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离子液体/低共熔溶剂中甲壳素制备及功能化研究
学位论文
OAI收割
: 中国科学院大学, 2019
作者:
冯咪
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提交时间:2020/06/17
从废弃虾蟹壳提取的甲壳素,可用于医药、农业及纺织等领域,实现废弃资源回收,有利于可持续发展。然而,传统甲壳素及其功能化产品的制备工艺,需要大量酸碱溶液及有机溶剂,流程长,水耗大,污染大,已逐渐被淘汰。离子液体具有极低的蒸汽压、良好的热稳定性、可设计的结构及丰富的氢键网络等特点,为甲壳素制备及功能化提供了新选择。目前离子液体中甲壳素的制备及功能化研究尚少,且存在成本高、水耗大及离子液体难循环等问题。此外,尚无有关直接从虾蟹壳制备甲壳素功能化产物的报道。基于以上研究背景,本论文以虾壳为原料,开展基于离子液体/低共熔溶剂中的甲壳素、以及甲壳素/zn复合物、o-酰化甲壳素等功能化甲壳素制备的基础研究,为废弃虾壳的直接转化提供了新思路,主要研究内容及创新性研究成果如下:(1)无机盐水溶液-咪唑离子液体体系中甲壳素的制备。在此体系中,无机盐水溶液通过离子交换去除碳酸钙,离子液体1-丁基-3-甲基咪唑氯盐([Bmim]Cl)通过氢键作用去除蛋白质及引入的杂质镍,从而制得甲壳素。考察了无机盐种类、实验温度对除钙的影响,以及实验温度、料液比对除蛋白及杂质镍的影响。结果表明,虾壳粉依次与niso4水溶液(20 Wt%)、[Bmim]Cl在130 °c反应24 H,可得到纯度为98.8 Wt%的甲壳素。由此可见,离子交换可以去除虾壳中碳酸钙,同时负载金属盐,为甲壳素/金属复合物制备提供新思路。(2)磷酸酯类离子液体-无机盐水溶液体系中甲壳素/zn复合物的制备。首先利用磷酸酯类离子液体去除虾壳中蛋白质,随后利用zn(Oac)2·2h2o水溶液去除碳酸钙同时负载锌,得到甲壳素/zn复合物。考察了磷酸酯类离子液体种类、实验温度、料液比、实验时间对除蛋白的影响,以及zn(Oac)2·2h2o水溶液浓度、实验时间、温度对除钙及负载锌的影响,初步评价了离子液体循环使用性能、甲壳素/zn复合物对pet醇解的催化性能。实验结果表明,在130 °c条件下,虾壳粉依次与1-乙基-3-甲基咪唑磷酸甲酯([Emim][Dmp])、zn(Oac)2·2h2o水溶液(20 Wt%)反应24 H,得到纯度为99.1 Wt%,锌含量为13.4 Wt%的甲壳素/zn复合物
所用[Emim][Dmp]循环使用五次时,仍保持原有除蛋白质能力
所得甲壳素/zn复合物,甲壳素构型为α,锌离子为znCo3/zn(Oh)2,其对pet醇解表现出良好的催化性能。由此可见,不同离子液对虾壳中蛋白质、甲壳素优先溶解能力不同。(3)金属低共熔溶剂水溶液中甲壳素/zn复合物的制备。基于以上研究思路,设计合成金属低共熔溶剂尿素/zn(Oac)2·2h2o(u-zn),其水溶液同时具备除钙、除蛋白及负载金属功能,实现了从虾壳一步制备甲壳素/zn复合物的目的。考察了u-zn水溶液浓度、料液比、实验时间及温度对产物纯度及锌负载量的影响,测试了甲壳素/zn复合物的抗菌效果,探究了u-zn水溶液与虾壳中各组分相互作用,揭示了碳酸钙去除、锌负载及蛋白质去除的机理。实验结果表明,虾壳粉与u-zn(30 Wt%)在130 °c反应24 H,可得纯度为97.2 Wt%、锌含量为34.7 Wt%的甲壳素/zn复合物,其对革兰氏阴性菌及阳性菌具有良好的抑制作用。甲壳素/zn复合物中甲壳素构型保持为α,其聚合度高于甲壳素标样,锌离子以碱式碳酸锌(zn5(Co3)2(Oh)6)的形式存在。机理研究证实,配位能力较高的锌离子与虾壳中钙离子交换,原位形成碳酸锌,然后水解为碱式碳酸锌,释放co2
