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一种从泡叶藻中提取制备低分子岩藻聚糖硫酸酯的方法 专利 OAI收割
专利类型: 发明, 专利号: CN201210424580.8, 申请日期: 2014-05-14, 公开日期: 2014-05-14
韩丽君; 袁毅; 郭书举; 曲桂艳; 刘旭

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一种从泡叶藻中提取制备低分子岩藻聚糖硫酸酯的方法酸浸泡后的泡叶藻固体继续加入其体积3‑6倍的水溶液 2）将上层漂浮物调节至pH5.5‑6.5 将上述依次经稀酸和水浸泡后固态藻体采用纳米高压均质机进行细胞破碎 3）将上述合并液 4）将上述岩藻聚糖硫酸酯粗干品加入其3‑5倍重量的蒸馏水中进行溶解其特征在于：1）将泡叶藻原料于40‑60℃下浸泡提取在泡叶藻原料干藻重量6‑10倍的稀盐酸溶液中1.3‑4.8h 搅拌浸泡4‑7h 在经过滤或高速离心破碎后进行离心分离收集上清液B 过滤液A和上清液B混合均匀后进行超滤去除盐分溶解后通过装有DEAE‑Sepharose F.F.的阴离子交换树脂柱进行洗脱稀酸浸泡液待用收集水浸泡液收集过滤液A 而后超滤浓缩至原料重量的1/2体积（V/W）收集洗脱液透析后于55‑65℃低温浓缩并冷冻干燥获得保留上层漂浮物将稀酸浸泡和水浸泡液合并待用浓缩液进行醇沉淀即得到原藻重量1.5‑2.3％的岩藻聚糖硫酸酯。沉淀物干燥即为岩藻聚糖硫酸酯粗干品

一种测定贝壳体积和质量的方法 专利 OAI收割
专利类型: 发明, 专利号: CN201310612214.X, 申请日期: 2014-02-26, 公开日期: 2014-02-26
作者: 竺奇慧

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一种测定贝壳体积和质量的方法 2）用记号笔在镊子夹物端以上划一条标线 3）将烧杯置于电子天平上 4）用所述镊子夹贝壳伸入液面至步骤2）所划标线处 5）放开镊子 6）根据步骤4）所计算的贝壳体积V和步骤5）记录的贝壳质量M 7）依照步骤4）的方法其特征在于:该方法包括如下步骤：1）准备电子天平镊子伸入液面至步骤2）所划标线处待电子天平稳定后记录读数m0（单位：g）让贝壳沉至烧杯底部计算所述贝壳密度ρ=M/V 在贝解剖前测得贝的整体体积V1 盛有已知密度ρ蒸（单位：g/cm3）的蒸馏水的烧杯打开天平并调零利用该读数m0和ρ蒸计算出贝壳体积V（单位：cm3）镊子的位置保持伸入蒸馏水液面至标线不变以及贝解剖后测得贝的贝壳体积V2 镊子待电子天平稳定后记录读数M（单位：g）即可计算贝的壳腔容积V3=V1?V2。记号笔该读数M即为贝壳重量以及待测的贝壳

一种从扇贝内脏中提取天然牛磺酸的方法 专利 OAI收割
专利类型: 发明, 专利号: CN201310309620.9, 申请日期: 2013-11-27, 公开日期: 2013-11-27
作者: 邢荣娥; 于华华; 李鹏程

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一种从扇贝内脏中提取天然牛磺酸的方法 b)将上述收集的上清液加入活性炭进行脱色处理 c)调节上述收集清液的pH值 d)将上述清液减压浓缩其特征在于：a)以扇贝为原料过滤收集清液而后去除清液中酸性沉淀蛋白质和碱性沉淀蛋白质所得浓缩液经纯化处理即为天然牛磺酸。烘干后用高速粉碎机粉碎待用过滤收集清液粉碎后粉末于蒸馏水中55℃‑80℃ 待用恒温水浴保温1‑3h 过滤收集清液待用

一种从沙蜇刺丝囊毒素内分离溶血毒素蛋白的方法 专利 OAI收割
专利类型: 发明, 专利号: CN201110414952.4, 申请日期: 2012-06-27, 公开日期: 2012-06-27
作者: 于华华; 邢荣娥; 李鹏程; 秦玉坤

