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20SiMn钢在恒定pH值的碳酸盐溶液中的腐蚀行为 期刊论文  OAI收割
金属学报, 2014, 期号: 6, 页码: 674-684
曹凤婷; 魏洁; 董俊华; 柯伟
收藏  |  浏览/下载：29/0  |  提交时间：2015/01/15
一种纯化FITC标记的虾白斑综合症病毒（WSSV）的方法 专利  OAI收割
专利类型: 发明, 专利号: CN201310302179.1, 申请日期: 2013-12-25, 公开日期: 2013-12-25
作者:  谢世筠;  相建海
收藏  |  浏览/下载：90/0  |  提交时间：2014/08/04
一种从沙蜇刺丝囊毒素内分离溶血毒素蛋白的方法 专利  OAI收割
专利类型: 发明, 专利号: CN201110414952.4, 申请日期: 2012-06-27, 公开日期: 2012-06-27
作者:  于华华;  邢荣娥;  李鹏程;  秦玉坤
收藏  |  浏览/下载：41/0  |  提交时间：2014/08/04
一种从沙蜇刺丝囊毒素中分离溶血毒素蛋白的方法  所述洗脱液为含不同浓度NaCl的磷酸缓冲液  收集采用含0.2M?NaCl的磷酸缓冲液洗脱下的组分  2)将上述所得洗脱组分经微孔滤膜过滤  其特征在于：1)将处理后的沙蜇刺丝囊细胞上清液经微孔滤膜过滤  NaCl浓度分别为0  滤液经凝胶色谱柱Superdex200采用0.15M?NaCl  滤液经含DEAE?Sepharose?Fast?Flow阴离子交换柱  0.1  10～50mM  采用洗脱液以1?3mLmin?1流速进行纯化分离  0.2  pH7.0PBS缓冲液以0.2～1.0mLmin?1流速进行分离纯化  收集洗脱液在低温下用3～5K的超滤管进行浓缩  0.3和2M  收集洗脱体积处于60～80mL的洗脱液  待用  而后在2～6℃下用3～5K的超滤管进行浓缩  浓缩后即得到从沙蜇刺丝囊毒素中分离溶血毒素蛋白。  
一种从霞水母刺丝囊毒素内分离致死毒素蛋白的方法 专利  OAI收割
专利类型: 发明, 专利号: CN201110027667.7, 申请日期: 2011-09-07, 公开日期: 2011-09-07
作者:  于华华;  邢荣娥;  李鹏程;  秦玉坤
收藏  |  浏览/下载：34/0  |  提交时间：2014/08/04
一种从霞水母刺丝囊毒素中分离致死毒素蛋白的方法  2)将上述步骤1)上清液于2～6℃下用缓冲液透析过夜  3)将步骤2)所得上清液过滤  4)将步骤3)得到的上清液用强阴离子交换树脂Mono?Q预装柱纯化分离  其特征在于：1)将霞水母刺丝囊细胞加入预冷缓冲液中破碎  然后低温离心  而后用含Con?A?Sepharose?4B亲和柱进行分离  依次采用pH7.8  破碎后2～6℃离心  收集上清液  分离时采用含有0.1～0.3Mα?甲基?D?甘露糖苷和0.1～0.3MNaCl的pH7.4  浓度为10～30mM的Tris?HCl缓冲液和含1M?NaCl的pH7.8  收集上清液  待用  浓度10～30mM的Tris?HCl缓冲液进行洗脱并收集洗脱液  浓度为10～30mM的Tris?HCl缓冲液进行梯度洗脱  待用  低温离心  流速为0.2～0.5mLmin?1  收集上清液  收集约25～40min洗脱液  待用  即为从霞水母刺丝囊毒素中分离致死毒素蛋白。  
一种提取单个鱼卵仔鱼微量总DNA的简便快速方法 专利  OAI收割
专利类型: 发明, 专利号: CN201110027643.1, 申请日期: 2011-08-24, 公开日期: 2011-08-24
尤锋; 吴志昊; 王伟; 徐冬冬; 张毅; 张培军; 徐永立
收藏  |  浏览/下载：150/0  |  提交时间：2014/08/04