虾壳中蛋白质分子被包裹于水溶液中的u-zn簇内,溶解于其中,从而去除。由此可见,u-zn水溶液的离子交换能力及聚集作用,是甲壳素/zn复合物形成的主要原因。(4)酸性低共熔溶剂中酰化甲壳素的制备。延续多功能低共熔溶剂设计的理念,设计合成11种氯化胆碱-有机酸低共熔溶剂,同时具备除钙、除蛋白、及酰化的能力,实现从虾壳一步制备酰化甲壳素的目的。考察了低共熔溶剂种类、实验温度、实验时间、料液比及水含量对酰化甲壳素纯度及酰化度的影响,评价了酸性低共熔溶剂的循环性能,测试了酰化甲壳素的抗菌及抗肿瘤效果,探究了低共熔溶剂与虾壳各组分的相互作用,明确了虾壳中碳酸钙去除、蛋白质去除及甲壳素酰化的机理。实验结果表明,虾壳粉与氯化胆碱/dl-苹果酸(1:2,chcl 1/dl-mal 2)在150 °c条件下反应3 H,得到了纯度为98.6 wt%,酰化度为0.46的o-苹果酸酰化甲壳素,其对革兰氏阳性菌及神经胶质瘤c6细胞系表现出一定抑制效果。结构分析确定,所得产物确实为o-酰化甲壳素,且其相对分子质量折合计算后高于甲壳素标样。机理研究证实,在此体系中,虾壳中碳酸钙与酸性低共熔溶剂游离出的h+反应,形成水溶性有机酸盐,同时释放co2,形成绵密气泡
虾壳中一部分蛋白质在酸性条件下降解为可溶于水的氨基酸,另一部分蛋白质与低共熔溶剂形成氢键作用,溶解于其中,转变为水溶性蛋白
甲壳素结构被低共熔溶剂撑开,反应活性提高,在h+催化下与低共熔溶剂反应,从而生成酰化甲壳素。由此可见,所用低共熔溶剂的酸度、氢键形成能力是o-酰化甲壳素生成的主要原因。
氮限制有利于三角褐指藻脂质积累
CNKI期刊论文
OAI收割
2015
作者:
赵佩佩
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顾文辉
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伍松翠
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解修俊
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赵宇鹏
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提交时间:2024/12/18
硅藻
脂质合成
代谢路径
蛋白质组学
三角褐指藻
结晶胰岛素全合成50周年回望
期刊论文
OAI收割
生命科学, 2015, 期号: 6, 页码: 656-659
作者:
陆德培
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提交时间:2016/03/31
国民经济基础
人工合成
全合成
上海生化所
活力水平
大兵团作战
科研条件
天然蛋白质
王应睐
溶剂组
种子萌发及其调控的研究进展
期刊论文
OAI收割
作物学报, 2014, 卷号: 40, 期号: 07, 页码: 1141-1156
作者:
徐恒恒
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黎妮
;
刘树君
;
王伟青
;
王伟平
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提交时间:2023/03/15
萌发主要事件
植物激素
蛋白合成与翻译后修饰
蛋白质组
萌发的调节
种子萌发
微孔模拟物Stber二氧化硅的制备及表征
期刊论文
OAI收割
矿物学报, 2013, 期号: S2, 页码: 568-568
李姗姗
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万泉
;
覃宗华
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傅宇虹
;
谷渊涛
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提交时间:2016/03/23
纳米孔
模拟物
St ber 纳米级别
凝固点降低
蛋白质结合
微孔
空间限制
可控合成
一种链酶亲和素结合功能荧光磁性纳米颗粒的制备方法
专利
OAI收割
专利类型: 发明, 专利号: CN201010261766.7, 申请日期: 2011-04-13, 公开日期: 2011-04-13
陈英杰
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秦松
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刘少芳
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崔玉琳
