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机构
海洋研究所 [4]
采集方式
OAI收割 [4]
内容类型
专利 [4]
发表日期
2011 [1]
2010 [1]
2008 [1]
2007 [1]
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共4条,第1-4条
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一种提取单个鱼卵仔鱼微量总DNA的简便快速方法
专利
OAI收割
专利类型: 发明, 专利号: CN201110027643.1, 申请日期: 2011-08-24, 公开日期: 2011-08-24
尤锋
;
吴志昊
;
王伟
;
徐冬冬
;
张毅
;
张培军
;
徐永立
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提交时间:2014/08/04
一种提取单个鱼卵仔鱼微量总DNA的简便快速方法
1尾仔鱼/0.05?0.5mL无水乙醇
2)样品中固定液的去除:取步骤1)所得已固定的单个鱼卵或仔鱼样品
3)样品消化:取上述洗涤过的单个鱼卵或仔鱼
4)提取总DNA:将步骤3)消化至澄清的溶液中加入100?300μL?5?6mol/L?NaCl溶液
其特征在于:1)样品固定:采集鱼卵或仔鱼
加入生理盐水洗涤
加入100?300μL?DNA提取缓冲液和10?30μL细胞裂解缓冲液
震荡20?30秒。15000g离心30分钟
滤去水后立即加入无水乙醇
1000?2000g离心20?60秒去除多余生理盐水
使细胞破壁
吸取上清液使蛋白质去除
而后于?20℃或室温保存备用
再用滤纸吸干样品
而后将细胞破壁的单个鱼卵或仔鱼加入10?100μg蛋白酶K和10?100μg?RNA酶
然后在上清液中加入等体积异丙醇
鱼卵或仔鱼与无水乙醇比例为:1mL鱼卵/2?5mL无水乙醇
重复2?3次
震荡混匀
轻轻混匀
于50?70℃温育
?20℃静置1?2小时
每10?20分钟颠倒混匀一次
15000g离心15分钟
消化至溶液澄清
沉淀即得到单个鱼卵仔鱼微量总DNA。
待用
一种海水中亚铁、三价铁及总铁含量的测定方法
专利
OAI收割
专利类型: 发明, 专利号: CN201010110284.1, 申请日期: 2010-07-21, 公开日期: 2010-07-21
吴志昊
;
尤锋
;
马得友
;
徐冬冬
;
张培军
;
徐永立
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浏览/下载:142/0
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提交时间:2014/08/04
一种海水中亚铁
②向步骤①所得经酸化的水样中加入1-2mol/L氢氧化钠溶液
Fe
(
II
)
l&alpha
③向1-5mL空白对照溶液
-
A
2
&epsiv
其中
Fe
(
III
)
l
&epsiv
已知浓度的标准溶液配制方法为
Fe
(
II
)
l&alpha
④在562nm波长下
(
&epsiv
⑤取0.8-4mL测定吸光度后的空白对照溶液
Fe
(
II
)
l
-
&epsiv
室温静置5-10min后
Fe
(
III
)
l
)
C
Fe
(
III
)
=
A
2
-
A
1
&alpha
⑥在562nm波长下
&alpha
⑦重复步骤⑤
(
&epsiv
在562nm波长下
Fe
(
II
)
l
-
&epsiv
⑧亚铁
Fe
(
III
)
l
)
CFe(t)=CFe(II)+CFe(III)其中
C
Fe
(
II
)
=
A
1
&epsiv
三价铁及总铁含量的测定方法
氢氧化钠溶液与水样的体积比为1∶(20-100)
已知浓度的标准溶液及待测水样中分别加入100-500μL用0.05-0.2mol/L乙酸铵水溶液配制的0.01-0.05mol/L菲咯嗪一钠盐溶液显色