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一种从沙蜇刺丝囊毒素中分离溶血毒素蛋白的方法所述洗脱液为含不同浓度NaCl的磷酸缓冲液收集采用含0.2M?NaCl的磷酸缓冲液洗脱下的组分 2)将上述所得洗脱组分经微孔滤膜过滤其特征在于：1)将处理后的沙蜇刺丝囊细胞上清液经微孔滤膜过滤 NaCl浓度分别为0 滤液经凝胶色谱柱Superdex200采用0.15M?NaCl 滤液经含DEAE?Sepharose?Fast?Flow阴离子交换柱 0.1 10～50mM 采用洗脱液以1?3mLmin?1流速进行纯化分离 0.2 pH7.0PBS缓冲液以0.2～1.0mLmin?1流速进行分离纯化收集洗脱液在低温下用3～5K的超滤管进行浓缩 0.3和2M 收集洗脱体积处于60～80mL的洗脱液待用而后在2～6℃下用3～5K的超滤管进行浓缩浓缩后即得到从沙蜇刺丝囊毒素中分离溶血毒素蛋白。

一种化合物2,3-二溴-4,5-二羟基苯甲基甲醚的制备方法 专利 OAI收割
专利类型: 发明, 专利号: CN201010261794.9, 申请日期: 2012-03-14, 公开日期: 2012-03-14
韩丽君; 郭书举; 袁毅; 李宪璀; 李婷

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一种化合物2 2)将上述浸泡液在62?65℃下减压浓缩至干 3)溶解后浸膏中加入等体积的乙酸乙酯入震动摇荡至水相接近无色 4)将上述乙酸乙酯相溶液通过硅胶装柱分离其中石油醚和乙酸乙酯混合液按体积比为1∶1进行混合 5)将上述溶解液经凝胶柱依次用洗脱液洗脱 3?二溴?4 得到浸膏萃取分离并用乙酸乙酯相溶液2?3倍体积的石油醚和乙酸乙酯混合液洗涤收集洗脱液纯化后即得到化合物2 5?二羟基苯甲基甲醚的制备方法而后将浸膏中加入其5?10倍体积的水进行溶解乙酸乙酯相溶液保留待用收集洗脱液并减压浓缩至干 3?二溴?4 其特征在于：1)将粉碎后原料扇形叉枝藻与85?95％的乙醇按体积比为1∶10?1∶12的比利浸泡24?48小时浓缩物溶解待用 5?二羟基苯甲基甲醚。待用

一种大叶藻种子萌发、幼苗培育及海草场恢复方法 专利 OAI收割
专利类型: 发明, 专利号: CN201010172154.0, 申请日期: 2011-11-09, 公开日期: 2011-11-09
作者: 周毅; 杨红生; 刘鹰; 张涛; 刘炳舰

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一种大叶藻种子萌发 40?50天后即在8月下旬将冷藏保存种子的海水温度以每天升温1～2℃的速度从大叶藻种子发芽开始幼苗培育及海草场恢复方法升高到18～20℃ 先后在四个培育阶段可以将大叶藻幼苗栽培到适合大叶藻生长的自然海区中其特征在于：采集整个大叶藻生殖株的种子在18～20℃下持续5?7天形成海草场在普通海水中冷藏待用种子将发芽即实现大叶藻海草场的恢复。待用

一种查尔霉素化合物的制备方法 专利 OAI收割
专利类型: 发明, 专利号: CN201110080565.1, 申请日期: 2011-10-19, 公开日期: 2011-10-19
丁玲; 秦松; 李富超; 张伟杰; 哈特穆特·拉赤

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一种查尔霉素化合物的制备方法其中链霉菌M491保存于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心CGMCC 2)摇床培养：将上述培养的0.5?1.0cm2带有孢子丝的琼脂块接种到200?250ml豆粉液体培养基 3)萃取：将上述发酵液用有机溶剂浸提3?4次 4)纯化：将粗提物经硅胶柱层析组分4经浓硫酸/茴香醛显色待含棕黄色的条带其特征在于：按如下步骤操作：1)固体培养：将海洋链霉菌M491接种于M2+固体培养基保藏编号为：CGMCC?No.2446 在28?35℃温度以110?130rpm的转速下进行摇床培养4?5天后合并有机相浓缩得粗提物以1?3L二氯甲烷再将组分4经硅胶柱层析以二氯甲烷/7％甲醇进行梯度洗脱在28?30℃下培养直至长出青灰色的孢子待用 2?4L二氯甲烷/2％甲醇待以展开剂为二氯甲烷/10％甲醇时Rf＝0.22?0.24处 1?3L二氯甲烷/5％甲醇分离得到式二化合物 1?3L二氯甲烷/10％甲醇梯度进行洗脱在Rf＝0.25?0.27分离得到式三化合物。流速为8?11mL/min 将所得组分3经浓硫酸/茴香醛显色待含棕黄色的条带经葡聚糖层析后在展开剂为二氯甲烷/10％甲醇时Rf＝0.50?0.52分离得到式一化合物

