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一种不同乙酰度的N-乙酰化壳六糖的分离纯化方法
专利
OAI收割
专利类型: 发明, 专利号: CN201310006368.4, 申请日期: 2014-03-05, 公开日期: 2014-03-05
作者:
于华华
;
邢荣娥
;
李鹏程
;
秦玉坤
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提交时间:2014/08/04
一种不同乙酰度的N?乙酰化壳六糖的分离纯化方法
其特征在于:将全脱乙酰化壳六糖进行乙酰化后得到N?乙酰化壳六糖混合物
所得N?乙酰化壳六糖混合物溶解后用离子交换色谱柱以含0?2M浓度的NaCl的缓冲溶液
在pH3?6
2?5mLmin?1流速下进行分离纯化
以糖含量收集含有寡糖的不同组分的洗脱液
将不同组分的洗脱液分别经活性碳萃取脱盐后浓缩
即得到N?乙酰化壳六糖
N
N’?二乙酰化壳六糖
N
N’
N”?三乙酰化壳六糖
N
N’
N”
N”’?四乙酰化壳六糖
N
N’
N”
N”’
N””?五乙酰化壳六糖
N
N’
N”
N”’
N””
N””’?六乙酰化壳六糖。
海洋沉积硅藻研究方法与应用综述
期刊论文
OAI收割
地球科学进展, 2013, 卷号: 32, 期号: 12, 页码: 1296-1304
王艳娜
;
刘东艳
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提交时间:2014/07/06
海洋沉积硅藻
硅藻分离纯化
数值方法
海洋环境学应用
一种乙酰化壳三糖的制备方法
专利
OAI收割
专利类型: 发明, 专利号: CN201210259734.2, 申请日期: 2012-12-19, 公开日期: 2012-12-19
作者:
李鹏程
;
邢荣娥
;
于华华
;
秦玉坤
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提交时间:2014/08/04
一种乙酰化壳三糖的制备方法
其特征在于:将全脱乙酰化壳三糖进行乙酰化后得到N?乙酰化壳三糖混合物
所得N?乙酰化壳三糖混合物溶解后用离子交换色谱柱以0?1M浓度的NaCl溶液
2?5mLmin?1流速下进行分离纯化
收集0?15min
16?35min的洗脱液
将洗脱组分分别经活性碳萃取脱盐后浓缩
即得到N
N’?二乙酰化壳三糖和N?乙酰化壳三糖。
一种单一聚合度壳寡糖制备方法
专利
OAI收割
专利类型: 发明, 专利号: CN201210146042.7, 申请日期: 2012-09-05, 公开日期: 2012-09-05
作者:
邢荣娥
;
李鹏程
;
于华华
;
秦玉坤
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提交时间:2014/08/04
一种单一聚合度壳寡糖的制备方法
其特征在于:将全脱乙酰化壳寡糖溶解过滤后用离子交换色谱柱CM?Sephadex?C?25以0?3M浓度的NaCl溶液在2?5mL/min?1的流速下进行分离纯化
收集240?360min
360?460min
460?560min
560?640min
640?720min
720?780min
780?840min的洗脱液
将所得洗脱液分别经活性碳萃取脱盐后浓缩
即得到单一聚合度全脱乙酰化壳寡糖。
一种从沙蜇刺丝囊毒素内分离溶血毒素蛋白的方法
专利
OAI收割
专利类型: 发明, 专利号: CN201110414952.4, 申请日期: 2012-06-27, 公开日期: 2012-06-27
作者:
于华华
;
邢荣娥
;
李鹏程
;
秦玉坤
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提交时间:2014/08/04
一种从沙蜇刺丝囊毒素中分离溶血毒素蛋白的方法
所述洗脱液为含不同浓度NaCl的磷酸缓冲液
收集采用含0.2M?NaCl的磷酸缓冲液洗脱下的组分
2)将上述所得洗脱组分经微孔滤膜过滤
其特征在于:1)将处理后的沙蜇刺丝囊细胞上清液经微孔滤膜过滤
NaCl浓度分别为0
滤液经凝胶色谱柱Superdex200采用0.15M?NaCl
滤液经含DEAE?Sepharose?Fast?Flow阴离子交换柱
0.1
10~50mM
采用洗脱液以1?3mLmin?1流速进行纯化分离
0.2
pH7.0PBS缓冲液以0.2~1.0mLmin?1流速进行分离纯化
收集洗脱液在低温下用3~5K的超滤管进行浓缩
0.3和2M
收集洗脱体积处于60~80mL的洗脱液
待用
而后在2~6℃下用3~5K的超滤管进行浓缩
浓缩后即得到从沙蜇刺丝囊毒素中分离溶血毒素蛋白。
一种化合物2,3-二溴-4,5-二羟基苯甲基甲醚的制备方法
专利
OAI收割
专利类型: 发明, 专利号: CN201010261794.9, 申请日期: 2012-03-14, 公开日期: 2012-03-14
韩丽君
;
郭书举
;
袁毅
;
李宪璀
;
李婷
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提交时间:2014/08/04
一种化合物2
2)将上述浸泡液在62?65℃下减压浓缩至干
3)溶解后浸膏中加入等体积的乙酸乙酯入震动摇荡至水相接近无色
4)将上述乙酸乙酯相溶液通过硅胶装柱分离
其中石油醚和乙酸乙酯混合液按体积比为1∶1进行混合
5)将上述溶解液经凝胶柱依次用洗脱液洗脱
3?二溴?4
得到浸膏
萃取分离
