机构

• 海洋研究所 [2]

采集方式

• OAI收割 [2]

内容类型

• 专利 [2]

发表日期

• 2011 [1]
• 2009 [1]

学科主题

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浏览/检索结果: 共2条，第1-2条 帮助 条数/页： 5101520253035404550556065707580859095100 排序方式： 请选择题名升序题名降序提交时间升序提交时间降序作者升序作者降序发表日期升序发表日期降序 一种提取单个鱼卵仔鱼微量总DNA的简便快速方法 专利  OAI收割 专利类型: 发明, 专利号: CN201110027643.1, 申请日期: 2011-08-24, 公开日期: 2011-08-24 尤锋; 吴志昊; 王伟; 徐冬冬; 张毅; 张培军; 徐永立 收藏  |  浏览/下载：150/0  |  提交时间：2014/08/04 一种提取单个鱼卵仔鱼微量总DNA的简便快速方法  1尾仔鱼/0.05?0.5mL无水乙醇  2)样品中固定液的去除：取步骤1)所得已固定的单个鱼卵或仔鱼样品  3)样品消化：取上述洗涤过的单个鱼卵或仔鱼  4)提取总DNA：将步骤3)消化至澄清的溶液中加入100?300μL?5?6mol/L?NaCl溶液  其特征在于：1)样品固定：采集鱼卵或仔鱼  加入生理盐水洗涤  加入100?300μL?DNA提取缓冲液和10?30μL细胞裂解缓冲液  震荡20?30秒。15000g离心30分钟  滤去水后立即加入无水乙醇  1000?2000g离心20?60秒去除多余生理盐水  使细胞破壁  吸取上清液使蛋白质去除  而后于?20℃或室温保存备用  再用滤纸吸干样品  而后将细胞破壁的单个鱼卵或仔鱼加入10?100μg蛋白酶K和10?100μg?RNA酶  然后在上清液中加入等体积异丙醇  鱼卵或仔鱼与无水乙醇比例为：1mL鱼卵/2?5mL无水乙醇  重复2?3次  震荡混匀  轻轻混匀  于50?70℃温育  ?20℃静置1?2小时  每10?20分钟颠倒混匀一次  15000g离心15分钟  消化至溶液澄清  沉淀即得到单个鱼卵仔鱼微量总DNA。  待用   一种海蜇基因组DNA的提取方法 专利  OAI收割 专利类型: 发明, 专利号: CN200710015295.X, 申请日期: 2009-01-14, 公开日期: 2009-01-14 崔朝霞; 张姝; 栾维莎; 刘媛 收藏  |  浏览/下载：86/0  |  提交时间：2014/08/04 1.一种海蛰基因组DNA提取方法  2)将步骤1)得到的原料内加入3～5ul浓度为20mg/ml的蛋白酶K  3)在步骤2)澄清溶液中加入与其等体积的苯酚  而后向上清液中加入上清液的0.7～1倍体积的异丙醇  其中苯酚  其特征在于：1)将海蜇无性世代的海蛰螅状体用手术剪刀剪碎至无明显颗粒状组织  在55～56℃消化24～26小时至溶液澄清  氯仿和异戊醇的混合溶液混匀  -20～-18℃沉淀10～15分钟  氯仿和异戊醇按体积份数比为25∶24∶1  加入CTAB buffer300～400ul  待用  离心  沉淀后取出  氯仿和异戊醇按体积份数比为24∶1。  待用  吸上清  离心  再加入与上清液等体积的氯仿和异戊醇混合液混匀  弃去液体  离心  并用体积浓度为70％的乙醇  吸上清  离心洗1～2次  将多余液体倒去室温自然凉干  即得到海蛰螅状体的基因组DNA