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	一种不同乙酰度的N-乙酰化壳六糖的分离纯化方法专利 OAI收割专利类型: 发明, 专利号: CN201310006368.4, 申请日期: 2014-03-05, 公开日期: 2014-03-05 作者: 于华华; 邢荣娥; 李鹏程; 秦玉坤收藏 \| 浏览/下载：27/0 \| 提交时间：2014/08/04 一种不同乙酰度的N?乙酰化壳六糖的分离纯化方法其特征在于：将全脱乙酰化壳六糖进行乙酰化后得到N?乙酰化壳六糖混合物所得N?乙酰化壳六糖混合物溶解后用离子交换色谱柱以含0?2M浓度的NaCl的缓冲溶液在pH3?6 2?5mLmin?1流速下进行分离纯化以糖含量收集含有寡糖的不同组分的洗脱液将不同组分的洗脱液分别经活性碳萃取脱盐后浓缩即得到N?乙酰化壳六糖 N N’?二乙酰化壳六糖 N N’ N”?三乙酰化壳六糖 N N’ N” N”’?四乙酰化壳六糖 N N’ N” N”’ N””?五乙酰化壳六糖 N N’ N” N”’ N”” N””’?六乙酰化壳六糖。
	一种单一聚合度壳寡糖制备方法专利 OAI收割专利类型: 发明, 专利号: CN201210146042.7, 申请日期: 2012-09-05, 公开日期: 2012-09-05 作者: 邢荣娥; 李鹏程; 于华华; 秦玉坤收藏 \| 浏览/下载：123/0 \| 提交时间：2014/08/04 一种单一聚合度壳寡糖的制备方法其特征在于：将全脱乙酰化壳寡糖溶解过滤后用离子交换色谱柱CM?Sephadex?C?25以0?3M浓度的NaCl溶液在2?5mL/min?1的流速下进行分离纯化收集240?360min 360?460min 460?560min 560?640min 640?720min 720?780min 780?840min的洗脱液将所得洗脱液分别经活性碳萃取脱盐后浓缩即得到单一聚合度全脱乙酰化壳寡糖。
	一种提取单个鱼卵仔鱼微量总DNA的简便快速方法专利 OAI收割专利类型: 发明, 专利号: CN201110027643.1, 申请日期: 2011-08-24, 公开日期: 2011-08-24 尤锋; 吴志昊; 王伟; 徐冬冬; 张毅; 张培军; 徐永立收藏 \| 浏览/下载：150/0 \| 提交时间：2014/08/04 一种提取单个鱼卵仔鱼微量总DNA的简便快速方法 1尾仔鱼/0.05?0.5mL无水乙醇 2)样品中固定液的去除：取步骤1)所得已固定的单个鱼卵或仔鱼样品 3)样品消化：取上述洗涤过的单个鱼卵或仔鱼 4)提取总DNA：将步骤3)消化至澄清的溶液中加入100?300μL?5?6mol/L?NaCl溶液其特征在于：1)样品固定：采集鱼卵或仔鱼加入生理盐水洗涤加入100?300μL?DNA提取缓冲液和10?30μL细胞裂解缓冲液震荡20?30秒。15000g离心30分钟滤去水后立即加入无水乙醇 1000?2000g离心20?60秒去除多余生理盐水使细胞破壁吸取上清液使蛋白质去除而后于?20℃或室温保存备用再用滤纸吸干样品而后将细胞破壁的单个鱼卵或仔鱼加入10?100μg蛋白酶K和10?100μg?RNA酶然后在上清液中加入等体积异丙醇鱼卵或仔鱼与无水乙醇比例为：1mL鱼卵/2?5mL无水乙醇重复2?3次震荡混匀轻轻混匀于50?70℃温育 ?20℃静置1?2小时每10?20分钟颠倒混匀一次 15000g离心15分钟消化至溶液澄清沉淀即得到单个鱼卵仔鱼微量总DNA。待用
