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一种从泡叶藻中提取制备低分子岩藻聚糖硫酸酯的方法 专利 OAI收割
专利类型: 发明, 专利号: CN201210424580.8, 申请日期: 2014-05-14, 公开日期: 2014-05-14
韩丽君; 袁毅; 郭书举; 曲桂艳; 刘旭

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一种从泡叶藻中提取制备低分子岩藻聚糖硫酸酯的方法酸浸泡后的泡叶藻固体继续加入其体积3‑6倍的水溶液 2）将上层漂浮物调节至pH5.5‑6.5 将上述依次经稀酸和水浸泡后固态藻体采用纳米高压均质机进行细胞破碎 3）将上述合并液 4）将上述岩藻聚糖硫酸酯粗干品加入其3‑5倍重量的蒸馏水中进行溶解其特征在于：1）将泡叶藻原料于40‑60℃下浸泡提取在泡叶藻原料干藻重量6‑10倍的稀盐酸溶液中1.3‑4.8h 搅拌浸泡4‑7h 在经过滤或高速离心破碎后进行离心分离收集上清液B 过滤液A和上清液B混合均匀后进行超滤去除盐分溶解后通过装有DEAE‑Sepharose F.F.的阴离子交换树脂柱进行洗脱稀酸浸泡液待用收集水浸泡液收集过滤液A 而后超滤浓缩至原料重量的1/2体积（V/W）收集洗脱液透析后于55‑65℃低温浓缩并冷冻干燥获得保留上层漂浮物将稀酸浸泡和水浸泡液合并待用浓缩液进行醇沉淀即得到原藻重量1.5‑2.3％的岩藻聚糖硫酸酯。沉淀物干燥即为岩藻聚糖硫酸酯粗干品

一种从沙蜇刺丝囊毒素内分离溶血毒素蛋白的方法 专利 OAI收割
专利类型: 发明, 专利号: CN201110414952.4, 申请日期: 2012-06-27, 公开日期: 2012-06-27
作者: 于华华; 邢荣娥; 李鹏程; 秦玉坤

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一种从沙蜇刺丝囊毒素中分离溶血毒素蛋白的方法所述洗脱液为含不同浓度NaCl的磷酸缓冲液收集采用含0.2M?NaCl的磷酸缓冲液洗脱下的组分 2)将上述所得洗脱组分经微孔滤膜过滤其特征在于：1)将处理后的沙蜇刺丝囊细胞上清液经微孔滤膜过滤 NaCl浓度分别为0 滤液经凝胶色谱柱Superdex200采用0.15M?NaCl 滤液经含DEAE?Sepharose?Fast?Flow阴离子交换柱 0.1 10～50mM 采用洗脱液以1?3mLmin?1流速进行纯化分离 0.2 pH7.0PBS缓冲液以0.2～1.0mLmin?1流速进行分离纯化收集洗脱液在低温下用3～5K的超滤管进行浓缩 0.3和2M 收集洗脱体积处于60～80mL的洗脱液待用而后在2～6℃下用3～5K的超滤管进行浓缩浓缩后即得到从沙蜇刺丝囊毒素中分离溶血毒素蛋白。

一种化合物2,3-二溴-4,5-二羟基苯甲基甲醚的制备方法 专利 OAI收割
专利类型: 发明, 专利号: CN201010261794.9, 申请日期: 2012-03-14, 公开日期: 2012-03-14
韩丽君; 郭书举; 袁毅; 李宪璀; 李婷

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一种化合物2 2)将上述浸泡液在62?65℃下减压浓缩至干 3)溶解后浸膏中加入等体积的乙酸乙酯入震动摇荡至水相接近无色 4)将上述乙酸乙酯相溶液通过硅胶装柱分离其中石油醚和乙酸乙酯混合液按体积比为1∶1进行混合 5)将上述溶解液经凝胶柱依次用洗脱液洗脱 3?二溴?4 得到浸膏萃取分离并用乙酸乙酯相溶液2?3倍体积的石油醚和乙酸乙酯混合液洗涤收集洗脱液纯化后即得到化合物2 5?二羟基苯甲基甲醚的制备方法而后将浸膏中加入其5?10倍体积的水进行溶解乙酸乙酯相溶液保留待用收集洗脱液并减压浓缩至干 3?二溴?4 其特征在于：1)将粉碎后原料扇形叉枝藻与85?95％的乙醇按体积比为1∶10?1∶12的比利浸泡24?48小时浓缩物溶解待用 5?二羟基苯甲基甲醚。待用

