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墨鱼黑色素的酶提优化、结构解析及降血糖和抗病毒活性研究 学位论文  OAI收割
中国科学院海洋研究所: 中国科学院大学, 2024
作者:  
宋雯
  |  收藏  |  浏览/下载:16/0  |  提交时间:2024/06/11
栉孔扇贝G-型溶菌酶基因多态性标记筛选及其辅助育种方法 专利  OAI收割
专利类型: 发明, 专利号: CN200810015048.4, 申请日期: 2008-09-03, 公开日期: 2008-09-03
宋林生; 李凌; 赵建民
收藏  |  浏览/下载:34/0  |  提交时间:2014/08/04
1  2)抗病群体和敏感群体的制备  3)抗病相关G-型溶菌酶基因标记的筛选  4)携带抗病相关基因标记个体的快速筛查。1)栉孔扇贝G-型溶菌酶基因启动区部分序列的克隆:参照分子克隆所述方法从栉孔扇贝闭壳肌中提取总DNA  根据已知的G-型溶菌酶基因序列在其启动子区设计引物  即从不同海区和养殖场收集栉孔扇贝个体  PCR扩增42个敏感个体和40个抗病个体的G-型溶菌酶启动区序列后  其中-754ID和-754II个体在抗病群体和敏感群体中出现的频率无显著差别  一种栉孔扇贝抗病相关G-型溶菌酶基因标记  克隆得到一段762个碱基的DNA序列  用病原菌浸泡感染  针对-754TATCTCGATCAGG插入/缺失(I/D)及-391A/G转换分别选用Taq I和Hap II对PCR产物进行酶切  而-391AA个体在敏感群体中出现的频率显著高于抗病群体  其特征在于它的技术内容包括以下四个方面:1)栉孔扇贝G-型溶菌酶基因启动区部分序列的克隆  连入T载体后进行测序  根据死亡时间判断扇贝对病原菌感染抵抗能力  聚丙烯酰胺凝胶电泳后  -391AG个体在抗病群体中出现的频率显著高于敏感群体。因此  获得其核苷酸序列。2)抗病群体和敏感群体的制备:采用人工感染的方法获得抗病群体和敏感群体  将扇贝分为抗病群体和敏感群体。3)抗病相关G-型溶菌酶基因标记的筛选:对来自5个个体的10个克隆进行了测序  各发现两种基因型  将-391AA作为疾病敏感相关的G-型溶菌酶基因标记  发现了10处多态性位点  -754II  而将-391AG作为抗病相关的G-型溶菌酶基因标记。4)携带抗病相关基因标记个体的快速筛查:取栉孔扇贝个体全血1μl作为模版  -754ID  PCR扩增G-型溶菌酶基因启动区序列  -391AA和-391AG  用Hap II对产物进行酶切  聚丙烯酰胺凝胶电泳分型后  选择-391AG个体作为抗病个体。  
中药提取分离新技术 期刊论文  OAI收割
北方牧业, 2007, 期号: 06, 页码: 8
赵兵
收藏  |  浏览/下载:17/0  |  提交时间:2013/10/17
辣根过氧化物酶的次生代谢调控和反应器技术研究 学位论文  OAI收割
博士: 中国科学院研究生院, 1999
闭静秀
收藏  |  浏览/下载:40/0  |  提交时间:2013/09/27
辣根过氧化物酶(HPR)是广泛应用于临床诊断和微量分析的免疫测定试剂用酶。本文研究了通过组织细胞培养方法生产辣根过氧化物酶次生代谢物调控和生物反应器技术。为大规模植物组织培养生产辣根过氧化物酶提取供工程基础依据。论文研究了:(1)植物生长因子对辣根菜愈伤组织诱导、组织分化和高产系筛选区的影响  同时利用农杆菌基因转导方式,将Ti、Ri质粒基因转入植物细胞中,诱导冠瘿瘤愈伤组织和发根产生,研究化学诱导信号AS和遗传转化过程操作条件对质粒转达化率先的影响。(2)根团的培养工艺及次生代谢产物调控--接种细胞形态、外源蛋白质添加、pH值调控、低温间歇刺激、光敏因素、培养方式等条件调控次生代谢产物合成。(3)分化根培养过程中的营养物质传递探索,研究了高密度根团培养内部的物质传递传质特点以及对生长和次生代谢产物合成影响。(4)植物细胞培养反应器技术,比较了浸没、非浸没式生物反应器在植物组织培中的应用。