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噬菌体基因组DNA快速提取方法
期刊论文
OAI收割
热带生物学报, 2017, 卷号: 8, 期号: 02, 页码: 232-235
作者:
刘秋婷
;
田雨顺
;
云龙
;
罗鹏
;
胡超群
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浏览/下载:119/0
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提交时间:2018/09/07
噬菌体基因组DNA
快速提取方法
核酸降解
噬菌体粒子沉淀
几种砂生槐叶片DNA提取方法的比较
中文期刊论文
OAI收割
2016
作者:
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浏览/下载:33/0
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提交时间:2016/12/27
砂生槐
DNA提取方法
RAPD检测
白草种子基因组DNA五种提取方法的比较
中文期刊论文
OAI收割
2016
作者:
郝豆豆
;
田志华
;
雷鸣
;
武俊喜
;
拉多
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浏览/下载:38/0
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提交时间:2016/12/27
白草
基因组DNA
DNA提取方法
高盐低pH法
几种砂生槐叶片DNA提取方法的比较
中文期刊论文
OAI收割
2016
作者:
郝豆豆
;
石梦菲
;
雷鸣
;
武俊喜
;
张勇群
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浏览/下载:26/0
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提交时间:2017/11/07
砂生槐
DNA提取方法
RAPD检测
白草种子基因组DNA五种提取方法的比较
中文期刊论文
OAI收割
2016
作者:
郝豆豆
;
田志华
;
雷鸣
;
武俊喜
;
拉多
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浏览/下载:118/0
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提交时间:2017/11/07
白草
基因组DNA
DNA提取方法
高盐低pH法
一种改良的植物基因组DNA通用提取方法
期刊论文
OAI收割
植物分类与资源学报, 2014, 期号: 3, 页码: 375-380
陈林杨
;
宋敏舒
;
查红光
;
李志敏
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提交时间:2015/01/20
植物基因组DNA
通用DNA提取方法
植物材料
一种适用于文蛤家系鉴定的微卫星标记方法
专利
OAI收割
专利类型: 发明, 专利号: CN201210112325.X, 申请日期: 2012-10-10, 公开日期: 2012-10-10
作者:
刘保忠
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提交时间:2014/08/04
一种适用于文蛤家系鉴定的微卫星标记方法
2)引物设计:在微卫星重复的侧翼序列利用软件Primer?Premier?5.0设计引物
GC含量为40%?60%
退火温度为45?65℃
预期PCR产物长度为100?400bp
3)引物优化:根据不同引物的Tm值进行温度梯度优化
4)微卫星标记家系鉴定体系的确立:微卫星位点的多态性水平可用信息含量值(PIC)衡量
包括微卫星位点来源
引物设计条件为:引物长度为19?25mer
在Tm值上下各10℃
根据上述优化获得的Ta值
引物设计
温度梯度优化扩增得到的PCR产物用8%非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳?EB染色系统进行检测
选取多个体作为群体进行计算微卫星位点的多态性水平可用信息含量值(PIC)进而衡量多态性信息
引物优化和微卫星标记家系鉴定体系
选取杂带较少
根据PIC值
其特征在于:1)微卫星位点的来源:提取文蛤的基因组DNA利用提取的DNA
特异性产物亮度较高的PCR反应对应的温度为该引物的最佳退火温度Ta
PIC小于0.25的标记
采用限制性内切酶法获得文蛤基因组DNA片段
筛选得到重复性好
并构建微卫星磁珠富集文库
稳定性好
检测阳性克隆
PIC值大于0.25的位点
经测序得到含有微卫星重复的DNA序列
作为文蛤微卫星标记家系鉴定体系
用于文蛤的家系区分与个体识别。
一种提取单个鱼卵仔鱼微量总DNA的简便快速方法
专利
OAI收割
专利类型: 发明, 专利号: CN201110027643.1, 申请日期: 2011-08-24, 公开日期: 2011-08-24
尤锋
;
吴志昊
;
王伟
;
徐冬冬
;
张毅
;
张培军
;
徐永立
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浏览/下载:147/0
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提交时间:2014/08/04
一种提取单个鱼卵仔鱼微量总DNA的简便快速方法
1尾仔鱼/0.05?0.5mL无水乙醇
2)样品中固定液的去除:取步骤1)所得已固定的单个鱼卵或仔鱼样品
3)样品消化:取上述洗涤过的单个鱼卵或仔鱼
4)提取总DNA:将步骤3)消化至澄清的溶液中加入100?300μL?5?6mol/L?NaCl溶液
其特征在于:1)样品固定:采集鱼卵或仔鱼
加入生理盐水洗涤
加入100?300μL?DNA提取缓冲液和10?30μL细胞裂解缓冲液
震荡20?30秒。15000g离心30分钟
滤去水后立即加入无水乙醇
1000?2000g离心20?60秒去除多余生理盐水
使细胞破壁
吸取上清液使蛋白质去除
而后于?20℃或室温保存备用
再用滤纸吸干样品
而后将细胞破壁的单个鱼卵或仔鱼加入10?100μg蛋白酶K和10?100μg?RNA酶
然后在上清液中加入等体积异丙醇
鱼卵或仔鱼与无水乙醇比例为:1mL鱼卵/2?5mL无水乙醇
重复2?3次
震荡混匀
轻轻混匀
于50?70℃温育
?20℃静置1?2小时
每10?20分钟颠倒混匀一次
15000g离心15分钟
消化至溶液澄清
沉淀即得到单个鱼卵仔鱼微量总DNA。
待用
一种海蜇基因组DNA的提取方法-1
专利
OAI收割
专利类型: 发明, 专利号: CN201010166122.X, 申请日期: 2011-03-23, 公开日期: 2011-03-23
崔朝霞
;
张姝
;
栾维莎
;
刘媛
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浏览/下载:29/0
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提交时间:2014/08/04
一种海蜇基因组DNA提取方法
2)将保存的蝶状体样品放入离心管中并直接加入buffer300~400ul匀浆
3)将步骤2)中消化后的溶液取出加入6M?NaCl
其特征在于:1)将海蜇有性世代的海蜇碟状体置入体积浓度为95%的酒精中脱水并保存
30~40ul质量浓度为10%的SDS
振荡浑匀20~30S
3~5ul浓度为20mg/ml的蛋白酶K
10000~12000rpm离心20?30分钟
封口后55~56℃消化0.8~1.0小时
吸上清
待用
而后加入上清液的0.7~1倍体积的异丙醇
?20~?18℃沉淀10~15分钟
沉淀后取出
以10000~12000rpm离心15?20分钟
弃去液体
并用体积浓度为70%的乙醇
离心洗1~2次
自然室温凉干
即得到海蜇碟状体的DNA。
红豆杉属植物三种不同总DNA提取方法的分析比较
期刊论文
OAI收割
广西植物, 2011, 卷号: 31, 期号: 2, 页码: 244-249159
刘杰
;
高连明
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浏览/下载:18/0
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提交时间:2012/05/15
红豆杉属
DNA提取方法
PCR扩增