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一种在贝类幼虫中定量检测甲状腺激素的方法 专利  OAI收割
专利类型: 发明, 专利号: CN201210545897.7, 申请日期: 2014-01-22, 公开日期: 2014-01-22
作者:  
黄雯
收藏  |  浏览/下载:62/0  |  提交时间:2014/08/04
一种在贝类幼虫中定量检测甲状腺激素的方法  2)研磨后进行低温干燥  3)将A部分样品准确称量干重后  4)8000?12000rpm离心5?10min  5)取步骤4)中的上清  即总甲状腺素T4和总3  6)将B部分样品准确称量干重后加入细胞裂解液和PMSF室温放置1h以上  7)将步骤6)中裂解细胞释放蛋白用于检测样品中总蛋白含量  8)将数据整合  其特征在于:该方法包括如下步骤:1)将幼虫样品用液氮研磨法研磨成粉末状  分成AB两部分分别用于以下步骤  按固定比例加入0.01mol/L?NaOH溶液  取上清  用于定量检测甲状腺激素的含量  5  裂解细胞释放蛋白  计算出幼虫中每克蛋白含甲状腺激素x克  2?8℃下充分浸润1h以上提取甲状腺激素  3′?三碘甲腺原氨酸T3  即xg/gprotein。  
一种提取单个鱼卵仔鱼微量总DNA的简便快速方法 专利  OAI收割
专利类型: 发明, 专利号: CN201110027643.1, 申请日期: 2011-08-24, 公开日期: 2011-08-24
尤锋; 吴志昊; 王伟; 徐冬冬; 张毅; 张培军; 徐永立
收藏  |  浏览/下载:150/0  |  提交时间:2014/08/04
一种提取单个鱼卵仔鱼微量总DNA的简便快速方法  1尾仔鱼/0.05?0.5mL无水乙醇  2)样品中固定液的去除:取步骤1)所得已固定的单个鱼卵或仔鱼样品  3)样品消化:取上述洗涤过的单个鱼卵或仔鱼  4)提取总DNA:将步骤3)消化至澄清的溶液中加入100?300μL?5?6mol/L?NaCl溶液  其特征在于:1)样品固定:采集鱼卵或仔鱼  加入生理盐水洗涤  加入100?300μL?DNA提取缓冲液和10?30μL细胞裂解缓冲液  震荡20?30秒。15000g离心30分钟  滤去水后立即加入无水乙醇  1000?2000g离心20?60秒去除多余生理盐水  使细胞破壁  吸取上清液使蛋白质去除  而后于?20℃或室温保存备用  再用滤纸吸干样品  而后将细胞破壁的单个鱼卵或仔鱼加入10?100μg蛋白酶K和10?100μg?RNA酶  然后在上清液中加入等体积异丙醇  鱼卵或仔鱼与无水乙醇比例为:1mL鱼卵/2?5mL无水乙醇  重复2?3次  震荡混匀  轻轻混匀  于50?70℃温育  ?20℃静置1?2小时  每10?20分钟颠倒混匀一次  15000g离心15分钟  消化至溶液澄清  沉淀即得到单个鱼卵仔鱼微量总DNA。  待用  
二苯并噻吩跨膜传递及其强化在红平红球菌LSSE8-1脱硫中的应用 学位论文  OAI收割
硕士: 中国科学院研究生院, 2011
王泽龙
收藏  |  浏览/下载:32/0  |  提交时间:2013/09/24
一种现场快速定性鉴定赤潮微藻的方法 专利  OAI收割
专利类型: 发明, 专利号: CN200410020770.9, 申请日期: 2005-12-21, 公开日期: 2005-12-21
王广策; 张宝玉
收藏  |  浏览/下载:55/0  |  提交时间:2014/08/04
1.一种现场快速定性鉴定赤潮微藻的方法  采用赤潮藻核糖体大亚基rDNA序列和核糖体大小亚基之间的转录单元间隔区ITS作为目的序列  2)探针的标记:按常规方法对所选探针进行标记  3)固定赤潮藻细胞并裂解:离心收集藻细胞  4)杂交:将含有探针的杂交液加到有固定细胞的载玻片上  5)冲洗  其特征在于:1)探针的确定:从已知的赤潮藻目的序列中寻找高度特异的DNA序列作为探针  或以ITS序列设计探针  加固定液MSE固定  进行杂交反应  滴加抗体  或在这些目的片段中寻找高度特异的DNA序列作为探针  将用固定液固定后的赤潮藻细胞固定在载玻片上干燥  干燥后封片  荧光显微镜检测。