并用乙酸乙酯相溶液2?3倍体积的石油醚和乙酸乙酯混合液洗涤
收集洗脱液纯化后即得到化合物2
5?二羟基苯甲基甲醚的制备方法
而后将浸膏中加入其5?10倍体积的水进行溶解
乙酸乙酯相溶液保留待用
收集洗脱液并减压浓缩至干
3?二溴?4
其特征在于:1)将粉碎后原料扇形叉枝藻与85?95%的乙醇按体积比为1∶10?1∶12的比利浸泡24?48小时
浓缩物溶解待用
5?二羟基苯甲基甲醚。
待用
一种查尔霉素化合物的制备方法
专利
OAI收割
专利类型: 发明, 专利号: CN201110080565.1, 申请日期: 2011-10-19, 公开日期: 2011-10-19
丁玲
;
秦松
;
李富超
;
张伟杰
;
哈特穆特·拉赤
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提交时间:2014/08/04
一种查尔霉素化合物的制备方法
其中链霉菌M491保存于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心CGMCC
2)摇床培养:将上述培养的0.5?1.0cm2带有孢子丝的琼脂块接种到200?250ml豆粉液体培养基
3)萃取:将上述发酵液用有机溶剂浸提3?4次
4)纯化:将粗提物经硅胶柱层析
组分4经浓硫酸/茴香醛显色待含棕黄色的条带
其特征在于:按如下步骤操作:1)固体培养:将海洋链霉菌M491接种于M2+固体培养基
保藏编号为:CGMCC?No.2446
在28?35℃温度以110?130rpm的转速下进行摇床培养4?5天后
合并有机相浓缩得粗提物
以1?3L二氯甲烷
再将组分4经硅胶柱层析以二氯甲烷/7%甲醇进行梯度洗脱
在28?30℃下培养直至长出青灰色的孢子
待用
2?4L二氯甲烷/2%甲醇
待以展开剂为二氯甲烷/10%甲醇时Rf=0.22?0.24处
1?3L二氯甲烷/5%甲醇
分离得到式二化合物
1?3L二氯甲烷/10%甲醇梯度进行洗脱
在Rf=0.25?0.27分离得到式三化合物。
流速为8?11mL/min
将所得组分3经浓硫酸/茴香醛显色待含棕黄色的条带
经葡聚糖层析后
在展开剂为二氯甲烷/10%甲醇时Rf=0.50?0.52分离得到式一化合物
一种从霞水母刺丝囊毒素内分离致死毒素蛋白的方法
专利
OAI收割
专利类型: 发明, 专利号: CN201110027667.7, 申请日期: 2011-09-07, 公开日期: 2011-09-07
作者:
于华华
;
邢荣娥
;
李鹏程
;
秦玉坤
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提交时间:2014/08/04
一种从霞水母刺丝囊毒素中分离致死毒素蛋白的方法
2)将上述步骤1)上清液于2~6℃下用缓冲液透析过夜
3)将步骤2)所得上清液过滤
4)将步骤3)得到的上清液用强阴离子交换树脂Mono?Q预装柱纯化分离
其特征在于:1)将霞水母刺丝囊细胞加入预冷缓冲液中破碎
然后低温离心
而后用含Con?A?Sepharose?4B亲和柱进行分离
依次采用pH7.8
破碎后2~6℃离心
收集上清液
分离时采用含有0.1~0.3Mα?甲基?D?甘露糖苷和0.1~0.3MNaCl的pH7.4
浓度为10~30mM的Tris?HCl缓冲液和含1M?NaCl的pH7.8
收集上清液
待用
浓度10~30mM的Tris?HCl缓冲液进行洗脱并收集洗脱液
浓度为10~30mM的Tris?HCl缓冲液进行梯度洗脱
待用
低温离心
流速为0.2~0.5mLmin?1
收集上清液
收集约25~40min洗脱液
待用
即为从霞水母刺丝囊毒素中分离致死毒素蛋白。
一种从霞水母刺丝囊毒素内分离热激蛋白60的方法
专利
OAI收割
专利类型: 发明, 专利号: CN201010596892.8, 申请日期: 2011-08-17, 公开日期: 2011-08-17
作者:
邢荣娥
;
李鹏程
;
于华华
;
秦玉坤
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提交时间:2014/08/04
一种从霞水母刺丝囊毒素中分离热激蛋白60的方法
2)步骤1)所得上清液即为霞水母刺丝囊细胞毒素于2?6℃下对pH7.820mM?Tris?HCl缓冲液透析过夜
3)将步骤2)所得上清液过滤
4)将步骤3)用截留分子量为3kDa的超滤管浓缩的浓缩物用凝胶树脂Superdex75柱纯化分离
其特征在于:1)将从霞水母触手中得到的霞水母刺丝囊细胞加入预冷缓冲液中破碎
然后低温离心
而后将其上含DEAE?SepharoseFast?Flow的阴离子交换树柱进行分离
采用含有浓度为0.15?0.5M的NaCl的pH7.820mM?Tris?HCl缓冲液洗脱
破碎后低温离心
收集上清液
首先采用pH7.820mMTris?HCl缓冲液洗脱
流速为0.2?0.5mLmin?1
收集上清液
待用
而后采用含有浓度分别为0.1?2M不同浓度的NaCl的pH7.820mM?Tris?HCl缓冲液进行梯度洗脱
收集各洗脱峰
待用
收集各洗脱峰
其中流出体积50mL?80mL内的组分即为热激蛋白60。
而后用截留分子量为3kDa的超滤管浓缩
待用
川西獐牙菜和椭圆叶花锚化学成分的高效分离制备研究
学位论文
OAI收割
硕士, 北京: 中国科学院研究生院, 2011
贾静
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提交时间:2012/05/11
川西獐牙菜
椭圆叶花锚
高速逆流色谱
制备液相色谱
化学成分
高效分离纯化方法