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一种不同乙酰度的N-乙酰化壳六糖的分离纯化方法 专利  OAI收割
专利类型: 发明, 专利号: CN201310006368.4, 申请日期: 2014-03-05, 公开日期: 2014-03-05
作者:  
于华华;  邢荣娥;  李鹏程;  秦玉坤
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海洋沉积硅藻研究方法与应用综述 期刊论文  OAI收割
地球科学进展, 2013, 卷号: 32, 期号: 12, 页码: 1296-1304
王艳娜; 刘东艳
收藏  |  浏览/下载:93/0  |  提交时间:2014/07/06
一种乙酰化壳三糖的制备方法 专利  OAI收割
专利类型: 发明, 专利号: CN201210259734.2, 申请日期: 2012-12-19, 公开日期: 2012-12-19
作者:  
李鹏程;  邢荣娥;  于华华;  秦玉坤
收藏  |  浏览/下载:41/0  |  提交时间:2014/08/04
一种单一聚合度壳寡糖制备方法 专利  OAI收割
专利类型: 发明, 专利号: CN201210146042.7, 申请日期: 2012-09-05, 公开日期: 2012-09-05
作者:  
邢荣娥;  李鹏程;  于华华;  秦玉坤
收藏  |  浏览/下载:123/0  |  提交时间:2014/08/04
一种从沙蜇刺丝囊毒素内分离溶血毒素蛋白的方法 专利  OAI收割
专利类型: 发明, 专利号: CN201110414952.4, 申请日期: 2012-06-27, 公开日期: 2012-06-27
作者:  
于华华;  邢荣娥;  李鹏程;  秦玉坤
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一种从沙蜇刺丝囊毒素中分离溶血毒素蛋白的方法  所述洗脱液为含不同浓度NaCl的磷酸缓冲液  收集采用含0.2M?NaCl的磷酸缓冲液洗脱下的组分  2)将上述所得洗脱组分经微孔滤膜过滤  其特征在于:1)将处理后的沙蜇刺丝囊细胞上清液经微孔滤膜过滤  NaCl浓度分别为0  滤液经凝胶色谱柱Superdex200采用0.15M?NaCl  滤液经含DEAE?Sepharose?Fast?Flow阴离子交换柱  0.1  10~50mM  采用洗脱液以1?3mLmin?1流速进行纯化分离  0.2  pH7.0PBS缓冲液以0.2~1.0mLmin?1流速进行分离纯化  收集洗脱液在低温下用3~5K的超滤管进行浓缩  0.3和2M  收集洗脱体积处于60~80mL的洗脱液  待用  而后在2~6℃下用3~5K的超滤管进行浓缩  浓缩后即得到从沙蜇刺丝囊毒素中分离溶血毒素蛋白。  
一种化合物2,3-二溴-4,5-二羟基苯甲基甲醚的制备方法 专利  OAI收割
专利类型: 发明, 专利号: CN201010261794.9, 申请日期: 2012-03-14, 公开日期: 2012-03-14
韩丽君; 郭书举; 袁毅; 李宪璀; 李婷
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一种化合物2  2)将上述浸泡液在62?65℃下减压浓缩至干  3)溶解后浸膏中加入等体积的乙酸乙酯入震动摇荡至水相接近无色  4)将上述乙酸乙酯相溶液通过硅胶装柱分离  其中石油醚和乙酸乙酯混合液按体积比为1∶1进行混合  5)将上述溶解液经凝胶柱依次用洗脱液洗脱  3?二溴?4  得到浸膏  萃取分离  并用乙酸乙酯相溶液2?3倍体积的石油醚和乙酸乙酯混合液洗涤  收集洗脱液纯化后即得到化合物2  5?二羟基苯甲基甲醚的制备方法  而后将浸膏中加入其5?10倍体积的水进行溶解  乙酸乙酯相溶液保留待用  收集洗脱液并减压浓缩至干  3?二溴?4  其特征在于:1)将粉碎后原料扇形叉枝藻与85?95%的乙醇按体积比为1∶10?1∶12的比利浸泡24?48小时  浓缩物溶解待用  5?二羟基苯甲基甲醚。  待用  
一种查尔霉素化合物的制备方法 专利  OAI收割
专利类型: 发明, 专利号: CN201110080565.1, 申请日期: 2011-10-19, 公开日期: 2011-10-19
丁玲; 秦松; 李富超; 张伟杰; 哈特穆特·拉赤