空白对照溶液配制方法为
取pH已经调至4-6的空白对照溶液
先将空白对照溶液的吸光度设置为零后
标准溶液及待测水样
再加入50-250μL用氨水配制的pH为9-10的10mol/L乙酸铵水溶液混匀
先将空白对照溶液的吸光度设置为零后
先将空白对照溶液的吸光度设置为零后
三价铁和总铁浓度计算
l为比色皿的光径。
其特征在于
使水样pH在4-6之间
先配制与待测水样初始盐度一致的氯化钠水溶液
加入FeCl3使其总铁浓度为0.1-1mg/L
测定标准溶液及待测水样的吸光度A1样
加入150-750μL用1-3mol/L盐酸配制的1-2mol/L的盐酸羟胺溶液混匀
测定标准溶液及待测水样的吸光度A2样
测定标准溶液的吸光度A3标
通过标准溶液的总铁浓度及其测定的3次吸光度先根据下述公式计算出亚铁和三价铁的吸光系数εFe(II)
具体步骤如下:①采集10-100mL水样
作为待测水样
再加入1-2mol/L盐酸使其pH在4-6之间
A1标
A2标
εFe(III)以及α
立即加入1-2mol/L盐酸
α=A3/A2
盐酸与水样的体积比为1∶(20-100)
以此再结合水样测定的2次吸光度利用下述公式计算出海水水样中亚铁CFe(II)
使水样pH至1-2
三价铁CFe(III)及总铁CFe(t)浓度
作为酸化水样
密封
室温下备用
一种培养海洋光合细菌光-暗发酵耦联制氢的方法
专利
OAI收割
专利类型: 发明, 专利号: CN200610047540.0, 申请日期: 2008-02-27, 公开日期: 2008-02-27
王广策
;
才金玲
;
周百成
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提交时间:2014/08/04
1.一种培养光发酵细菌光-暗发酵耦联制氢的方法
而后重复上述富集培养2-3次
②产氢培养:将富集培养后的接种物划线挑取单菌落
2)暗培养产氢:①预处理:将污泥或污水样品通过碱性或酸性溶液调节其PH值
②培养产氢:将2)①预处理得到的菌种接种到海水养殖场污水或污泥中培养放氢
3)光-暗产氢耦联放氢:将步骤1)①中得到的光合细菌加入到步骤2)②中继续放氢
其特征在于包括以下步骤:1)光培养产氢:①富集培养:取样以10-50ml的污泥样品接种到50-500ml培养液中富集培养
直到富集培养液变成红色
培养至含有产氢培养基的培养皿中可产氢
而后将样品静止0.5-1.5小时备用
其培养条件为:反应温度28-35℃
其反应条件为:反应温度控制在28-35℃
培养箱温度为28-35℃
培养条件:每升样品中加入1-2克醋酸钠或1-2克丁酸钠
光照强度为2500-4000勒克斯
光照强度控制在2500-4000勒克斯。
光照强度为2500-4000勒克斯
培养温为28-32℃
无氧条件培养3-5天
pH为7.5-8.2
光照强度为2500-4000勒克斯
同时保持无氧状态
一种海洋共生体的暂养、共生生物分离纯化的方法
专利
OAI收割
专利类型: 发明, 专利号: CN200510046777.2, 申请日期: 2007-01-03, 公开日期: 2007-01-03
王广策
;
朱葆华
;
尤丽莉
;
闫萧駰
;
曾呈奎
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提交时间:2014/08/04
权利要求书1.一种海洋共生体的暂养
分离纯化步骤如下:用过滤海水洗净共生体的表面
然后过滤
沉淀用提取缓冲液重悬浮
共生生物分离纯化的方法
取共生体组织放入匀浆器中
滤液离心
重复匀浆
其特征在于:暂养条件如下:水温23-28℃
然后加入分离提取缓冲液和青霉素
过滤离心的步骤
海水比重1.000-1.121
匀浆
每次重悬浮的溶液均进行镜检
盐度26-31‰
直到提取的共生生物纯净为止。
光照强度100-250μmoLm-2s-1
光照周期12小时光照
12小时黑暗