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CERN分布式土壤样品长期保存系统的构建
CNKI期刊论文
OAI收割
2022
作者:
郭志英
;
潘恺
;
宋歌
;
王昌昆
;
施建平
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浏览/下载:55/0
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提交时间:2022/10/11
土壤保存
土壤样品管理
土壤样品编码
保存条件
土壤长期监测
保存过程对土壤生化指标的影响及保存土样的应用
期刊论文
OAI收割
土壤学报, 2018, 卷号: 55, 期号: 04, 页码: 783-796
作者:
陈雅涵
;
谢宗强
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浏览/下载:25/0
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提交时间:2022/04/26
土壤样品库
保存条件
土壤化学
土壤微生物
土壤酶
华南植物园锥栗F-MSAP采样策略及遗传多样性分析
期刊论文
OAI收割
广西植物, 2017, 卷号: 37, 期号: 01, 页码: 15-21+8
作者:
刘孟
;
欧阳学军
;
陈洁
;
全慧敏
;
叶万辉
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提交时间:2020/12/15
锥栗
甲基化
F-MSAP
引物筛选
样品保存
样品保存条件对土壤与植物全碳全氮含量的影响
期刊论文
OAI收割
植物生态学报, 2017, 卷号: 41, 期号: 06, 页码: 632-638
作者:
陈雅涵
;
谢宗强
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浏览/下载:49/0
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提交时间:2022/05/10
碳质量分数
氮质量分数
样品粒径
保存时间
长时间序列
MSAP在锥栗种群生态学研究中的方法学探讨
学位论文
OAI收割
北京: 中国科学院大学, 2016
作者:
刘孟
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浏览/下载:21/0
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提交时间:2018/12/23
锥栗
MSAP
引物筛选
样品保存
环境
一种提取单个鱼卵仔鱼微量总DNA的简便快速方法
专利
OAI收割
专利类型: 发明, 专利号: CN201110027643.1, 申请日期: 2011-08-24, 公开日期: 2011-08-24
尤锋
;
吴志昊
;
王伟
;
徐冬冬
;
张毅
;
张培军
;
徐永立
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提交时间:2014/08/04
一种提取单个鱼卵仔鱼微量总DNA的简便快速方法
1尾仔鱼/0.05?0.5mL无水乙醇
2)样品中固定液的去除:取步骤1)所得已固定的单个鱼卵或仔鱼样品
3)样品消化:取上述洗涤过的单个鱼卵或仔鱼
4)提取总DNA:将步骤3)消化至澄清的溶液中加入100?300μL?5?6mol/L?NaCl溶液
其特征在于:1)样品固定:采集鱼卵或仔鱼
加入生理盐水洗涤
加入100?300μL?DNA提取缓冲液和10?30μL细胞裂解缓冲液
震荡20?30秒。15000g离心30分钟
滤去水后立即加入无水乙醇
1000?2000g离心20?60秒去除多余生理盐水
使细胞破壁
吸取上清液使蛋白质去除
而后于?20℃或室温保存备用
再用滤纸吸干样品
而后将细胞破壁的单个鱼卵或仔鱼加入10?100μg蛋白酶K和10?100μg?RNA酶
然后在上清液中加入等体积异丙醇
鱼卵或仔鱼与无水乙醇比例为:1mL鱼卵/2?5mL无水乙醇
重复2?3次
震荡混匀
轻轻混匀
于50?70℃温育
?20℃静置1?2小时
每10?20分钟颠倒混匀一次
15000g离心15分钟
消化至溶液澄清
沉淀即得到单个鱼卵仔鱼微量总DNA。
待用
一种海蜇基因组DNA的提取方法-1
专利
OAI收割
专利类型: 发明, 专利号: CN201010166122.X, 申请日期: 2011-03-23, 公开日期: 2011-03-23
崔朝霞
;
张姝
;
栾维莎
;
刘媛
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提交时间:2014/08/04
一种海蜇基因组DNA提取方法
2)将保存的蝶状体样品放入离心管中并直接加入buffer300~400ul匀浆
3)将步骤2)中消化后的溶液取出加入6M?NaCl
其特征在于:1)将海蜇有性世代的海蜇碟状体置入体积浓度为95%的酒精中脱水并保存
30~40ul质量浓度为10%的SDS
振荡浑匀20~30S
3~5ul浓度为20mg/ml的蛋白酶K
10000~12000rpm离心20?30分钟
封口后55~56℃消化0.8~1.0小时
吸上清
待用
而后加入上清液的0.7~1倍体积的异丙醇
?20~?18℃沉淀10~15分钟
沉淀后取出
以10000~12000rpm离心15?20分钟
弃去液体
并用体积浓度为70%的乙醇
离心洗1~2次
自然室温凉干
即得到海蜇碟状体的DNA。
一种鲆鲽鱼类受精卵微管骨架免疫荧光染色观察方法
专利
OAI收割
专利类型: 发明, 专利号: CN200510047579.8, 申请日期: 2007-05-02, 公开日期: 2007-05-02
朱香萍
;
尤锋
;
张培军
;
孙威
;
徐永立
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提交时间:2014/08/04
权利要求书1
②在解剖镜下挑选出发育状态正常的受精卵
③在常温下用浓度百分比为1-2%的Triton-100对样品进行打孔处理
其中:磷酸盐缓冲液成分为128mM NaCl
④采用改进的间接免疫荧光染色步骤对样品进行染色
抚育一抗过夜
清洗液为含有155mM NaCl
抗体稀释液含有浓度百分比为10%的山羊血清和5%的二甲亚砜的Tris盐酸缓冲液
⑤用荧光显微镜或激光扫描共聚焦显微镜进行观察。
一种鲆鲽鱼类受精卵微管骨架免疫荧光染色和显微观察方法
并用解剖针将胚盘从整个受精卵中剥离出来
再在含有80-200mM NaBH4的磷酸盐缓冲液中
2mM KCl
其中:抚育抗体前非特异结合位点不封闭
抚育二抗为避光2-4小时
10mM Tris-Cl
其特征在于包括步骤如下:①采用改进的哌嗪-N
室温下抚育6-16小时
8mM NaH2PO4
pH为7.2-7.4的Tris盐酸缓冲液
N’-双2-乙烷磺酸配制的甲醛-戊二醛固定液对样品进行固定
2mMKH2PO4
及诺纳德P-40
受精卵在该固定液中室温下抚育3-6小时
pH 7.2-7.4
其中诺纳德P-40占Tris盐酸缓冲液浓度百分比的0.1-0.2%
磷酸吐温缓冲溶液清洗
然后在磷酸吐温缓冲溶液中于4℃下保存
待用