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一种提取单个鱼卵仔鱼微量总DNA的简便快速方法 专利  OAI收割
专利类型: 发明, 专利号: CN201110027643.1, 申请日期: 2011-08-24, 公开日期: 2011-08-24
尤锋; 吴志昊; 王伟; 徐冬冬; 张毅; 张培军; 徐永立
收藏  |  浏览/下载:147/0  |  提交时间:2014/08/04
一种提取单个鱼卵仔鱼微量总DNA的简便快速方法  1尾仔鱼/0.05?0.5mL无水乙醇  2)样品中固定液的去除:取步骤1)所得已固定的单个鱼卵或仔鱼样品  3)样品消化:取上述洗涤过的单个鱼卵或仔鱼  4)提取总DNA:将步骤3)消化至澄清的溶液中加入100?300μL?5?6mol/L?NaCl溶液  其特征在于:1)样品固定:采集鱼卵或仔鱼  加入生理盐水洗涤  加入100?300μL?DNA提取缓冲液和10?30μL细胞裂解缓冲液  震荡20?30秒。15000g离心30分钟  滤去水后立即加入无水乙醇  1000?2000g离心20?60秒去除多余生理盐水  使细胞破壁  吸取上清液使蛋白质去除  而后于?20℃或室温保存备用  再用滤纸吸干样品  而后将细胞破壁的单个鱼卵或仔鱼加入10?100μg蛋白酶K和10?100μg?RNA酶  然后在上清液中加入等体积异丙醇  鱼卵或仔鱼与无水乙醇比例为:1mL鱼卵/2?5mL无水乙醇  重复2?3次  震荡混匀  轻轻混匀  于50?70℃温育  ?20℃静置1?2小时  每10?20分钟颠倒混匀一次  15000g离心15分钟  消化至溶液澄清  沉淀即得到单个鱼卵仔鱼微量总DNA。  待用  
微量水对环烷酸腐蚀的影响 期刊论文  OAI收割
腐蚀与防护, 2002, 期号: 12, 页码: 529-531
高延敏,徐永祥,宋祥林,吴勋,孙莲芬
收藏  |  浏览/下载:11/0  |  提交时间:2012/04/12
微量水对环烷腐蚀的影响 期刊论文  OAI收割
腐蚀与防护, 2002, 卷号: 23, 期号: 12, 页码: 529-531
作者:  
高延敏;  徐永祥;  宋祥林;  吴勋;  孙莲芬
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微量水对环烷腐蚀的影响 期刊论文  OAI收割
腐蚀与防护, 2002, 卷号: 23, 期号: 12, 页码: 529-531
作者:  
高延敏;  徐永祥;  宋祥林;  吴勋;  孙莲芬
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