一种从霞水母刺丝囊毒素内分离热激蛋白60的方法 专利 OAI收割
专利类型: 发明, 专利号: CN201010596892.8, 申请日期: 2011-08-17, 公开日期: 2011-08-17
作者: 邢荣娥; 李鹏程; 于华华; 秦玉坤

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一种从霞水母刺丝囊毒素中分离热激蛋白60的方法 2)步骤1)所得上清液即为霞水母刺丝囊细胞毒素于2?6℃下对pH7.820mM?Tris?HCl缓冲液透析过夜 3)将步骤2)所得上清液过滤 4)将步骤3)用截留分子量为3kDa的超滤管浓缩的浓缩物用凝胶树脂Superdex75柱纯化分离其特征在于：1)将从霞水母触手中得到的霞水母刺丝囊细胞加入预冷缓冲液中破碎然后低温离心而后将其上含DEAE?SepharoseFast?Flow的阴离子交换树柱进行分离采用含有浓度为0.15?0.5M的NaCl的pH7.820mM?Tris?HCl缓冲液洗脱破碎后低温离心收集上清液首先采用pH7.820mMTris?HCl缓冲液洗脱流速为0.2?0.5mLmin?1 收集上清液待用而后采用含有浓度分别为0.1?2M不同浓度的NaCl的pH7.820mM?Tris?HCl缓冲液进行梯度洗脱收集各洗脱峰待用收集各洗脱峰其中流出体积50mL?80mL内的组分即为热激蛋白60。而后用截留分子量为3kDa的超滤管浓缩待用

一种对虾肠道微生物DNA的提取方法 专利 OAI收割
专利类型: 发明, 专利号: CN200910263665.0, 申请日期: 2010-06-23, 公开日期: 2010-06-23
刘淮德; 王雷; 刘梅; 王宝杰; 蒋克勇

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一种对虾肠道微生物DNA的提取方法 2)将洗脱液在200g离心5-10min 沉淀中加0.8-1.2mL?PBS以200g离心取上清菌液 3)将步骤2)所得上清菌液以1200g离心5-10min 4)将步骤3)所得上清菌液中加100-150μLCTAB提取液和10-15μL溶菌酶而后加15-20μL?20％(W/C)SDS和10-15μL蛋白酶K 5)将水浴后菌液在4℃?3200g离心8-15min 6)将水浴后菌液以3200g离心8-15min 7)将步骤6)所得上清菌液中加上清菌液体积0.6-0.8倍的异丙醇 8)将步骤7)所得沉淀中加入600-800μL?70％预冷乙醇其特征在于：1)将0.01-0.05g对虾肠道在液氮下研磨取上清菌液待用将两次离心所得上清菌液合并收集上清菌液放入37℃摇床 60-70℃水浴1-2h 取上清菌液取上清菌液而后于-20℃静置1-2h 14000g离心10-15min 并加入0.8-1.2mL?PBS 合并上清液以300g离心5-10min 振荡30-40min 而后加100-150μL?CTAB液和20-25μL?20％SDS混匀后而后加入与上述上清菌液等体积的酚/氯仿混合液再以4℃?14000g离心10-15min 所得沉淀即为对虾肠道微生物DNA。 15-25μL?PVPP匀浆和200-300μL?0.5％Tween-80 取上清菌液待用涡旋 14000g离心10-15min 所得沉淀待用均匀后吹打洗脱3-5min 60-70℃水浴10-15min 取上清菌液待用

一种从新鲜海带中提取含碘氨基酸的方法 专利 OAI收割
专利类型: 发明, 专利号: CN200810249531.9, 申请日期: 2010-06-23, 公开日期: 2010-06-23
韩丽君; 李敬; 袁毅; 史大永

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一种从新鲜海带中提取含碘氨基酸的方法 2)将海带加入到提取液中过滤 3)提取液用蒸汽三效浓缩罐浓缩至原提取液总重量的4-10％ 4)在pH为2-3的条件下用0.5-2浓缩液体积的1-1.5mol/LNH4OH或0.05-0.1mol/L?NaOH洗脱 5)再次用三效蒸汽浓缩罐浓缩至干其特征在于：可按如下步骤操作所述提取液海带重量3-4倍的质量浓度13-18％甲酸溶液或5-6mol/L?HCl溶液得提取液得浓缩液过大型732阳离子交换树脂柱获得含碘氨基酸粗品。 1)将新鲜海带搅拌提取16-20小时调节pH为2-3 除去杂质和外来物并且控干海带的表面的水分

