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机构
海洋研究所 [2]
西双版纳热带植物园 [1]
采集方式
OAI收割 [3]
内容类型
期刊论文 [2]
专利 [1]
发表日期
2011 [1]
2008 [1]
1999 [1]
学科主题
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共3条,第1-3条
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一种提取单个鱼卵仔鱼微量总DNA的简便快速方法
专利
OAI收割
专利类型: 发明, 专利号: CN201110027643.1, 申请日期: 2011-08-24, 公开日期: 2011-08-24
尤锋
;
吴志昊
;
王伟
;
徐冬冬
;
张毅
;
张培军
;
徐永立
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提交时间:2014/08/04
一种提取单个鱼卵仔鱼微量总DNA的简便快速方法
1尾仔鱼/0.05?0.5mL无水乙醇
2)样品中固定液的去除:取步骤1)所得已固定的单个鱼卵或仔鱼样品
3)样品消化:取上述洗涤过的单个鱼卵或仔鱼
4)提取总DNA:将步骤3)消化至澄清的溶液中加入100?300μL?5?6mol/L?NaCl溶液
其特征在于:1)样品固定:采集鱼卵或仔鱼
加入生理盐水洗涤
加入100?300μL?DNA提取缓冲液和10?30μL细胞裂解缓冲液
震荡20?30秒。15000g离心30分钟
滤去水后立即加入无水乙醇
1000?2000g离心20?60秒去除多余生理盐水
使细胞破壁
吸取上清液使蛋白质去除
而后于?20℃或室温保存备用
再用滤纸吸干样品
而后将细胞破壁的单个鱼卵或仔鱼加入10?100μg蛋白酶K和10?100μg?RNA酶
然后在上清液中加入等体积异丙醇
鱼卵或仔鱼与无水乙醇比例为:1mL鱼卵/2?5mL无水乙醇
重复2?3次
震荡混匀
轻轻混匀
于50?70℃温育
?20℃静置1?2小时
每10?20分钟颠倒混匀一次
15000g离心15分钟
消化至溶液澄清
沉淀即得到单个鱼卵仔鱼微量总DNA。
待用
4 种榕树总RNA提取方法的比较
期刊论文
OAI收割
云南大学学报( 自然科学版), 2008, 卷号: 30, 期号: 6, 页码: 636-640
作者:
余迪求
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提交时间:2012/04/22
总RNA 提取方法
4 种榕树
改良CTAB 法
Tr izol 法
SDS- LiCl 法
从鱼类胚胎分离总RNA的新方法
期刊论文
OAI收割
海洋科学, 1999, 期号: 3, 页码: 9-10
张均顺
;
徐永立
;
张培军
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浏览/下载:14/0
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提交时间:2013/10/08
鱼类胚胎:8358
总RNA:3666
蛋白酶:1930
孵化酶:1670
聚合酶链式反应:1485
中国科学院:1428
提取方法:1355
焦碳酸二乙酯:1234
海洋研究所:1133
新方法:1130