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Method for evaluating global transportation accessibility index based on raster data on large scale 专利  OAI收割
专利号: AU2020103178, 申请日期: 2021-01-14, 公开日期: 2021-01-14
作者:  
FENG,ZHIMING;  SHI,HUI;  YANG,Yanzhao;  YOU,ZHEN
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一种提取单个鱼卵仔鱼微量总DNA的简便快速方法 专利  OAI收割
专利类型: 发明, 专利号: CN201110027643.1, 申请日期: 2011-08-24, 公开日期: 2011-08-24
尤锋; 吴志昊; 王伟; 徐冬冬; 张毅; 张培军; 徐永立
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一种提取单个鱼卵仔鱼微量总DNA的简便快速方法  1尾仔鱼/0.05?0.5mL无水乙醇  2)样品中固定液的去除:取步骤1)所得已固定的单个鱼卵或仔鱼样品  3)样品消化:取上述洗涤过的单个鱼卵或仔鱼  4)提取总DNA:将步骤3)消化至澄清的溶液中加入100?300μL?5?6mol/L?NaCl溶液  其特征在于:1)样品固定:采集鱼卵或仔鱼  加入生理盐水洗涤  加入100?300μL?DNA提取缓冲液和10?30μL细胞裂解缓冲液  震荡20?30秒。15000g离心30分钟  滤去水后立即加入无水乙醇  1000?2000g离心20?60秒去除多余生理盐水  使细胞破壁  吸取上清液使蛋白质去除  而后于?20℃或室温保存备用  再用滤纸吸干样品  而后将细胞破壁的单个鱼卵或仔鱼加入10?100μg蛋白酶K和10?100μg?RNA酶  然后在上清液中加入等体积异丙醇  鱼卵或仔鱼与无水乙醇比例为:1mL鱼卵/2?5mL无水乙醇  重复2?3次  震荡混匀  轻轻混匀  于50?70℃温育  ?20℃静置1?2小时  每10?20分钟颠倒混匀一次  15000g离心15分钟  消化至溶液澄清  沉淀即得到单个鱼卵仔鱼微量总DNA。  待用  
一种海水中亚铁、三价铁及总铁含量的测定方法 专利  OAI收割
专利类型: 发明, 专利号: CN201010110284.1, 申请日期: 2010-07-21, 公开日期: 2010-07-21
吴志昊; 尤锋; 马得友; 徐冬冬; 张培军; 徐永立
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一种海水中亚铁  ②向步骤①所得经酸化的水样中加入1-2mol/L氢氧化钠溶液   Fe ( II ) l&alpha  ③向1-5mL空白对照溶液   - A 2 &epsiv  其中   Fe ( III ) l &epsiv  已知浓度的标准溶液配制方法为   Fe ( II ) l&alpha  ④在562nm波长下   ( &epsiv  ⑤取0.8-4mL测定吸光度后的空白对照溶液   Fe ( II ) l - &epsiv  室温静置5-10min后   Fe ( III ) l ) C Fe ( III ) = A 2 - A 1 &alpha  ⑥在562nm波长下   &alpha  ⑦重复步骤⑤   ( &epsiv  在562nm波长下   Fe ( II ) l - &epsiv  ⑧亚铁   Fe ( III ) l ) CFe(t)=CFe(II)+CFe(III)其中   C Fe ( II ) = A 1 &epsiv  三价铁及总铁含量的测定方法  氢氧化钠溶液与水样的体积比为1∶(20-100)  已知浓度的标准溶液及待测水样中分别加入100-500μL用0.05-0.2mol/L乙酸铵水溶液配制的0.01-0.05mol/L菲咯嗪一钠盐溶液显色  空白对照溶液配制方法为  取pH已经调至4-6的空白对照溶液  先将空白对照溶液的吸光度设置为零后  标准溶液及待测水样  再加入50-250μL用氨水配制的pH为9-10的10mol/L乙酸铵水溶液混匀  先将空白对照溶液的吸光度设置为零后  先将空白对照溶液的吸光度设置为零后  三价铁和总铁浓度计算  l为比色皿的光径。  其特征在于  使水样pH在4-6之间  先配制与待测水样初始盐度一致的氯化钠水溶液  加入FeCl3使其总铁浓度为0.1-1mg/L  测定标准溶液及待测水样的吸光度A1样  加入150-750μL用1-3mol/L盐酸配制的1-2mol/L的盐酸羟胺溶液混匀  测定标准溶液及待测水样的吸光度A2样  测定标准溶液的吸光度A3标  通过标准溶液的总铁浓度及其测定的3次吸光度先根据下述公式计算出亚铁和三价铁的吸光系数εFe(II)  具体步骤如下:①采集10-100mL水样  作为待测水样  再加入1-2mol/L盐酸使其pH在4-6之间  A1标  A2标  εFe(III)以及α  立即加入1-2mol/L盐酸  α=A3/A2  盐酸与水样的体积比为1∶(20-100)  以此再结合水样测定的2次吸光度利用下述公式计算出海水水样中亚铁CFe(II)  使水样pH至1-2  三价铁CFe(III)及总铁CFe(t)浓度  作为酸化水样  密封  室温下备用  
