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海洋研究所 [3]
过程工程研究所 [1]
采集方式
OAI收割 [4]
内容类型
专利 [3]
学位论文 [1]
发表日期
2014 [1]
2011 [2]
2005 [1]
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一种在贝类幼虫中定量检测甲状腺激素的方法
专利
OAI收割
专利类型: 发明, 专利号: CN201210545897.7, 申请日期: 2014-01-22, 公开日期: 2014-01-22
作者:
黄雯
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提交时间:2014/08/04
一种在贝类幼虫中定量检测甲状腺激素的方法
2)研磨后进行低温干燥
3)将A部分样品准确称量干重后
4)8000?12000rpm离心5?10min
5)取步骤4)中的上清
即总甲状腺素T4和总3
6)将B部分样品准确称量干重后加入细胞裂解液和PMSF室温放置1h以上
7)将步骤6)中裂解细胞释放蛋白用于检测样品中总蛋白含量
8)将数据整合
其特征在于:该方法包括如下步骤:1)将幼虫样品用液氮研磨法研磨成粉末状
分成AB两部分分别用于以下步骤
按固定比例加入0.01mol/L?NaOH溶液
取上清
用于定量检测甲状腺激素的含量
5
裂解细胞释放蛋白
计算出幼虫中每克蛋白含甲状腺激素x克
2?8℃下充分浸润1h以上提取甲状腺激素
3′?三碘甲腺原氨酸T3
即xg/gprotein。
一种提取单个鱼卵仔鱼微量总DNA的简便快速方法
专利
OAI收割
专利类型: 发明, 专利号: CN201110027643.1, 申请日期: 2011-08-24, 公开日期: 2011-08-24
尤锋
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吴志昊
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王伟
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徐冬冬
;
张毅
;
张培军
;
徐永立
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提交时间:2014/08/04
一种提取单个鱼卵仔鱼微量总DNA的简便快速方法
1尾仔鱼/0.05?0.5mL无水乙醇
2)样品中固定液的去除:取步骤1)所得已固定的单个鱼卵或仔鱼样品
3)样品消化:取上述洗涤过的单个鱼卵或仔鱼
4)提取总DNA:将步骤3)消化至澄清的溶液中加入100?300μL?5?6mol/L?NaCl溶液
其特征在于:1)样品固定:采集鱼卵或仔鱼
加入生理盐水洗涤
加入100?300μL?DNA提取缓冲液和10?30μL细胞裂解缓冲液
震荡20?30秒。15000g离心30分钟
滤去水后立即加入无水乙醇
1000?2000g离心20?60秒去除多余生理盐水
使细胞破壁
吸取上清液使蛋白质去除
而后于?20℃或室温保存备用
再用滤纸吸干样品
而后将细胞破壁的单个鱼卵或仔鱼加入10?100μg蛋白酶K和10?100μg?RNA酶
然后在上清液中加入等体积异丙醇
鱼卵或仔鱼与无水乙醇比例为:1mL鱼卵/2?5mL无水乙醇
重复2?3次
震荡混匀
轻轻混匀
于50?70℃温育
?20℃静置1?2小时
每10?20分钟颠倒混匀一次
15000g离心15分钟
消化至溶液澄清
沉淀即得到单个鱼卵仔鱼微量总DNA。
待用
二苯并噻吩跨膜传递及其强化在红平红球菌LSSE8-1脱硫中的应用
学位论文
OAI收割
硕士: 中国科学院研究生院, 2011
王泽龙
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提交时间:2013/09/24
微生物脱硫
二苯并噻吩
细胞裂解液
ABC转运体
HcuABC
一种现场快速定性鉴定赤潮微藻的方法
专利
OAI收割
专利类型: 发明, 专利号: CN200410020770.9, 申请日期: 2005-12-21, 公开日期: 2005-12-21
王广策
;
张宝玉
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提交时间:2014/08/04
1.一种现场快速定性鉴定赤潮微藻的方法
采用赤潮藻核糖体大亚基rDNA序列和核糖体大小亚基之间的转录单元间隔区ITS作为目的序列
2)探针的标记:按常规方法对所选探针进行标记
3)固定赤潮藻细胞并裂解:离心收集藻细胞
4)杂交:将含有探针的杂交液加到有固定细胞的载玻片上
5)冲洗
其特征在于:1)探针的确定:从已知的赤潮藻目的序列中寻找高度特异的DNA序列作为探针
或以ITS序列设计探针
加固定液MSE固定
进行杂交反应
滴加抗体
或在这些目的片段中寻找高度特异的DNA序列作为探针
将用固定液固定后的赤潮藻细胞固定在载玻片上干燥
干燥后封片
荧光显微镜检测。