一种从霞水母刺丝囊毒素内分离致死毒素蛋白的方法 专利 OAI收割
专利类型: 发明, 专利号: CN201110027667.7, 申请日期: 2011-09-07, 公开日期: 2011-09-07
作者: 于华华; 邢荣娥; 李鹏程; 秦玉坤

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一种从霞水母刺丝囊毒素中分离致死毒素蛋白的方法 2)将上述步骤1)上清液于2～6℃下用缓冲液透析过夜 3)将步骤2)所得上清液过滤 4)将步骤3)得到的上清液用强阴离子交换树脂Mono?Q预装柱纯化分离其特征在于：1)将霞水母刺丝囊细胞加入预冷缓冲液中破碎然后低温离心而后用含Con?A?Sepharose?4B亲和柱进行分离依次采用pH7.8 破碎后2～6℃离心收集上清液分离时采用含有0.1～0.3Mα?甲基?D?甘露糖苷和0.1～0.3MNaCl的pH7.4 浓度为10～30mM的Tris?HCl缓冲液和含1M?NaCl的pH7.8 收集上清液待用浓度10～30mM的Tris?HCl缓冲液进行洗脱并收集洗脱液浓度为10～30mM的Tris?HCl缓冲液进行梯度洗脱待用低温离心流速为0.2～0.5mLmin?1 收集上清液收集约25～40min洗脱液待用即为从霞水母刺丝囊毒素中分离致死毒素蛋白。

一种提取单个鱼卵仔鱼微量总DNA的简便快速方法 专利 OAI收割
专利类型: 发明, 专利号: CN201110027643.1, 申请日期: 2011-08-24, 公开日期: 2011-08-24
尤锋; 吴志昊; 王伟; 徐冬冬; 张毅; 张培军; 徐永立

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一种提取单个鱼卵仔鱼微量总DNA的简便快速方法 1尾仔鱼/0.05?0.5mL无水乙醇 2)样品中固定液的去除：取步骤1)所得已固定的单个鱼卵或仔鱼样品 3)样品消化：取上述洗涤过的单个鱼卵或仔鱼 4)提取总DNA：将步骤3)消化至澄清的溶液中加入100?300μL?5?6mol/L?NaCl溶液其特征在于：1)样品固定：采集鱼卵或仔鱼加入生理盐水洗涤加入100?300μL?DNA提取缓冲液和10?30μL细胞裂解缓冲液震荡20?30秒。15000g离心30分钟滤去水后立即加入无水乙醇 1000?2000g离心20?60秒去除多余生理盐水使细胞破壁吸取上清液使蛋白质去除而后于?20℃或室温保存备用再用滤纸吸干样品而后将细胞破壁的单个鱼卵或仔鱼加入10?100μg蛋白酶K和10?100μg?RNA酶然后在上清液中加入等体积异丙醇鱼卵或仔鱼与无水乙醇比例为：1mL鱼卵/2?5mL无水乙醇重复2?3次震荡混匀轻轻混匀于50?70℃温育 ?20℃静置1?2小时每10?20分钟颠倒混匀一次 15000g离心15分钟消化至溶液澄清沉淀即得到单个鱼卵仔鱼微量总DNA。待用

一种从霞水母刺丝囊毒素内分离热激蛋白60的方法 专利 OAI收割
专利类型: 发明, 专利号: CN201010596892.8, 申请日期: 2011-08-17, 公开日期: 2011-08-17
作者: 邢荣娥; 李鹏程; 于华华; 秦玉坤

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一种从霞水母刺丝囊毒素中分离热激蛋白60的方法 2)步骤1)所得上清液即为霞水母刺丝囊细胞毒素于2?6℃下对pH7.820mM?Tris?HCl缓冲液透析过夜 3)将步骤2)所得上清液过滤 4)将步骤3)用截留分子量为3kDa的超滤管浓缩的浓缩物用凝胶树脂Superdex75柱纯化分离其特征在于：1)将从霞水母触手中得到的霞水母刺丝囊细胞加入预冷缓冲液中破碎然后低温离心而后将其上含DEAE?SepharoseFast?Flow的阴离子交换树柱进行分离采用含有浓度为0.15?0.5M的NaCl的pH7.820mM?Tris?HCl缓冲液洗脱破碎后低温离心收集上清液首先采用pH7.820mMTris?HCl缓冲液洗脱流速为0.2?0.5mLmin?1 收集上清液待用而后采用含有浓度分别为0.1?2M不同浓度的NaCl的pH7.820mM?Tris?HCl缓冲液进行梯度洗脱收集各洗脱峰待用收集各洗脱峰其中流出体积50mL?80mL内的组分即为热激蛋白60。而后用截留分子量为3kDa的超滤管浓缩待用