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一种查尔霉素化合物的制备方法  其中链霉菌M491保存于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心CGMCC  2)摇床培养:将上述培养的0.5?1.0cm2带有孢子丝的琼脂块接种到200?250ml豆粉液体培养基  3)萃取:将上述发酵液用有机溶剂浸提3?4次  4)纯化:将粗提物经硅胶柱层析  组分4经浓硫酸/茴香醛显色待含棕黄色的条带  其特征在于:按如下步骤操作:1)固体培养:将海洋链霉菌M491接种于M2+固体培养基  保藏编号为:CGMCC?No.2446  在28?35℃温度以110?130rpm的转速下进行摇床培养4?5天后  合并有机相浓缩得粗提物  以1?3L二氯甲烷  再将组分4经硅胶柱层析以二氯甲烷/7%甲醇进行梯度洗脱  在28?30℃下培养直至长出青灰色的孢子  待用  2?4L二氯甲烷/2%甲醇  待以展开剂为二氯甲烷/10%甲醇时Rf=0.22?0.24处  1?3L二氯甲烷/5%甲醇  分离得到式二化合物  1?3L二氯甲烷/10%甲醇梯度进行洗脱  在Rf=0.25?0.27分离得到式三化合物。  流速为8?11mL/min  将所得组分3经浓硫酸/茴香醛显色待含棕黄色的条带  经葡聚糖层析后  在展开剂为二氯甲烷/10%甲醇时Rf=0.50?0.52分离得到式一化合物  
一种从霞水母刺丝囊毒素内分离致死毒素蛋白的方法 专利  OAI收割
专利类型: 发明, 专利号: CN201110027667.7, 申请日期: 2011-09-07, 公开日期: 2011-09-07
作者:  
于华华;  邢荣娥;  李鹏程;  秦玉坤
收藏  |  浏览/下载:35/0  |  提交时间:2014/08/04
一种从霞水母刺丝囊毒素中分离致死毒素蛋白的方法  2)将上述步骤1)上清液于2~6℃下用缓冲液透析过夜  3)将步骤2)所得上清液过滤  4)将步骤3)得到的上清液用强阴离子交换树脂Mono?Q预装柱纯化分离  其特征在于:1)将霞水母刺丝囊细胞加入预冷缓冲液中破碎  然后低温离心  而后用含Con?A?Sepharose?4B亲和柱进行分离  依次采用pH7.8  破碎后2~6℃离心  收集上清液  分离时采用含有0.1~0.3Mα?甲基?D?甘露糖苷和0.1~0.3MNaCl的pH7.4  浓度为10~30mM的Tris?HCl缓冲液和含1M?NaCl的pH7.8  收集上清液  待用  浓度10~30mM的Tris?HCl缓冲液进行洗脱并收集洗脱液  浓度为10~30mM的Tris?HCl缓冲液进行梯度洗脱  待用  低温离心  流速为0.2~0.5mLmin?1  收集上清液  收集约25~40min洗脱液  待用  即为从霞水母刺丝囊毒素中分离致死毒素蛋白。  
一种从霞水母刺丝囊毒素内分离热激蛋白60的方法 专利  OAI收割
专利类型: 发明, 专利号: CN201010596892.8, 申请日期: 2011-08-17, 公开日期: 2011-08-17
作者:  
邢荣娥;  李鹏程;  于华华;  秦玉坤
收藏  |  浏览/下载:55/0  |  提交时间:2014/08/04
一种从霞水母刺丝囊毒素中分离热激蛋白60的方法  2)步骤1)所得上清液即为霞水母刺丝囊细胞毒素于2?6℃下对pH7.820mM?Tris?HCl缓冲液透析过夜  3)将步骤2)所得上清液过滤  4)将步骤3)用截留分子量为3kDa的超滤管浓缩的浓缩物用凝胶树脂Superdex75柱纯化分离  其特征在于:1)将从霞水母触手中得到的霞水母刺丝囊细胞加入预冷缓冲液中破碎  然后低温离心  而后将其上含DEAE?SepharoseFast?Flow的阴离子交换树柱进行分离  采用含有浓度为0.15?0.5M的NaCl的pH7.820mM?Tris?HCl缓冲液洗脱  破碎后低温离心  收集上清液  首先采用pH7.820mMTris?HCl缓冲液洗脱  流速为0.2?0.5mLmin?1  收集上清液  待用  而后采用含有浓度分别为0.1?2M不同浓度的NaCl的pH7.820mM?Tris?HCl缓冲液进行梯度洗脱  收集各洗脱峰  待用  收集各洗脱峰  其中流出体积50mL?80mL内的组分即为热激蛋白60。  而后用截留分子量为3kDa的超滤管浓缩  待用  
川西獐牙菜和椭圆叶花锚化学成分的高效分离制备研究 学位论文  OAI收割
硕士, 北京: 中国科学院研究生院, 2011
贾静
收藏  |  浏览/下载:27/0  |  提交时间:2012/05/11