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一种从泡叶藻中提取制备低分子岩藻聚糖硫酸酯的方法 专利  OAI收割
专利类型: 发明, 专利号: CN201210424580.8, 申请日期: 2014-05-14, 公开日期: 2014-05-14
韩丽君; 袁毅; 郭书举; 曲桂艳; 刘旭
收藏  |  浏览/下载：69/0  |  提交时间：2014/08/04
一种从泡叶藻中提取制备低分子岩藻聚糖硫酸酯的方法  酸浸泡后的泡叶藻固体继续加入其体积3‑6倍的水溶液  2）将上层漂浮物调节至pH5.5‑6.5  将上述依次经稀酸和水浸泡后固态藻体采用纳米高压均质机进行细胞破碎  3）将上述合并液  4）将上述岩藻聚糖硫酸酯粗干品加入其3‑5倍重量的蒸馏水中进行溶解  其特征在于：1）将泡叶藻原料于40‑60℃下浸泡提取在泡叶藻原料干藻重量6‑10倍的稀盐酸溶液中1.3‑4.8h  搅拌浸泡4‑7h  在经过滤或高速离心  破碎后进行离心分离收集上清液B  过滤液A和上清液B混合均匀后进行超滤去除盐分  溶解后通过装有DEAE‑Sepharose F.F.的阴离子交换树脂柱进行洗脱  稀酸浸泡液待用  收集水浸泡液  收集过滤液A  而后超滤浓缩至原料重量的1/2体积（V/W）  收集洗脱液透析后于55‑65℃低温浓缩并冷冻干燥获得  保留上层漂浮物  将稀酸浸泡和水浸泡液合并待用  浓缩液进行醇沉淀  即得到原藻重量1.5‑2.3％的岩藻聚糖硫酸酯。  沉淀物干燥  即为岩藻聚糖硫酸酯粗干品  
一种夏鲆冻精与牙鲆种间杂交人工授精的方法 专利  OAI收割
专利类型: 发明, 专利号: CN201310212970.3, 申请日期: 2013-10-16, 公开日期: 2013-10-16
刘清华; 李军; 徐世宏; 马道远
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一种从水母触手中分离高纯度未释放刺丝囊的方法 专利  OAI收割
专利类型: 发明, 专利号: CN201310140315.1, 申请日期: 2013-08-07, 公开日期: 2013-08-07
作者:  李鹏程;  邢荣娥;  于华华;  秦玉坤
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一种对虾肠道微生物DNA的提取方法 专利  OAI收割
专利类型: 发明, 专利号: CN200910263665.0, 申请日期: 2010-06-23, 公开日期: 2010-06-23
刘淮德; 王雷; 刘梅; 王宝杰; 蒋克勇
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一种对虾肠道微生物DNA的提取方法  2)将洗脱液在200g离心5-10min  沉淀中加0.8-1.2mL?PBS以200g离心取上清菌液  3)将步骤2)所得上清菌液以1200g离心5-10min  4)将步骤3)所得上清菌液中加100-150μLCTAB提取液和10-15μL溶菌酶  而后加15-20μL?20％(W/C)SDS和10-15μL蛋白酶K  5)将水浴后菌液在4℃?3200g离心8-15min  6)将水浴后菌液以3200g离心8-15min  7)将步骤6)所得上清菌液中加上清菌液体积0.6-0.8倍的异丙醇  8)将步骤7)所得沉淀中加入600-800μL?70％预冷乙醇  其特征在于：1)将0.01-0.05g对虾肠道在液氮下研磨  取上清菌液待用  将两次离心所得上清菌液合并  收集上清菌液  放入37℃摇床  60-70℃水浴1-2h  取上清菌液  取上清菌液  而后于-20℃静置1-2h  14000g离心10-15min  并加入0.8-1.2mL?PBS  合并上清液以300g离心5-10min  振荡30-40min  而后加100-150μL?CTAB液和20-25μL?20％SDS混匀后  而后加入与上述上清菌液等体积的酚/氯仿混合液  再以4℃?14000g离心10-15min  所得沉淀即为对虾肠道微生物DNA。  15-25μL?PVPP匀浆和200-300μL?0.5％Tween-80  取上清菌液待用  涡旋  14000g离心10-15min  所得沉淀待用  均匀后吹打洗脱3-5min  60-70℃水浴10-15min  取上清菌液待用