一种分离纯化组蛋白H4的方法 专利 OAI收割
专利类型: 发明, 专利号: CN200610047932.7, 申请日期: 2008-04-02, 公开日期: 2008-04-02
作者: 邢荣娥; 李鹏程; 于华华

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1 而后将其在相对离心力为9160-29700g下离心10-30min (2)分离纯化：①加样前样品预处理：将步骤1)得到的样品在2℃-6℃下加入到离子交换剂中 ②将已吸附蛋白的离子交换剂注入到层析柱中 ③洗脱：采用含有NaCl的缓冲液一种分离纯化组蛋白H4的方法取上清液备用每隔8-12min搅拌一次用3-5倍床体积的缓冲液淋洗以60-90ml/h的洗脱速度进行阶段性洗脱其特征在于包括以下步骤：(1)提取样品：将50g-150g的海蜇样品破碎共搅拌2-6次收集组分。然后加入样品重量0.5-4倍的缓冲液而后在相对离心力为573-1467g下放入2℃-6℃下离心5-10min 浸泡0.5-48hh 弃去上清液

1,2－二酰基－3－（6－脱氧－6－磺酸基－α－D－吡喃型葡萄糖苷基）－sn－甘油脂的制备方法 专利 OAI收割
专利类型: 发明, 专利号: CN01128229.0, 申请日期: 2003-04-09, 公开日期: 2003-04-09
范晓; 韩丽君; 李宪璀; 娄清香

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1.一种1 2)二乙基氨基乙基纤维素的预处理与装柱二乙基氨基乙基纤维素经酸碱预处理后 3)1 4)1 (2)按每克粗品50g～100g硅胶的比例 2-二酰基-3-(6-脱氧-6-磺酸基-α-D-吡喃型葡萄糖苷基)-sn-甘油脂的制备方法用甲醇 2-二酰基-3-(6-脱氧-6-磺酸基-α-D-吡喃型葡萄糖苷基)-sn-甘油脂粗品的制备取所述海藻总脂溶于3∶2至1∶1体积比的氯仿-甲醇混合溶剂 2-二酰基-3-(6-脱氧-6-磺酸基-α-D-吡喃型葡萄糖苷基)-sn-甘油脂粗品的纯化(1)将所述1 称取100～200目硅胶其特征在于按如下步骤操作：1)海藻总脂的提取用有机溶剂浸提粉碎的海藻氯仿清洗加到层析柱柱床表面 2-二酰基-3-(6-脱氧-6-磺酸基-α-D-吡喃型葡萄糖苷基)-sn-甘油脂粗品溶于用1∶1体积比配制的氯仿-甲醇中在100～120℃下活化1.5～3小时提取液中加入0.3～1％的氯化钾溶液分层用乙酸处理继续用所述混合溶剂洗脱掉杂质加入0.3～1％KCl溶液冷却后悬浮在冷丙酮中装柱将有机相减压蒸干悬浮在甲醇中装柱再用体积比为12∶8∶(0.5～1.5)的CHCl3∶CH3OH∶NH3·H2O混合溶剂洗脱其最后氯仿-甲醇-水的比例为1∶1∶0.5～1 将所述纯化后得到海藻总脂得到1 离心分层 2-二酰基-3-(6-脱氧-6-磺酸基-α-D-吡喃型葡萄糖苷基)-sn-甘油脂粗品弃掉水相除去乙酸铵

高效液相色谱在生物医药研究中的应用——第四讲高效液相色谱法在糖类研究中应用 期刊论文 OAI收割
色谱, 1991, 期号: 02, 页码: 103-107
作者: 方积年; 魏远安

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色谱方法学缓冲液固定相糖类碳水化合物流动相洗脱体积硅胶单糖多糖多聚糖寡糖衍生化大分子

大孔巯基树脂富集分离石墨炉原子吸收测定岩矿中微量金 期刊论文 OAI收割
黄金, 1983, 期号: 2, 页码: 56-60
杜新元; 肖叔平

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微量金石墨炉原子吸收大孔巯基树脂富集分离树脂柱疏基岩矿洗脱液体积