一种提取单个鱼卵仔鱼微量总DNA的简便快速方法  1尾仔鱼/0.05?0.5mL无水乙醇  2)样品中固定液的去除：取步骤1)所得已固定的单个鱼卵或仔鱼样品  3)样品消化：取上述洗涤过的单个鱼卵或仔鱼  4)提取总DNA：将步骤3)消化至澄清的溶液中加入100?300μL?5?6mol/L?NaCl溶液  其特征在于：1)样品固定：采集鱼卵或仔鱼  加入生理盐水洗涤  加入100?300μL?DNA提取缓冲液和10?30μL细胞裂解缓冲液  震荡20?30秒。15000g离心30分钟  滤去水后立即加入无水乙醇  1000?2000g离心20?60秒去除多余生理盐水  使细胞破壁  吸取上清液使蛋白质去除  而后于?20℃或室温保存备用  再用滤纸吸干样品  而后将细胞破壁的单个鱼卵或仔鱼加入10?100μg蛋白酶K和10?100μg?RNA酶  然后在上清液中加入等体积异丙醇  鱼卵或仔鱼与无水乙醇比例为：1mL鱼卵/2?5mL无水乙醇  重复2?3次  震荡混匀  轻轻混匀  于50?70℃温育  ?20℃静置1?2小时  每10?20分钟颠倒混匀一次  15000g离心15分钟  消化至溶液澄清  沉淀即得到单个鱼卵仔鱼微量总DNA。  待用  
一种从霞水母刺丝囊毒素内分离热激蛋白60的方法 专利  OAI收割
专利类型: 发明, 专利号: CN201010596892.8, 申请日期: 2011-08-17, 公开日期: 2011-08-17
作者:  邢荣娥;  李鹏程;  于华华;  秦玉坤
收藏  |  浏览/下载：55/0  |  提交时间：2014/08/04
一种从霞水母刺丝囊毒素中分离热激蛋白60的方法  2)步骤1)所得上清液即为霞水母刺丝囊细胞毒素于2?6℃下对pH7.820mM?Tris?HCl缓冲液透析过夜  3)将步骤2)所得上清液过滤  4)将步骤3)用截留分子量为3kDa的超滤管浓缩的浓缩物用凝胶树脂Superdex75柱纯化分离  其特征在于：1)将从霞水母触手中得到的霞水母刺丝囊细胞加入预冷缓冲液中破碎  然后低温离心  而后将其上含DEAE?SepharoseFast?Flow的阴离子交换树柱进行分离  采用含有浓度为0.15?0.5M的NaCl的pH7.820mM?Tris?HCl缓冲液洗脱  破碎后低温离心  收集上清液  首先采用pH7.820mMTris?HCl缓冲液洗脱  流速为0.2?0.5mLmin?1  收集上清液  待用  而后采用含有浓度分别为0.1?2M不同浓度的NaCl的pH7.820mM?Tris?HCl缓冲液进行梯度洗脱  收集各洗脱峰  待用  收集各洗脱峰  其中流出体积50mL?80mL内的组分即为热激蛋白60。  而后用截留分子量为3kDa的超滤管浓缩  待用  
一种用于海水双壳类减数分裂器的免疫荧光显微观察方法 专利  OAI收割
专利类型: 发明, 专利号: CN200810138849.X, 申请日期: 2010-02-03, 公开日期: 2010-02-03
阙华勇; 张国范
收藏  |  浏览/下载：26/0  |  提交时间：2014/08/04
一种简便的转基因大豆检测试剂盒及检测方法 专利  OAI收割
专利类型: 发明, 专利号: CN200810138673.8, 申请日期: 2010-01-27, 公开日期: 2010-01-27
刘梅; 王雷; 陶冉; 王宝杰; 蒋克勇
收藏  |  浏览/下载：46/0  |  提交时间：2014/08/04
液相色谱-电喷雾质谱法测定污水和污泥中壬基酚聚氧乙烯醚的参数优化 期刊论文  OAI收割
环境化学, 2009, 期号: 6, 页码: 904-908
连静; 刘俊新
收藏  |  浏览/下载：16/0  |  提交时间：2012/07/06
一种鳗弧菌快速检测试剂盒及其检测方法 专利  OAI收割
专利类型: 发明, 专利号: CN200810015289.9, 申请日期: 2008-11-19, 公开日期: 2008-11-19
作者:  
收藏  |  浏览/下载：25/0  |  提交时间：2014/08/04