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姜鹏
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陈华新
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李富超
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提交时间:2014/08/04
一种链酶亲和素结合功能荧光磁性纳米颗粒的制备方法
2)将Strep?II?apcA基因片段插入到带有6×His基因的载体A中6×His基因的下游
将Strep?II?apcB基因片段插入到带有6×His基因的载体B中6×His基因的下游
3)将步骤2)所得两个表达载体同时转化大肠杆菌
4)将上述工程菌诱导培养后分离纯化
5)将所得双标签重组APC荧光蛋白质与锌离子修饰的超顺磁性硅壳纳米颗粒振荡混合
其特征在于:1)通过PCR反应将Strep?II标签基因分别连在别藻蓝蛋白APC的α和β亚基脱辅基蛋白基因的N末端
同时将藻胆素生物合成酶基因hol和pcyA插入到载体上
同时将色基裂合酶基因cpcS和cpcU插入到载体上
筛选获得同时表达上述基因的工程菌
得到双标签重组APC荧光蛋白质
即得到链酶亲和素结合功能荧光磁性纳米颗粒。
分别得到Strep?II?apcA和Strep?II?apcB基因片段
得到pCDF?Strep?II?apcA?hol?pcyA
得到pRSF?Strep?II?apcB?cpcS?cpcU
待用
待用
待用
IUGR对不同日龄哺乳环江香猪mTOR通路蛋白发育模式的影响
会议论文
OAI收割
2010
耿梅梅
;
孔祥峰
;
傅德智
;
何庆华
;
宋小燕
;
杨龙胜
;
刘俊峰
;
印遇龙
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提交时间:2012/05/29
mTOR:7069
IUGR:6794
日龄:1861
发育模式:504
通路:205
仔猪:193
地方猪种:172
蛋白质合成率:103
背最长肌:70
繁殖力:58
肉质:58
器官生长:43
饲料的:27
人类疾病:23
基因表达量:20
生长性能:14
肌肉:14
体组成:12
哺乳动物:9
宫内发育迟缓:8
植物生长抑制剂对万寿菊镉积累和化学形态的影响
期刊论文
OAI收割
农业环境科学学报, 2010, 期号: 2, 页码: 258-263
作者:
张银秋
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台崇帆
;
李培军
;
冯倩
;
杜艳玲
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提交时间:2016/12/06
镉积累
生长速率
细胞分裂
蛋白质合成
化学形态
金纳米粒子的微波法合成及在蛋白质检测中的应用
期刊论文
OAI收割
高等学校化学学报, 2010, 卷号: 31, 期号: 12, 页码: 2372-2374
单洪岩
;
刘殿骏
;
王振新
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提交时间:2012/06/07
金纳米粒子
微波法合成
蛋白质检测
一种别藻蓝蛋白类荧光蛋白质的制备方法
专利
OAI收割
专利类型: 发明, 专利号: CN200810157782.4, 申请日期: 2009-05-27, 公开日期: 2009-05-27
张伟杰
;
关翔宇
;
秦松
;
陈华新
;
杨雨
;
刘少芳
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提交时间:2014/08/04
1. 一种别藻蓝蛋白类荧光蛋白质的制备方法
2)将上述表达质粒转化宿主菌后
发酵后
其特征包括以下步骤:1)将别藻蓝蛋白类脱辅基蛋白基因或其同源基因和藻胆素生物合成酶基因(Hox1和pcyA)克隆于同一表达载体中
得到相应的工程菌
用常规方法纯化蛋白质
得到脱辅基蛋白和色素合成酶共同的表达质粒
应用此工程菌发酵生产别藻蓝蛋白类荧光蛋白质
纯化得到相应的别藻蓝蛋白类荧光蛋白质。