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海洋研究所 [1]
生态环境研究中心 [1]
采集方式
OAI收割 [2]
内容类型
专利 [1]
期刊论文 [1]
发表日期
2022 [1]
2010 [1]
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共2条,第1-2条
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混合菌系QZ-10对原油的作用性能表征及现场清防蜡应用
期刊论文
OAI收割
微生物学通报, 2022, 卷号: 49, 期号: 3, 页码: 1057-1066
作者:
魏晓霞
;
尹珺
;
纪淑玲
;
程涛
;
马莎莎
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提交时间:2022/12/15
微生物混合菌液
微生物清防蜡
油井清防蜡
重质烃降解
一种对虾肠道微生物DNA的提取方法
专利
OAI收割
专利类型: 发明, 专利号: CN200910263665.0, 申请日期: 2010-06-23, 公开日期: 2010-06-23
刘淮德
;
王雷
;
刘梅
;
王宝杰
;
蒋克勇
收藏
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提交时间:2014/08/04
一种对虾肠道微生物DNA的提取方法
2)将洗脱液在200g离心5-10min
沉淀中加0.8-1.2mL?PBS以200g离心取上清菌液
3)将步骤2)所得上清菌液以1200g离心5-10min
4)将步骤3)所得上清菌液中加100-150μLCTAB提取液和10-15μL溶菌酶
而后加15-20μL?20%(W/C)SDS和10-15μL蛋白酶K
5)将水浴后菌液在4℃?3200g离心8-15min
6)将水浴后菌液以3200g离心8-15min
7)将步骤6)所得上清菌液中加上清菌液体积0.6-0.8倍的异丙醇
8)将步骤7)所得沉淀中加入600-800μL?70%预冷乙醇
其特征在于:1)将0.01-0.05g对虾肠道在液氮下研磨
取上清菌液待用
将两次离心所得上清菌液合并
收集上清菌液
放入37℃摇床
60-70℃水浴1-2h
取上清菌液
取上清菌液
而后于-20℃静置1-2h
14000g离心10-15min
并加入0.8-1.2mL?PBS
合并上清液以300g离心5-10min
振荡30-40min
而后加100-150μL?CTAB液和20-25μL?20%SDS混匀后
而后加入与上述上清菌液等体积的酚/氯仿混合液
再以4℃?14000g离心10-15min
所得沉淀即为对虾肠道微生物DNA。
15-25μL?PVPP匀浆和200-300μL?0.5%Tween-80
取上清菌液待用
涡旋
14000g离心10-15min
所得沉淀待用
均匀后吹打洗脱3-5min
60-70℃水浴10-15min
取上清菌液待用