	一种海蜇基因组DNA的提取方法-1 专利 OAI收割专利类型: 发明, 专利号: CN201010166122.X, 申请日期: 2011-03-23, 公开日期: 2011-03-23 崔朝霞; 张姝; 栾维莎; 刘媛收藏 \| 浏览/下载：30/0 \| 提交时间：2014/08/04 一种海蜇基因组DNA提取方法 2)将保存的蝶状体样品放入离心管中并直接加入buffer300～400ul匀浆 3)将步骤2)中消化后的溶液取出加入6M?NaCl 其特征在于：1)将海蜇有性世代的海蜇碟状体置入体积浓度为95％的酒精中脱水并保存 30～40ul质量浓度为10％的SDS 振荡浑匀20～30S 3～5ul浓度为20mg/ml的蛋白酶K 10000～12000rpm离心20?30分钟封口后55～56℃消化0.8～1.0小时吸上清待用而后加入上清液的0.7～1倍体积的异丙醇 ?20～?18℃沉淀10～15分钟沉淀后取出以10000～12000rpm离心15?20分钟弃去液体并用体积浓度为70％的乙醇离心洗1～2次自然室温凉干即得到海蜇碟状体的DNA。
	一种鲆鲽鱼类受精卵微管骨架免疫荧光染色观察方法专利 OAI收割专利类型: 发明, 专利号: CN200510047579.8, 申请日期: 2007-05-02, 公开日期: 2007-05-02 朱香萍; 尤锋; 张培军; 孙威; 徐永立收藏 \| 浏览/下载：32/0 \| 提交时间：2014/08/04 权利要求书1 ②在解剖镜下挑选出发育状态正常的受精卵 ③在常温下用浓度百分比为1-2％的Triton-100对样品进行打孔处理其中：磷酸盐缓冲液成分为128mM NaCl ④采用改进的间接免疫荧光染色步骤对样品进行染色抚育一抗过夜清洗液为含有155mM NaCl 抗体稀释液含有浓度百分比为10％的山羊血清和5％的二甲亚砜的Tris盐酸缓冲液 ⑤用荧光显微镜或激光扫描共聚焦显微镜进行观察。一种鲆鲽鱼类受精卵微管骨架免疫荧光染色和显微观察方法并用解剖针将胚盘从整个受精卵中剥离出来再在含有80-200mM NaBH4的磷酸盐缓冲液中 2mM KCl 其中：抚育抗体前非特异结合位点不封闭抚育二抗为避光2-4小时 10mM Tris-Cl 其特征在于包括步骤如下：①采用改进的哌嗪-N 室温下抚育6-16小时 8mM NaH2PO4 pH为7.2-7.4的Tris盐酸缓冲液 N’-双2-乙烷磺酸配制的甲醛-戊二醛固定液对样品进行固定 2mMKH2PO4 及诺纳德P-40 受精卵在该固定液中室温下抚育3-6小时 pH 7.2-7.4 其中诺纳德P-40占Tris盐酸缓冲液浓度百分比的0.1-0.2％磷酸吐温缓冲溶液清洗然后在磷酸吐温缓冲溶液中于4℃下保存待用
	NaNO2对20SiMn低合金钢在3％NaCl溶液中空蚀损伤的缓蚀作用期刊论文 OAI收割腐蚀科学与防护技术, 2004, 卷号: 16.0, 期号: 006, 页码: 347-351 作者: 骆素珍; 郑玉贵; 敬和民; 姚治铭; 柯伟 \| 收藏 \| 浏览/下载：7/0 \| 提交时间：2021/02/02 低合金钢自腐蚀电位 3％NaCl溶液空蚀缓蚀作用 NaNO2 电化学阻抗谱损伤中空抑制作用
	20SiMn在蒸馏水和3%NaCl溶液中的空蚀行为期刊论文 OAI收割中国腐蚀与防护学报, 2003, 期号: 4, 页码: 15-19 骆素珍,敬和民,郑玉贵,姚治铭,柯伟收藏 \| 浏览/下载：41/0 \| 提交时间：2012/04/12 空蚀腐蚀因素 20SiMn低合金钢 3%NaCl溶液电化学
	20SiMn在蒸馏水和3％NaCl溶液中的空蚀行为期刊论文 OAI收割中国腐蚀与防护学报, 2003, 卷号: 23.0, 期号: 004, 页码: 206-210 作者: 骆素珍; 敬和民; 郑玉贵; 姚治铭; 柯伟 \| 收藏 \| 浏览/下载：22/0 \| 提交时间：2021/02/02 空蚀腐蚀因素 20siMn低合金钢 3％NaCl溶液电化学
	20SiMn在蒸馏水和3％NaCl溶液中的空蚀行为期刊论文 OAI收割中国腐蚀与防护学报, 2003, 卷号: 23.0, 期号: 004, 页码: 206-210 作者: 骆素珍; 敬和民; 郑玉贵; 姚治铭; 柯伟 \| 收藏 \| 浏览/下载：12/0 \| 提交时间：2021/02/02 空蚀腐蚀因素 20siMn低合金钢 3％NaCl溶液电化学