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海洋研究所 [3]
采集方式
OAI收割 [3]
内容类型
专利 [3]
发表日期
2011 [2]
2008 [1]
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共3条,第1-3条
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一种从霞水母刺丝囊毒素内分离致死毒素蛋白的方法
专利
OAI收割
专利类型: 发明, 专利号: CN201110027667.7, 申请日期: 2011-09-07, 公开日期: 2011-09-07
作者:
于华华
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提交时间:2014/08/04
一种从霞水母刺丝囊毒素中分离致死毒素蛋白的方法
2)将上述步骤1)上清液于2~6℃下用缓冲液透析过夜
3)将步骤2)所得上清液过滤
4)将步骤3)得到的上清液用强阴离子交换树脂Mono?Q预装柱纯化分离
其特征在于:1)将霞水母刺丝囊细胞加入预冷缓冲液中破碎
然后低温离心
而后用含Con?A?Sepharose?4B亲和柱进行分离
依次采用pH7.8
破碎后2~6℃离心
收集上清液
分离时采用含有0.1~0.3Mα?甲基?D?甘露糖苷和0.1~0.3MNaCl的pH7.4
浓度为10~30mM的Tris?HCl缓冲液和含1M?NaCl的pH7.8
收集上清液
待用
浓度10~30mM的Tris?HCl缓冲液进行洗脱并收集洗脱液
浓度为10~30mM的Tris?HCl缓冲液进行梯度洗脱
待用
低温离心
流速为0.2~0.5mLmin?1
收集上清液
收集约25~40min洗脱液
待用
即为从霞水母刺丝囊毒素中分离致死毒素蛋白。
一种从霞水母刺丝囊毒素内分离热激蛋白60的方法
专利
OAI收割
专利类型: 发明, 专利号: CN201010596892.8, 申请日期: 2011-08-17, 公开日期: 2011-08-17
作者:
邢荣娥
;
李鹏程
;
于华华
;
秦玉坤
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提交时间:2014/08/04
一种从霞水母刺丝囊毒素中分离热激蛋白60的方法
2)步骤1)所得上清液即为霞水母刺丝囊细胞毒素于2?6℃下对pH7.820mM?Tris?HCl缓冲液透析过夜
3)将步骤2)所得上清液过滤
4)将步骤3)用截留分子量为3kDa的超滤管浓缩的浓缩物用凝胶树脂Superdex75柱纯化分离
其特征在于:1)将从霞水母触手中得到的霞水母刺丝囊细胞加入预冷缓冲液中破碎
然后低温离心
而后将其上含DEAE?SepharoseFast?Flow的阴离子交换树柱进行分离
采用含有浓度为0.15?0.5M的NaCl的pH7.820mM?Tris?HCl缓冲液洗脱
破碎后低温离心
收集上清液
首先采用pH7.820mMTris?HCl缓冲液洗脱
流速为0.2?0.5mLmin?1
收集上清液
待用
而后采用含有浓度分别为0.1?2M不同浓度的NaCl的pH7.820mM?Tris?HCl缓冲液进行梯度洗脱
收集各洗脱峰
待用
收集各洗脱峰
其中流出体积50mL?80mL内的组分即为热激蛋白60。
而后用截留分子量为3kDa的超滤管浓缩
待用
一种分离纯化组蛋白H4的方法
专利
OAI收割
专利类型: 发明, 专利号: CN200610047932.7, 申请日期: 2008-04-02, 公开日期: 2008-04-02
作者:
邢荣娥
;
李鹏程
;
于华华
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提交时间:2014/08/04
1
而后将其在相对离心力为9160-29700g下离心10-30min
(2)分离纯化:①加样前样品预处理:将步骤1)得到的样品在2℃-6℃下加入到离子交换剂中
②将已吸附蛋白的离子交换剂注入到层析柱中
③洗脱:采用含有NaCl的缓冲液
一种分离纯化组蛋白H4的方法
取上清液备用
每隔8-12min搅拌一次
用3-5倍床体积的缓冲液淋洗
以60-90ml/h的洗脱速度进行阶段性洗脱
其特征在于包括以下步骤:(1)提取样品:将50g-150g的海蜇样品破碎
共搅拌2-6次
收集组分。
然后加入样品重量0.5-4倍的缓冲液
而后在相对离心力为573-1467g下
放入2℃-6℃下
离心5-10min
浸泡0.5-48hh
弃去上清液