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机构
海洋研究所 [4]
采集方式
OAI收割 [4]
内容类型
专利 [4]
发表日期
2014 [2]
2010 [1]
2006 [1]
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共4条,第1-4条
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一种从泡叶藻中提取制备低分子岩藻聚糖硫酸酯的方法
专利
OAI收割
专利类型: 发明, 专利号: CN201210424580.8, 申请日期: 2014-05-14, 公开日期: 2014-05-14
韩丽君
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袁毅
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郭书举
;
曲桂艳
;
刘旭
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浏览/下载:69/0
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提交时间:2014/08/04
一种从泡叶藻中提取制备低分子岩藻聚糖硫酸酯的方法
酸浸泡后的泡叶藻固体继续加入其体积3‑6倍的水溶液
2)将上层漂浮物调节至pH5.5‑6.5
将上述依次经稀酸和水浸泡后固态藻体采用纳米高压均质机进行细胞破碎
3)将上述合并液
4)将上述岩藻聚糖硫酸酯粗干品加入其3‑5倍重量的蒸馏水中进行溶解
其特征在于:1)将泡叶藻原料于40‑60℃下浸泡提取在泡叶藻原料干藻重量6‑10倍的稀盐酸溶液中1.3‑4.8h
搅拌浸泡4‑7h
在经过滤或高速离心
破碎后进行离心分离收集上清液B
过滤液A和上清液B混合均匀后进行超滤去除盐分
溶解后通过装有DEAE‑Sepharose F.F.的阴离子交换树脂柱进行洗脱
稀酸浸泡液待用
收集水浸泡液
收集过滤液A
而后超滤浓缩至原料重量的1/2体积(V/W)
收集洗脱液透析后于55‑65℃低温浓缩并冷冻干燥获得
保留上层漂浮物
将稀酸浸泡和水浸泡液合并待用
浓缩液进行醇沉淀
即得到原藻重量1.5‑2.3%的岩藻聚糖硫酸酯。
沉淀物干燥
即为岩藻聚糖硫酸酯粗干品
一种在贝类幼虫中定量检测甲状腺激素的方法
专利
OAI收割
专利类型: 发明, 专利号: CN201210545897.7, 申请日期: 2014-01-22, 公开日期: 2014-01-22
作者:
黄雯
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浏览/下载:62/0
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提交时间:2014/08/04
一种在贝类幼虫中定量检测甲状腺激素的方法
2)研磨后进行低温干燥
3)将A部分样品准确称量干重后
4)8000?12000rpm离心5?10min
5)取步骤4)中的上清
即总甲状腺素T4和总3
6)将B部分样品准确称量干重后加入细胞裂解液和PMSF室温放置1h以上
7)将步骤6)中裂解细胞释放蛋白用于检测样品中总蛋白含量
8)将数据整合
其特征在于:该方法包括如下步骤:1)将幼虫样品用液氮研磨法研磨成粉末状
分成AB两部分分别用于以下步骤
按固定比例加入0.01mol/L?NaOH溶液
取上清
用于定量检测甲状腺激素的含量
5
裂解细胞释放蛋白
计算出幼虫中每克蛋白含甲状腺激素x克
2?8℃下充分浸润1h以上提取甲状腺激素
3′?三碘甲腺原氨酸T3
即xg/gprotein。
一种对虾肠道微生物DNA的提取方法
专利
OAI收割
专利类型: 发明, 专利号: CN200910263665.0, 申请日期: 2010-06-23, 公开日期: 2010-06-23
刘淮德
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王雷
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刘梅
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王宝杰
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蒋克勇
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提交时间:2014/08/04
一种对虾肠道微生物DNA的提取方法
2)将洗脱液在200g离心5-10min
沉淀中加0.8-1.2mL?PBS以200g离心取上清菌液
3)将步骤2)所得上清菌液以1200g离心5-10min
4)将步骤3)所得上清菌液中加100-150μLCTAB提取液和10-15μL溶菌酶
而后加15-20μL?20%(W/C)SDS和10-15μL蛋白酶K
5)将水浴后菌液在4℃?3200g离心8-15min
6)将水浴后菌液以3200g离心8-15min
7)将步骤6)所得上清菌液中加上清菌液体积0.6-0.8倍的异丙醇
8)将步骤7)所得沉淀中加入600-800μL?70%预冷乙醇
其特征在于:1)将0.01-0.05g对虾肠道在液氮下研磨
取上清菌液待用
将两次离心所得上清菌液合并
收集上清菌液
放入37℃摇床
60-70℃水浴1-2h
取上清菌液
取上清菌液
而后于-20℃静置1-2h
14000g离心10-15min
并加入0.8-1.2mL?PBS
合并上清液以300g离心5-10min
振荡30-40min
而后加100-150μL?CTAB液和20-25μL?20%SDS混匀后
而后加入与上述上清菌液等体积的酚/氯仿混合液
再以4℃?14000g离心10-15min
所得沉淀即为对虾肠道微生物DNA。
15-25μL?PVPP匀浆和200-300μL?0.5%Tween-80
取上清菌液待用
涡旋
14000g离心10-15min
所得沉淀待用
均匀后吹打洗脱3-5min
60-70℃水浴10-15min
取上清菌液待用
一种制备海带孢子体大分子量DNA的方法
专利
OAI收割
专利类型: 发明, 专利号: CN200410011416.X, 申请日期: 2006-07-12, 公开日期: 2006-07-12
段德麟
;
王高歌
;
胡自民
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浏览/下载:35/0
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提交时间:2014/08/04
1.一种制备海带孢子体大分子量DNA的方法
2)将上述材料置于液氮中
3)将藻粉转入SDS提取缓冲液中
4)加入KAc溶液
5)离心
6)离心
7)离心
其特征在于:可按如下步骤操作
迅速研成粉末
63~65℃保温30min
混合均匀
取上清
水相用异丙醇于-18~-20℃沉淀
乙醇洗沉淀
1)取海带孢子体在清水中清洗后
第二次去多糖
加入氯仿:异戊醇抽提
稍干后溶于TE中
放入去多糖溶液中冲洗
加入RNase
以去除海带孢子体表面的多糖
得产品。