一种牙鲆仔稚幼鱼性激素水平测定的样品制备方法 专利  OAI收割
专利号: ZL200710015287.5, 申请日期: 2010-06-23, 公开日期: 2011-07-15
作者:  
孙鹏;  尤锋;  杨奔;  张培军;  徐永立
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一种牙鲆受精卵第一次卵裂抑制的方法 专利  OAI收割
专利号: ZL200410050312.X, 申请日期: 2008-04-23, 公开日期: 2011-07-15
作者:  
尤锋;  张培军;  王新成;  许建和
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一种海水鲆鲽鱼类受精卵的组织切片方法 专利  OAI收割
专利号: ZL200410050434.9, 申请日期: 2007-12-05, 公开日期: 2011-07-15
作者:  
孙威;  尤锋;  张培军;  徐永立
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一种大黄鱼精子遗传物质完全失活的方法 专利  OAI收割
专利类型: 发明, 专利号: CN200510136709.5, 申请日期: 2007-07-04, 公开日期: 2007-07-04
许建和; 尤锋; 张培军; 吴雄飞; 徐永立; 蒋宏雷
收藏  |  浏览/下载:24/0  |  提交时间:2014/08/04
权利要求书1  ②精液稀释:采用预冷的稀释液稀释所述大黄鱼成熟精液  其中:按重量体积百分比计所述预冷的稀释液成份为NaCl 0.60~0.80%  pH  稀释液预冷到0~5℃  ③精子遗传物质失活:紫外光源预热5~10min后  其中:紫外光源的照射剂量为1800~6000erg/mm2。  一种大黄鱼精子遗传物质完全灭活的方法  稀释倍数为20~100倍  KCl 0.03~0.05%  7.0~7.3  将带有稀释后的大黄鱼成熟精液的培养皿置于紫外光源下  包括:精液保存  然后将稀释后的大黄鱼成熟精液放入已预冷到0~5℃的培养皿中  CaCl2  照射1.5~5min  精液稀释  其培养皿中稀释后的大黄鱼成熟精液液体厚度为0.1~0.3cm  0.01~0.03%  使得大黄鱼遗传物质失活  精子遗传物质失活  葡萄糖0.05~0.10%  其特征在于:①精液保存:将人工挤出的未激活的大黄鱼成熟精液避光保存于2~4℃低温条件下备用  
一种鲆鲽鱼类受精卵微管骨架免疫荧光染色观察方法 专利  OAI收割
专利类型: 发明, 专利号: CN200510047579.8, 申请日期: 2007-05-02, 公开日期: 2007-05-02
朱香萍; 尤锋; 张培军; 孙威; 徐永立
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权利要求书1  ②在解剖镜下挑选出发育状态正常的受精卵  ③在常温下用浓度百分比为1-2%的Triton-100对样品进行打孔处理  其中:磷酸盐缓冲液成分为128mM NaCl  ④采用改进的间接免疫荧光染色步骤对样品进行染色  抚育一抗过夜  清洗液为含有155mM NaCl  抗体稀释液含有浓度百分比为10%的山羊血清和5%的二甲亚砜的Tris盐酸缓冲液  ⑤用荧光显微镜或激光扫描共聚焦显微镜进行观察。  一种鲆鲽鱼类受精卵微管骨架免疫荧光染色和显微观察方法  并用解剖针将胚盘从整个受精卵中剥离出来  再在含有80-200mM NaBH4的磷酸盐缓冲液中  2mM KCl  其中:抚育抗体前非特异结合位点不封闭  抚育二抗为避光2-4小时  10mM Tris-Cl  其特征在于包括步骤如下:①采用改进的哌嗪-N  室温下抚育6-16小时  8mM NaH2PO4  pH为7.2-7.4的Tris盐酸缓冲液  N’-双2-乙烷磺酸配制的甲醛-戊二醛固定液对样品进行固定  2mMKH2PO4  及诺纳德P-40  受精卵在该固定液中室温下抚育3-6小时  pH 7.2-7.4  其中诺纳德P-40占Tris盐酸缓冲液浓度百分比的0.1-0.2%  磷酸吐温缓冲溶液清洗  然后在磷酸吐温缓冲溶液中于4℃下保存  待用  
Green diode laser 专利  OAI收割
专利号: US20050163176A1, 申请日期: 2005-07-28, 公开日期: 2005-07-28
作者:  
YOU, LI-NING;  ZHANG, WEN-ZHAO;  ZHENG, XIAN-WEN;  XU, WEN-HU;  XU, ZHENG-HUA
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Green diode laser 专利  OAI收割
专利号: US20050163176A1, 申请日期: 2005-07-28, 公开日期: 2005-07-28
作者:  
YOU, LI-NING;  ZHANG, WEN-ZHAO;  ZHENG, XIAN-WEN;  XU, WEN-HU;  XU, ZHENG-HUA
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