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一种提取单个鱼卵仔鱼微量总DNA的简便快速方法 专利  OAI收割
专利类型: 发明, 专利号: CN201110027643.1, 申请日期: 2011-08-24, 公开日期: 2011-08-24
尤锋; 吴志昊; 王伟; 徐冬冬; 张毅; 张培军; 徐永立
收藏  |  浏览/下载:150/0  |  提交时间:2014/08/04
一种提取单个鱼卵仔鱼微量总DNA的简便快速方法  1尾仔鱼/0.05?0.5mL无水乙醇  2)样品中固定液的去除:取步骤1)所得已固定的单个鱼卵或仔鱼样品  3)样品消化:取上述洗涤过的单个鱼卵或仔鱼  4)提取总DNA:将步骤3)消化至澄清的溶液中加入100?300μL?5?6mol/L?NaCl溶液  其特征在于:1)样品固定:采集鱼卵或仔鱼  加入生理盐水洗涤  加入100?300μL?DNA提取缓冲液和10?30μL细胞裂解缓冲液  震荡20?30秒。15000g离心30分钟  滤去水后立即加入无水乙醇  1000?2000g离心20?60秒去除多余生理盐水  使细胞破壁  吸取上清液使蛋白质去除  而后于?20℃或室温保存备用  再用滤纸吸干样品  而后将细胞破壁的单个鱼卵或仔鱼加入10?100μg蛋白酶K和10?100μg?RNA酶  然后在上清液中加入等体积异丙醇  鱼卵或仔鱼与无水乙醇比例为:1mL鱼卵/2?5mL无水乙醇  重复2?3次  震荡混匀  轻轻混匀  于50?70℃温育  ?20℃静置1?2小时  每10?20分钟颠倒混匀一次  15000g离心15分钟  消化至溶液澄清  沉淀即得到单个鱼卵仔鱼微量总DNA。  待用  
一种海水中亚铁、三价铁及总铁含量的测定方法 专利  OAI收割
专利类型: 发明, 专利号: CN201010110284.1, 申请日期: 2010-07-21, 公开日期: 2010-07-21
吴志昊; 尤锋; 马得友; 徐冬冬; 张培军; 徐永立
收藏  |  浏览/下载:142/0  |  提交时间:2014/08/04
一种海水中亚铁  ②向步骤①所得经酸化的水样中加入1-2mol/L氢氧化钠溶液   Fe ( II ) l&alpha  ③向1-5mL空白对照溶液   - A 2 &epsiv  其中   Fe ( III ) l &epsiv  已知浓度的标准溶液配制方法为   Fe ( II ) l&alpha  ④在562nm波长下   ( &epsiv  ⑤取0.8-4mL测定吸光度后的空白对照溶液   Fe ( II ) l - &epsiv  室温静置5-10min后   Fe ( III ) l ) C Fe ( III ) = A 2 - A 1 &alpha  ⑥在562nm波长下   &alpha  ⑦重复步骤⑤   ( &epsiv  在562nm波长下   Fe ( II ) l - &epsiv  ⑧亚铁   Fe ( III ) l ) CFe(t)=CFe(II)+CFe(III)其中   C Fe ( II ) = A 1 &epsiv  三价铁及总铁含量的测定方法  氢氧化钠溶液与水样的体积比为1∶(20-100)  已知浓度的标准溶液及待测水样中分别加入100-500μL用0.05-0.2mol/L乙酸铵水溶液配制的0.01-0.05mol/L菲咯嗪一钠盐溶液显色  空白对照溶液配制方法为  取pH已经调至4-6的空白对照溶液  先将空白对照溶液的吸光度设置为零后  标准溶液及待测水样  再加入50-250μL用氨水配制的pH为9-10的10mol/L乙酸铵水溶液混匀  先将空白对照溶液的吸光度设置为零后  先将空白对照溶液的吸光度设置为零后  三价铁和总铁浓度计算  l为比色皿的光径。  其特征在于  使水样pH在4-6之间  先配制与待测水样初始盐度一致的氯化钠水溶液  加入FeCl3使其总铁浓度为0.1-1mg/L  测定标准溶液及待测水样的吸光度A1样  加入150-750μL用1-3mol/L盐酸配制的1-2mol/L的盐酸羟胺溶液混匀  测定标准溶液及待测水样的吸光度A2样  测定标准溶液的吸光度A3标  通过标准溶液的总铁浓度及其测定的3次吸光度先根据下述公式计算出亚铁和三价铁的吸光系数εFe(II)  具体步骤如下:①采集10-100mL水样  作为待测水样  再加入1-2mol/L盐酸使其pH在4-6之间  A1标  A2标  εFe(III)以及α  立即加入1-2mol/L盐酸  α=A3/A2  盐酸与水样的体积比为1∶(20-100)  以此再结合水样测定的2次吸光度利用下述公式计算出海水水样中亚铁CFe(II)  使水样pH至1-2  三价铁CFe(III)及总铁CFe(t)浓度  作为酸化水样  密封  室温下备用  
一种培养海洋光合细菌光-暗发酵耦联制氢的方法 专利  OAI收割
专利类型: 发明, 专利号: CN200610047540.0, 申请日期: 2008-02-27, 公开日期: 2008-02-27
王广策; 才金玲; 周百成
收藏  |  浏览/下载:71/0  |  提交时间:2014/08/04
1.一种培养光发酵细菌光-暗发酵耦联制氢的方法  而后重复上述富集培养2-3次  ②产氢培养:将富集培养后的接种物划线挑取单菌落  2)暗培养产氢:①预处理:将污泥或污水样品通过碱性或酸性溶液调节其PH值  ②培养产氢:将2)①预处理得到的菌种接种到海水养殖场污水或污泥中培养放氢  3)光-暗产氢耦联放氢:将步骤1)①中得到的光合细菌加入到步骤2)②中继续放氢  其特征在于包括以下步骤:1)光培养产氢:①富集培养:取样以10-50ml的污泥样品接种到50-500ml培养液中富集培养  直到富集培养液变成红色  培养至含有产氢培养基的培养皿中可产氢  而后将样品静止0.5-1.5小时备用  其培养条件为:反应温度28-35℃  其反应条件为:反应温度控制在28-35℃  培养箱温度为28-35℃  培养条件:每升样品中加入1-2克醋酸钠或1-2克丁酸钠  光照强度为2500-4000勒克斯  光照强度控制在2500-4000勒克斯。  光照强度为2500-4000勒克斯  培养温为28-32℃  无氧条件培养3-5天  pH为7.5-8.2  光照强度为2500-4000勒克斯  同时保持无氧状态  
一种海洋共生体的暂养、共生生物分离纯化的方法 专利  OAI收割
专利类型: 发明, 专利号: CN200510046777.2, 申请日期: 2007-01-03, 公开日期: 2007-01-03
王广策; 朱葆华; 尤丽莉; 闫萧駰; 曾呈奎
收藏  |  浏览/下载:41/0  |  提交时间:2014/08/04