标记和外源基因片段。
其突变株MZL?LSE40aroA不含外源抗生素筛选标记和外源基因片段
基于FIASCO技术的合浦珠母贝微卫星标记分离与筛选研究
期刊论文
OAI收割
热带海洋学报, 2010, 期号: 03
曲妮妮
;
龚世园
;
黄桂菊
;
童金苟
;
喻达辉
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提交时间:2011/01/27
FIASCO法
合浦珠母贝Pinctada fucata
微卫星标记
分离与筛选
一种迟缓爱德华氏菌弱毒活疫苗
专利
OAI收割
专利类型: 发明, 专利号: CN200710015285.6, 申请日期: 2009-01-14, 公开日期: 2009-01-14
莫照兰
;
茅云翔
;
肖鹏
;
李杰
;
王波
;
杨佳银
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提交时间:2014/08/04
1.一种迟缓爱德华氏菌弱毒疫苗
其特征在于:迟缓爱德华氏菌毒株LSE40的esrB基因缺失弱毒突变株
所述迟缓爱德华氏菌突变株为MZLSE40esrB
其保存于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心CGMCC
保藏编号为:CGMCC No.2087
其突变株MZLSE40esrB中不含外源抗生素筛选标记和外源基因片段。
栉孔扇贝G-型溶菌酶基因多态性标记筛选及其辅助育种方法
专利
OAI收割
专利类型: 发明, 专利号: CN200810015048.4, 申请日期: 2008-09-03, 公开日期: 2008-09-03
宋林生
;
李凌
;
赵建民
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提交时间:2014/08/04
1
2)抗病群体和敏感群体的制备
3)抗病相关G-型溶菌酶基因标记的筛选
4)携带抗病相关基因标记个体的快速筛查。1)栉孔扇贝G-型溶菌酶基因启动区部分序列的克隆:参照分子克隆所述方法从栉孔扇贝闭壳肌中提取总DNA
根据已知的G-型溶菌酶基因序列在其启动子区设计引物
即从不同海区和养殖场收集栉孔扇贝个体
PCR扩增42个敏感个体和40个抗病个体的G-型溶菌酶启动区序列后
其中-754ID和-754II个体在抗病群体和敏感群体中出现的频率无显著差别
一种栉孔扇贝抗病相关G-型溶菌酶基因标记
克隆得到一段762个碱基的DNA序列
用病原菌浸泡感染
针对-754TATCTCGATCAGG插入/缺失(I/D)及-391A/G转换分别选用Taq I和Hap II对PCR产物进行酶切
而-391AA个体在敏感群体中出现的频率显著高于抗病群体
其特征在于它的技术内容包括以下四个方面:1)栉孔扇贝G-型溶菌酶基因启动区部分序列的克隆
连入T载体后进行测序
根据死亡时间判断扇贝对病原菌感染抵抗能力
聚丙烯酰胺凝胶电泳后
-391AG个体在抗病群体中出现的频率显著高于敏感群体。因此
获得其核苷酸序列。2)抗病群体和敏感群体的制备:采用人工感染的方法获得抗病群体和敏感群体
将扇贝分为抗病群体和敏感群体。3)抗病相关G-型溶菌酶基因标记的筛选:对来自5个个体的10个克隆进行了测序
各发现两种基因型
将-391AA作为疾病敏感相关的G-型溶菌酶基因标记
发现了10处多态性位点
-754II
而将-391AG作为抗病相关的G-型溶菌酶基因标记。4)携带抗病相关基因标记个体的快速筛查:取栉孔扇贝个体全血1μl作为模版
-754ID
PCR扩增G-型溶菌酶基因启动区序列
-391AA和-391AG
用Hap II对产物进行酶切
聚丙烯酰胺凝胶电泳分型后
选择-391AG个体作为抗病个体。
基因组研究的关键平台——大片段文库
CNKI期刊论文
OAI收割
2008
作者:
张洋
;
张晓军
;
刘斌
;
李富花
;
相建海
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提交时间:2024/12/20
基因组计划
物理图谱
抗性筛选
图位克隆
筛选标记
插入片段
克隆位点
人工染色体